采用ACQUITYUPLCHClass系統無需衍生化快速測定黃曲霉毒素

目標

在不進行衍生的條件下, 證明ACQUITY UPLC? H-CLASS系統的多元混合能力，配合使用沃特世 黃曲霉毒素分析包，可提高黃曲霉毒素M1，G2，G1，B2和B1分離的分辨率且縮短分析時間。

背景

黃曲霉毒素是由真菌、黃曲霉菌和寄生曲霉代謝生成的一組真菌毒素。它們可出現在各種食品中，如谷物、花生、調味料和乳制品。天然形成的黃曲霉毒素有四種：B1，B2，G1和G2。二次代謝產物M1，是乳牛食用B1污染的谷物后代謝生成的副產物，可污染乳制品，如牛奶。 這些化合物具有毒性，可對人類和動物產生致癌作用。B1和G1是四種天然產生的毒素中毒性最大的兩種。由于其毒性強，政府法規部門對食品中黃曲霉毒素的含量進行了嚴格的限制。因此，食品行業需要靈敏、精確且重現性良好的分析方法對這些物質進行檢測。這些方法通常基于反相HPLC色譜分離和熒光檢測。但是，由于反相洗脫會使黃曲霉毒素B1和G1的熒光效應發生猝滅，通過使用衍生化以增強這些待測物的反應。常規檢測是使用三氟乙酸（TFA）進行柱前衍生以及采用碘法、電化學衍生溴法或光化學UV衍生法的柱后衍生。 這些方法耗時較長，并且需要購置昂貴的柱后反應器，或為了獲得電化學生成溴而購置的電化學單元。尤其是TFA的使用會增加技術人員的安全隱患。

解決方案

樣品前處理采用基于VICAM AflaTest?P方法學的沃特世黃曲霉毒素分析包進行處理。采用ACQUITY UPLC H-CLASS系統，配合其UPLC?優化的熒光（FLR）檢測器，黃曲霉毒素M1，G2，G1，B2和B1的基線分離分析時間為4.5分鐘。無需進行衍生化。ACQUITY  UPLC H-CLASS系統擁有四元溶劑管理器（QSM）和Auto.Blend  TM技術，可對溶劑進行動態程序化混合。將水、甲醇和乙腈的三路混合連接ACQUITY UPLC BEH C18柱即可完成分離。

  圖1. 采用FLR 檢測器和高通量流通池的ACQUITY UPLC H-CLASS系統進行黃曲霉毒素分離

總結

采用ACQUITY UPLC H-CLASS系統兩個最直接的優勢是，保留了傳統HPLC儀器的操作方法的同時，應用UPLC的功能，可將分析時間從12分鐘大大縮短至4.5分鐘。 消除柱后衍生系統和柱后流量降低造成的譜帶展寬，形成尖峰，實現高信噪比。因此能夠實現更精確的積分和定量。無需衍生化也可以簡化系統，降低對培訓、故障排除和維護的需求。另外，采用UPLC替代HPLC也可以降低約85%的溶劑消耗量。

配有FLR檢測器和黃曲霉毒素分析包的ACQUITY UPLC H-CLASS系統可使實驗室更靈敏地對黃曲霉毒素進行定量分析而無需進行衍生化。分析時間的減少可使得樣品周轉更快，效率更高。