靶細胞殺傷實驗：CFSE／PI法

做免疫學特別是腫瘤學實驗，總免不了要測淋巴細胞或其他細胞對腫瘤細胞的殺傷，老外最常用的是Cr51放射實驗，但這個方法在國內的不少地方都不能做，而MTT這個方法又太老了，而且也不準確，那么替代方法就用流式細胞術，又方便，又準確。

1、計數靶細胞，并加入CFSE，使CFSE終濃度達到2uM，37度30分鐘。

2、拿出后，1000rpm，5min，可隱約看到細胞染成黃色，PBS洗三次

3、與效應細胞混培，作用4-6小時。

4、將細胞混合液消化取出，洗二次，PI工作液5ul，避光30分鐘后上流式。

5、CFSE，PI雙陽性的細胞為被殺傷的靶細胞，除以靶細胞總數，即為殺傷率。

注意事項

1、CFSE及PI的濃度必須注意，寧低勿高，個人感覺，如果標高的話，在4度放一晚好像會好一些。

2、必須設全陰，CFSE單標，PI單標，CFSE＋PI雙標并同步化的靶細胞的參照。

3、作用時間不能太長，不要超過8個小時。