靶細胞殺傷實驗：MTT和CCK8比較

Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
 
WST-8是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。
 
WST-8是MTT的一種升級替代產品，和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先，MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的，可以省去后續的溶解步驟。其次，WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更穩定， 使實驗結果更加穩定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高。

 
該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。
 
總之，CCK-8的原理跟MTT其實是相同的，不同之處在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的，不需要再吸出培養液加入有機溶劑溶解這個步驟，因此可以減少一定的誤差。其他優點就是重復性優于MTT；對細胞毒性小；為1瓶溶液，毋需預制，即開即用。
 
但是CCK-8比MTT的價格要貴不少，所以一般來說，還是MTT法用的多。
 
MTT和CCK-8（上海同仁）的原理基本是一致的，但也存在如下的區別：
 
1、常規操作的MTT法受藥物本身的顏色、培養基的顏色、血清的濃度使結果的變異較大。如采用潘興瑜的MTT改進法將有效的降低試驗的飄變率，本人碩士期間就采用潘的MTT改進法，試驗重復一兩次就的到理想的結果！受益非淺！
 
2、CCK-8是最近新出現的方法，它操作簡便、結果變異率小。對懸浮細胞的測定有它獨到的地方！CCK-8為黃色的，要采用無酚紅的培養基進行測量！
 
本人博士期間采用的CCK-8法，自我認為兩種方法各有千秋，有時不可能互相替代。當你測量藥物的藥效時，如果藥物本身有顏色，那么采用潘的MTT 改進法可以通過離心去除顏色的干擾！多次的離心和吸取上清要求操作者要小心和仔細，否則有降低試驗的準確率，而這卻是CCK-8法的長處所在。