1、將凋亡細胞裂解后高速離心,其上清液中含有核小體; 2、在微定量板上吸附組蛋白體; 3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結合; 4、加辣過氧化物酶標記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結合; 4、加酶的底物,測光吸收制。......閱讀全文
1、將凋亡細胞裂解后高速離心,其上清液中含有核小體; 2、在微定量板上吸附組蛋白體; 3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結合; 4、加辣過氧化物酶標記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結合; 4、加酶的底物,測光吸收制。
基本原理????1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。這一方法的基本原理是:①使抗原
一、形態學觀察方法(一)HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。(二)丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。(三)臺盼藍染色:如果細胞膜
第一招:霧里看花——形態學觀察方法 ? (一)HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。 (二)丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體
一、形態學觀察方法(一)HE染色、光鏡觀察:凋亡細胞呈圓形,胞核深染,胞質濃縮,染色質成團塊狀,細胞表面有“出芽”現象。(二)丫啶橙(AO)染色,熒光顯微鏡觀察:活細胞核呈黃綠色熒光,胞質呈紅色熒光。凋亡細胞核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側,可見細胞膜呈泡狀膨出及凋亡小體。(三)臺盼藍染色:如果細胞膜
在細胞核中,基因組DNA緊緊包裹在核小體上形成染色質,但基因在如此緊密的包裝中是無法表達的。現在德國慕尼黑大學LMU的研究團隊,揭示了局部釋放核小體DNA的分子機制,正是這一機制使染色體DNA得以轉錄。文章發表在本期的Nature雜志上。 高等生物的細胞核負責儲存基因組DNA,這些DNA環
1 標本的采取和保存?可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝
4、DNA 5’末端32P標記 (1)將脫磷酸樣品DNA置冰浴上,再加雙蒸水10μl,10×緩沖液2μl,T4多核苷酸激酶10U,32P-ATP 740kBq(20μCi),雙蒸水加至20μl。 (2)混合后,37℃水浴60min。 (3)加入1μl的0.5mol/L EDTA,90℃滅活5min
近年來在食品檢驗、疾病診斷和預防的過程中ELISA檢測也日益凸現其重要作用。 酶聯免疫吸附劑測定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)即采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液
凋亡細胞是核小體的重要來源,當SLE患者的吞噬細胞對凋亡細胞的清除能力受損或降低,導致核小體在患者體內大量存積,多聚核小體與活化的單核細胞結合后被抗原遞呈細胞呈遞給CD4+Th2細胞,Th2細胞增殖活化,激活B細胞產生抗核小體抗體(AnuA)。 AnuA特異性高,與SLE病情活動性相關,通常采