鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黃阜苷增溶液考馬斯亮藍染色液丙烯酰胺溶液BN 凝膠緩沖液實驗步驟3.1 BN-PAGE 樣品的制備所有樣品制備步驟必須在 4°C 下操作,在開始制備樣品前(見 26.3.1 節 1 和 26. 3.1 節 2) ,要制備好 BN 凝膠(見 26. 3. 2) 。1. 膜組分( 1 ) 按照標準的方法步驟制備要研究的膜組分,如細胞質膜、類囊體膜或線粒體膜。或者使用完整細胞器,如質體、線粒體或過氧化物酶體,作為 BN-PAGE 的初始實驗材料。( 2 ) 確定蛋白質濃度,如用 Lowry 方法等。( 3 ) 將蛋白質濃度調為 10 μg/μl。( 4 ) 15000 g 離心 100 μl 樣品 10 min,沉淀膜或細胞器組分。( 5 ) 用十二烷基 β-D-麥芽糖苷,Triton X-100 或洋地黃皂苷增溶液懸浮沉淀物(見注釋 1)。( 6 ) 將懸......閱讀全文
鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒: 十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? TritonX-100 增溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黃阜苷增溶液考馬斯亮藍染色液丙烯酰胺溶液BN 凝膠緩沖液實驗步驟3.1 BN-PAGE 樣品的制備所有樣品制備步驟必須在 4°C 下操作,在開始制備樣品前(見 26.3.1 節 1 和 26. 3.1 節 2) ,要制備好
鑒定分析植物蛋白復合物的藍綠非變性凝膠電泳實驗
試劑、試劑盒?十二烷基 β-D-麥芽糖苷增溶液TritonX-100 增溶液洋地黃阜苷增溶液考馬斯亮藍染色液丙烯酰胺溶液BN 凝膠緩沖液實驗步驟 3.1 BN-PAGE 樣品的制備所有樣品制備步驟必須在 4°C 下操作,在開始制備樣品前(見 26.3.1 節 1 和 26. 3.1 節 2) ,要制
非變性凝膠電泳的概念
中文名稱非變性凝膠電泳英文名稱nondenaturing gel electrophoresis;native gel electrophoresis定 義不含變性劑,以聚丙烯酰胺、瓊脂糖等凝膠為分離介質的電泳。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
由非變性凝膠電泳遷移率法評估均一性實驗
當蛋白質在保持其天然構型不變的條件下進行電泳時,其遷移率可以作為它的均一性的一種量度。由于遷移率是電荷和形狀兩者的函數,因此可以預期,能將單體、二聚體等形式彼此分開。也有可能因異構體形狀的差異而用非變性凝膠電泳把蛋白質的構象異構體(conformational isomer) 分開。本實驗來源于蛋白
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗
試劑、試劑盒尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材等電聚焦儀IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟3.1 第一向:在 IPG 膠條中進行等電聚焦( IPG-IEF)采用 IPG ( IPG
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗
試劑、試劑盒尿素裂解溶液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? IPG 干膠條水化液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗(三)
使用 IPGphor 進行 IEF 的典型工作條件見表13-2和 表 13-3 。正如前文指出的那樣 ,為了使高分子質量的蛋白質更好地進入聚丙烯酰胺膠內,水化時應在膠條兩端加低電壓(30~50 V ) ,否則將給水化上樣造成困難[ 15,28] 。然后電壓逐步升高至 8000 V。如果 I
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗(二)
2. 在平板儀器上進行 IPG-IEF ( Multiphor ll Unit)滿足下列條件時,水化后的 IPG 膠條可以直接放在 IEF 儀器的冷卻板上:① 如果運行時間不超過 12 h ( 經常發生在寬的或中等 pH 范 圍 IPG,如 IPG 3~10 或 4~7 ) 。② 如果 pH 梯
植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗(一)
試劑、試劑盒?尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材?等電聚焦儀 IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟 3.1 第一向:在 IPG 膠條中進行等電聚焦( IPG-IEF)采用 IPG (