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（1）CaCl2處理以后的轉化: 當細菌處于0℃、二價陽離子（如Ca2+、Mg2+等）低滲溶液中時，細菌細胞膨脹成球形，處于感受態；此時轉化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羥基-鈣磷酸復合物粘附于細胞表面，重組DNA在42℃短時間熱沖擊后吸附在細胞表面，在豐富培養基中生長數小時后，球狀細胞恢復原狀并繁殖，該方法的轉化效率為每微克DNA可獲得105-106轉化子。環狀DNA比線狀DNA分子轉化效率高1000倍左右。本法的關鍵是選用的細菌必須處于生長對數期，實驗操作必須在低溫下進行。（2）電擊法: 也稱電穿孔法，電擊法（electroporation）最早用于將DNA導入真核細胞，利用高壓脈沖，在細菌細胞表面形成暫時性的微孔，重組DNA從微孔中進入，脈沖過后，微孔復原，在豐富培養基中生長數小時后，細胞增殖，重組DNA得到大量復制。除需特殊儀器外，它比CaCl2操作簡單，無需制備感受態細胞，適用于任何菌株。其轉化效率較高，每微......閱讀全文
同源重組技術原理：基因敲除鼠技術是上世紀80年代中后期基于DNA同源重組的原理發展起來的，Capecchi和Smithies在1987年根據同源重組（homologous recombination）的原理，首次實現了ES的外源基因的定點整合（targeted integration），這一技術稱為
哈嘍，小伙伴們！走過不要錯過，又到了科普知識的時間了，喜歡做分子實驗的小伙伴一定聽說過Southern blot這門檢測技術，但大家知道為什么叫Southern嗎？今天小編就為大家科普一下這門實驗技術。 Southern Blot是最早出現的blot（印跡）技術，它是檢測DNA的一種方法。
人類基因組計劃的主要任務之一就是要從大片段基因組區域或整條染色體DNA 上鑒定出基因表達序列(gene expressed sequences)或轉錄單位(transcription units)。在人類基因組30億個堿基對中，發生轉錄的表達序列(即基因)僅占總序列的3～5％。基因組中絕大部
在中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院賴良學課題組用于研究的養豬場里，生活著一群特別的豬。這里不僅有十幾頭帶有基因剪刀的工具豬，而且擁有六七百頭其他在生物醫藥領域具有重要應用價值的基因修飾豬。而這些豬的用途聽起來更加“駭人”，有些基因修飾豬可以模擬人類疾病，如老年癡呆癥、漸凍人癥和亨廷頓舞蹈癥等，
在中國科學院廣州生物醫藥與健康研究院賴良學課題組用于研究的養豬場里，生活著一群特別的豬。這里不僅有十幾頭帶有基因剪刀的工具豬，而且擁有六七百頭其他在生物醫藥領域具有重要應用價值的基因修飾豬。而這些豬的用途聽起來更加駭人，有些基因修飾豬可以模擬人類疾病，如老年癡呆癥、漸凍人癥和亨廷頓舞蹈
近年來，由核酸酶介導的靶向基因組編輯技術發展迅速，CRISPR/Cas9基因編輯系統以其簡便性、高效性等特點而備受關注。CRISPR/Cas9系統對致病基因突變進行糾正通常是利用DNA同源重組修復來實現的，該過程需要同時提供一個外源DNA作為供體以重新編碼DNA序列達到基因編輯的目的。但伴隨而來
秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis elegans）是著名的模式動物，以其細胞家族樹而聞名，通過一系列的細胞分裂產生各種成體細胞類型。在二十世紀七十年代中期，科學家們付出了巨大的努力，在無數個小時的基本顯微鏡探索中記錄了這棵細胞樹，這是一個傳奇。 近幾十年來，體內標記和追蹤細胞的方法已
圖4. Southern blot鑒定同源重組事件[4]另外，在制備基因敲進和條件性基因敲除模式小鼠過程中，Southern blot檢測是非常重要的一步。在我們以往的工作中，其中一例Cre定點敲進課題（如圖5），Southern blot檢測結果顯示：小鼠1號，有明顯的隨機插入現象。圖5