獲得高質量土壤RNA的10個建議
前面的文章我們介紹了如何提取土壤DNA。大篇幅詳細講解了影響DNA得率和純度的研磨均質、化學試劑（重點是裂解緩沖液）等問題。做DNA遠沒有做RNA壓力大。不用太擔心降解，得率還挺高。RNA就不一樣。。。提取土壤RNA是環境分子生物學研究最難的研究方法之一。RNA提取本身就是件艱巨的任務，提取土壤的RNA挑戰更大。最大的困難之一是土壤RNA得率。從土壤中獲得RNA遠比DNA少，前者僅有后者的10-20%，所以需要比提DNA更多的加樣量。因此需要用更大的研磨管（15ml）和更大的離心機。另一個大問題是腐植酸等抑制因子的污染。RNA實驗對純度要求很高，當逆轉錄尋找低拷貝數基因時，你無法稀釋RNA樣品。要求加入反應體系中的RNA濃度足夠高且不能含有抑制因子。提取土壤RNA需要特殊條件因此，MO BIO開發出了一套不使用二氧化硅離心柱的方法來提取土壤RNA。下面討論關于RNA PowerSoil Kit以及何如獲得更好的提取效果。這套操作......閱讀全文
從土壤中輕松獲取高質量RNA
詳細介紹：從土壤中輕松獲取高質量RNA眾所周知，從土壤中提取DNA已非易事，而想從中再提取RNA可說是難上加難。DNA不容易提取是因為本身土壤中富集的材料就少，提取過程相對復雜，造成操作損失；而RNA不容易提取除了以上所提到的原因外，還有一個很關鍵的原因——無處不在的RNA酶，對RNA的穩定存在構成
獲得高質量土壤RNA的10個建議
前面的文章我們介紹了如何提取土壤DNA。大篇幅詳細講解了影響DNA得率和純度的研磨均質、化學試劑（重點是裂解緩沖液）等問題。做DNA遠沒有做RNA壓力大。不用太擔心降解，得率還挺高。RNA就不一樣。。。提取土壤RNA是環境分子生物學研究最難的研究方法之一。RNA提取本身就是件艱巨的任務，提取土壤的R
RNA干涉(RNA Interference，RNAi)（2）
早期的 RNAi 技術可用在研究與胚胎發育相關基因的功能上，但是由于細胞分裂造成 dsRNA 的稀釋，使得這種方法在研究成體的基因功能時有一定的局限性。為彌補早期 RNAi 技術的不足，Tavernarakis 等將 RNAi 技術做了一些改進及更動，將目的基因之標的序列以反向重復的方式，由
RNA干擾技術(RNA interference，RNAi)
1995年，康乃爾大學的Su Guo博士在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷上述基因的表達，而同時在對照實驗中給線蟲注射正義RNA（sense RNA）以期觀察到基因表達的增強。但得到的結果
RNA干涉(RNA Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面，基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物（genetically modified organisms）的障礙，另一方面，它又是植物抵抗外來核酸入侵（如病毒）的一種反應，為植物抗病毒的遺傳育
RNA提取時RNA降解原因
1 ) 新鮮細胞： 裂解液的量不足，使得裂解不充分。 2 ) 新鮮組織： 某些含有內源性核酸酶的樣品，很難避免RNA酶的降解，建議采用的方法為在液氮條件下將組織研碎，并且，勻漿時采用更多的裂解液。 3 ) 冷凍樣品： 樣品取材后應該迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉移到-70℃冰箱存
RNA提取心得（組織RNA提取和培養細胞的RNA提取）
一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織，這樣RNA提取的效果比較好，這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的（最好在半年之內，-80℃或者液氮中凍存的）組織，注意不要反復凍融，從冰凍狀態拿到0-4℃，注意不要拿到常溫，待組織解凍后，用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織，稱重后，放到預冷的勻漿器中，然后
RNA干擾相關知識--RNA-RITS）
RNA-induced initiation of transcriptional gene silencing（RITS）：是一種組織染色質變型的復合物。RITS復合物也包含Dicer加工形成的siRNA和AGO蛋白質，通過結合到異染色質的基因池上來促使異染色質上基因的沉默。
RNA分離與分析實驗_分離RNA
實驗材料標記細胞試劑、試劑盒乙酸緩沖液儀器、耗材漩渦器實驗步驟1. 收獲標記細胞。2. 小心處置上清液，用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸緩沖液懸浮細胞沉淀，每 1 ml 壓積細胞用 10 ml 緩沖液。3. 于室溫用漩渦器振蕩裂解細胞。4. 加等體積的水飽和酚，充分混勻，于 60
反義技術——RNA干擾（RNA interference，RNAi）
最近由于RNA干擾（RNA interference，RNAi）的發現使反義領域的研究增多。這種自然發生的現象最早是在秀麗線蟲中發現的（1），是序列特異性地使轉錄后的基因沉默的有力機制。由于最近兩年在RNAi領域取得的進步，已經有許多這方面的綜述發表（2-4）。RNA干擾是由長的雙鏈 RNA