植物過氧化物酶測定
實驗概要本文介紹了植物過氧化物酶同工酶測定的基本原理及操作步驟等。實驗原理聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成,具有三維網狀結構,其網孔大小可由凝膠濃度和交聯度加以調節。凝膠電泳兼有電荷效應和分子篩效應。被分離物質由于所載電荷數量、分子大小和形狀的差異,因此在電泳時產生不同的泳動速率而相互分離。利用特異性的顏色反應使待測酶著色,這樣就可在凝膠中展現出酶譜。過氧化物酶是植物體內常見的氧化酶。植物體內許多生理代謝過程常與它的活性及其同工酶的種類有關。利用過氧化物酶能催化H2O2把聯苯胺氧化成藍色或棕褐色產物的原理,將經過電泳后的凝膠置于有H2O2及聯苯胺的溶液染色,出現藍色或棕褐色部位即為過氧化物酶同工酶在凝膠中存在的位置,多條有色帶即構成過氧化物酶同工酶譜。本實驗利用連續的盤狀凝膠電泳,采用Tris-Gly緩沖系統來分離陰離子過氧化物酶同工酶。主要試劑1. 分離膠緩沖液(pH8.9):1mol/L ......閱讀全文
過氧化物酶抗過氧化物酶染色
中文名稱過氧化物酶-抗過氧化物酶染色英文名稱peroxidase-anti-peroxidase staining;PAP staining定 義先用第一抗體與待檢測的抗原結合,再用第二抗體與第一抗體及過氧化物酶-抗過氧化物酶復合體結合,依靠過氧化物酶所催化的呈色反應即可對抗原作定位或定量分析的一
髓過氧化物酶和過氧化物酶的差異
過氧化物酶是過氧化物酶體的標志酶,是其一類氧化還原酶,它們能催化很多反應。過氧化物酶是以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶。主要存在于載體的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫,氧化酚類和胺類化合物和烴類氧化產物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類、醛類、苯類毒性的雙重作用。
過氧化物酶抗過氧化物酶染色的方法特點
中文名稱過氧化物酶-抗過氧化物酶染色英文名稱peroxidase-anti-peroxidase staining;PAP staining定 義先用第一抗體與待檢測的抗原結合,再用第二抗體與第一抗體及過氧化物酶-抗過氧化物酶復合體結合,依靠過氧化物酶所催化的呈色反應即可對抗原作定位或定量分析的一
過氧化物酶抗過氧化物酶染色的功能介紹
中文名稱過氧化物酶-抗過氧化物酶染色英文名稱peroxidase-anti-peroxidase staining;PAP staining定 義先用第一抗體與待檢測的抗原結合,再用第二抗體與第一抗體及過氧化物酶-抗過氧化物酶復合體結合,依靠過氧化物酶所催化的呈色反應即可對抗原作定位或定量分析的一
過氧化物酶試驗
試劑 2%兒茶酚溶液。 3%過氧化氫溶液。?試驗方法 挑取固體培養基上菌落一接種環,置于潔凈試管內,滴加2%兒茶酚溶液1mL及3%過氧化氫溶液1mL。靜置于室溫(20℃)中30~60min,觀察結果。?結果 陽性反應,細菌變為黑褐色;陰性反應,細菌不變色。 注:過氧化物酶的作用可受氰化鉀的
過氧化物酶簡介
過氧化物酶是由微生物或植物所產生的一類氧化還原酶,它們能催化很多反應。過氧化物酶是以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶。主要存在于載體的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫,氧化酚類和胺類化合物和烴類氧化產物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類、醛類、苯類毒性的雙重作用。
過氧化物酶抗過氧化物酶復合物的制備
實驗概要本實驗介紹了制備過氧化物酶-抗過氧化物酶復合物的操作步驟。主要試劑1. HRP和兔(或羊)抗HRP:抗HRP用HRP免疫兔(或羊)獲得2. 0.075mol/L醋酸鈉-0.15 mol/L醋酸銨等量混合液3. 0.1mol/LHCl和0.01mol/LHCl4. 飽和硫酸銨溶液5. 0.01
豆殼過氧化物酶介紹
1) soybean hull peroxidase豆殼過氧化物酶1.The effects of affinity ligand (polyethylene glycol (PEG)- iminodiacetic acid (IDA)-Cu(II)) on the affinitypartitio
過氧化物酶的應用
如過氧化氫酶便是過氧化物酶的一種。過氧化氫酶可與葡萄糖氧化酶配合使用,脫除蛋清中的葡萄糖,代替了傳統的自然發酵的方法,從而提高產品質量,縮短生產周期。 在醫學上,也可作為工具酶,用于檢驗尿糖和血糖。 現代醫學上認為機體衰老與氧化有關,例如染色體、酶等的氧化。所以,一些有還原性功能的物質可以在
過氧化物酶peroxidase-簡介
氧化還原酶的一種。過氧化物酶是由微生物或植物所產生的一類氧化還原酶,它們能催化很多反應. 過氧化物酶是以過氧化氫為電子受體催化底物氧化的酶。主要存在于細胞的過氧化物酶體中,以鐵卟啉為輔基,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。 過氧化物酶體是由一層單位膜包
過氧化物酶染色實驗
實驗方法原理細胞中的過氧化物E分解過氧化氫釋放出O原子,氧化聯苯胺,變為聯苯胺蘭,使細胞漿中呈現蘭黑色顆粒試劑、試劑盒聯苯胺堿性品紅過氧化氫溶液蒸餾水實驗步驟一、實驗試劑:1. 聯苯胺 0.3g??? 堿性品紅???? 0.3g亞硝基鐵氰化鈉飽和水溶液lml(360毫克/毫升)95%二醇,100ml
植物過氧化物酶測定
實驗概要本文介紹了植物過氧化物酶同工酶測定的基本原理及操作步驟等。實驗原理聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成,具有三維網狀結構,其網孔大小可由凝膠濃度和交聯度加以調節。凝膠電泳兼有電荷效應和分子篩效應。被分離物質由于所載電荷數量、分子大小和形狀的差異,因此在電泳時產
過氧化物酶的應用
如過氧化氫酶便是過氧化物酶的一種。過氧化氫酶可與葡萄糖氧化酶配合使用,脫除蛋清中的葡萄糖,代替了傳統的自然發酵的方法,從而提高產品質量,縮短生產周期。在醫學上,也可作為工具酶,用于檢驗尿糖和血糖。現代醫學上認為機體衰老與氧化有關,例如染色體、酶等的氧化。所以,一些有還原性功能的物質可以在某種程度上抗
免疫過氧化物酶染色
中文名稱免疫過氧化物酶染色英文名稱immunoperoxidase staining定 義利用過氧化物酶標記抗體與抗原結合,然后使酶催化底物,產生有色產物,顯示抗原所在部位的染色方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
谷胱甘肽過氧化物酶簡介
谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)是機體內廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的組成成分,它能催化GSH變為GSSG,使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物,同時促進H2O2的分解,從而保護細胞膜的結構及功能不受過氧化物的干擾及損害。GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸,其活力
過氧化物酶染色實驗
實驗方法原理 細胞中的過氧化物E分解過氧化氫釋放出O原子,氧化聯苯胺,變為聯苯胺蘭,使細胞漿中呈現蘭黑色顆粒試劑、試劑盒 聯苯胺 堿性品紅過氧化氫溶液 蒸餾水實驗步驟 一、實驗試劑:1. 聯苯胺 0.3g ? ?堿性品紅 ? ? 0.3g亞硝基鐵氰化鈉飽和水溶液lml(360毫克/毫升)95%二醇,
過氧化物酶的簡介
過氧化物酶是氧化還原酶的一種。分布在乳汁、白細胞、血小板等體液或細胞中,該酶的輔基亦為血紅素,以H2O2為電子受體催化底物氧化的酶,它催化H2O2直接氧化酚類或胺類化合物,如谷胱甘肽過氧化物酶、嗜酸性粒細胞過氧化物酶和甲狀腺過氧化物酶等,具有消除過氧化氫和酚類胺類毒性的雙重作用,反應如下:R+H
過氧化物酶(POX)染色
實驗原理 血細胞中的過氧化物酶(Peroxidase,POX或MPO)能分解試劑中的底物H2O2,釋出新生態氧,使無色聯苯胺氧化為藍色聯苯胺,后者與亞硝基鐵氰化鈉結合形成藍黑色的顆粒,沉著于細胞質中。實驗方法 材料: 1.1%TMB 2.亞硝基鐵氰化鈉飽和溶液 3.1%過氧化氫溶液 4.
過氧化物酶抗過氧化物酶復合物(PAP)的制備實驗
實驗概要本實驗制備了過氧化物酶-抗過氧化物酶復合物(PAP)。主要試劑1. HRP和兔(或羊)抗HRP:抗HRP用HRP免疫兔(或羊)獲得2. 0.075mol/L醋酸鈉-0.15 mol/L醋酸銨等量混合液3. 0.1mol/LHCl4. 0.01mol/LHCl5. 飽和硫酸銨溶液6. 0.01
豆殼過氧化物酶的性質
豆殼過氧化物酶(Soybean hull peroxidase,SHP,EC1.11.1.7)作為一種新型的氧化還原酶,其特殊的理化性質已受到重視。SHP 在食品、醫藥、環保和化工等行業中已初露鋒芒。就目前的實際應用來看,SHP獨特的穩定性和優良的反應性已使其成為同類酶中“惟我獨尊”的一員:歐洲面包
豆殼過氧化物酶的性質
豆殼過氧化物酶的優良性質如下:(1)熱穩定性好:在 pH2.5-12.0 之間都較穩定,75℃保溫 60 分鐘剩余酶活力為 68%,失活溫度為 90.5℃,而辣根過氧化物酶(HRP)的失活溫度為 81.5℃。(2)作用 pH 范圍寬:從 pH2.5-10.0 均具有催化活性,這樣可以在較寬的 pH
過氧化物酶染色(Washburn法)
1.?實驗原理粒細胞和部分單核細胞的溶酶體顆粒中含有過氧化物酶,pox能分解H2O2釋放出新生氧,使四甲基聯苯胺氧化成聯苯胺藍,后者與亞硝基鐵氰化鈉結合,再進一步氧化形成穩定的藍色物質,沉淀于酶活性的細胞質內。2.?標本采集2.1?病人準備:了解病人是否對局麻藥有過敏史。凝血因子嚴重缺陷引起的出血性
乳過氧化物酶法(LPO)
本法反應溫和,對抗原、抗體免疫活性影響小,已被廣泛應用。缺點是標記率較低,一般為20~40%。 1.原理此法是利用乳過氧化物酶(Lactoperoxidase)有促進微量過氧化氫對125I-的氧化作用,生成125I+,并標記在多肽、蛋白質酪氨酸分子上。 2.方法以標記蛋白質抗原為例。 (1
過氧化物酶的測定實驗
供體:ABTS 供體:愈創木酚 供體:聯二茴香胺 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
過氧化物酶染色實驗原理
過氧化物酶是廣泛存在于生物體中的一類酶,大部分含有血紅素,是一種結合蛋白。它可以催化H2O2或相關有機過氧化合物與有機、無機化合物的氧化反應。血細胞所含過氧化物酶主要為髓過氧化物酶(MPO),MPO是一類糖蛋白,是人類中性粒細胞含量最多的蛋白質,約占細胞干重的3%~5%.用MPOPHMPZE探針
簡述過氧化物酶的應用
如過氧化氫酶便是過氧化物酶的一種。過氧化氫酶可與葡萄糖氧化酶配合使用,脫除蛋清中的葡萄糖,代替了傳統的自然發酵的方法,從而提高產品質量,縮短生產周期。 在醫學上,也可作為工具酶,用于檢驗尿糖和血糖。 現代醫學上認為機體衰老與氧化有關,例如染色體、酶等的氧化。所以,一些有還原性功能的物質可以在
過氧化物酶的形態結構
過氧化物酶體(peroxisome)又稱微體(microbody), 過氧化物酶體在1954年被發現時,由于不知道這種顆粒的功能,將它稱為微體(microbody)。 過氧化物酶體與溶酶體不同,過氧化物酶體不是來自內質網和高爾基體,因此它不屬于內膜系統的膜結合細胞器。過氧化物酶體普遍存在于真核
過氧化物酶的功能反應
過氧化物酶體的功能: (1)使毒性物質失活 這種作用是過氧化氫酶利用過氧化氫氧化各種底物, 如酚、甲酸、甲醛和乙醇等,氧化的結果使這些有毒性的物質變成無毒性的物質,能有效分解甲醛、甲苯。同時也使H2O2進一步轉變成無毒的H2O。這種解毒作用對于肝、腎特別重要, 例如人們飲入的乙醇幾乎有一半是
過氧化物酶的應用介紹
如過氧化氫酶便是過氧化物酶的一種。過氧化氫酶可與葡萄糖氧化酶配合使用,脫除蛋清中的葡萄糖,代替了傳統的自然發酵的方法,從而提高產品質量,縮短生產周期。在醫學上,也可作為工具酶,用于檢驗尿糖和血糖。現代醫學上認為機體衰老與氧化有關,例如染色體、酶等的氧化。所以,一些有還原性功能的物質可以在某種程度上抗