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本實驗中必須保持RNase污染以免RNA降解。所有試劑用DEPC水配制，用具也用DEPC水沖洗，并滅菌。 ①電泳RNA所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。 ②用新的1XTBE配制1.2%瓊脂糖凝膠，倒膠時溴化乙錠（EB）直接加入凝膠中。 ③制備好的瓊脂糖凝膠板放入電泳槽后再加入經高壓滅菌過的1XTBE，液面只能剛好同膠面平齊，緩沖液不要淹過膠面。 ④點樣時，樣品RNA每10μl加入2μl上樣緩沖液，上樣緩沖液是用DEPC處理的水配制的50%甘油，另外單獨點一樣品孔含有3μl溴酚藍的上樣緩沖液作為電泳指示劑，電泳電壓4V/cm，電泳時間2h左右便可取出凝膠在紫外燈下觀看所提取的RNA的質量或進行拍照記錄。......閱讀全文
本實驗中必須保持RNase污染以免RNA降解。所有試劑用DEPC水配制，用具也用DEPC水沖洗，并滅菌。 ①電泳RNA所用器械如制膠的模具、梳子、電泳槽等用肥皂粉洗干凈后用雙蒸水沖洗二遍后在室溫晾干備用。 ②用新的1XTBE配制1.2%瓊脂糖凝膠，倒膠時溴化乙錠（EB）直接加入凝膠中。 ③
1、將制膠用具用70%乙醇沖洗一遍，晾干備用。 2、制膠：稱取0.5g瓊脂糖粉末，加入放有36.5mL的DEPC水（蒸餾水40ml）的錐形瓶中，加熱使瓊脂糖完全溶解。稍冷（60~70°）卻后加入5ml的10x電泳緩沖液、8.5（9）ml的甲醛（+0.5μl溴化乙錠）。然后在膠槽中灌制凝膠，插好
1、0.1%DEPC水：200ml雙蒸去離子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混勻，室溫放置過夜，高壓滅菌。 2、10x電泳緩沖液：嗎啉代丙烷磺酸（MOPS）0.4mol/L（pH 7.0）；NaAc 0.1mol/L；乙二胺四乙酸(EDTA) 10mmol/L； 3、50mL變性瓊脂糖凝
RNA可以使用非變性或變性凝膠電泳進行檢測。在非變性電泳中，可以分離混合物中不同分子量的RNA分子，凡是無法確定分子量。只有在變性情況下，RNA分子完全伸展，其泳動率才與分子量成正比。 判斷RNA提取物的完整性是進行電泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的電泳圖譜應可清晰看到18s rR
1．選用優質的瓊脂糖：不同品牌的瓊脂糖在質量上有較大的差異。劣質瓊脂糖會導致DNA條帶模糊，甚至條帶缺失。因此請盡量選擇質量穩定可靠的品牌。 2．選擇適當的凝膠濃度： 瓊脂糖凝膠的線性DNA分辨范圍 3．凝膠制備：配制凝膠和電泳應選用相同的1x緩沖液；使用的容器體積至少是凝膠
1.緩沖系統：在沒有離子存在時,電導率最小,DNA不遷移,或遷移極慢,在高離子強度的緩沖液中,電導很高并產熱,可能導致DNA變性,因此應注意緩沖液的使用是否正確.長時間高壓電泳時,常更新緩沖液或在兩槽間進行緩沖液的循環是可取的.2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號的瓊脂糖,其雜質含量不同,影響DNA的遷移
1．選用優質的瓊脂糖：不同品牌的瓊脂糖在質量上有較大的差異。劣質瓊脂糖會導致DNA條帶模糊，甚至條帶缺失。因此請盡量選擇質量穩定可靠的品牌。2．選擇適當的凝膠濃度：瓊脂糖凝膠的線性DNA分辨范圍3．凝膠制備：配制凝膠和電泳應選用相同的1x緩沖液；使用的容器體積至少是凝膠溶液的3倍，以免溶液沸騰時溢出
??? 在所有RNA實驗中，最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定，一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA在制備與分析過程中的降解，而所制備的 RNA的純度和完整性又可直接影響R
RNA抽提純化是分子生物學研究的基本工作內容。但是由于RNA酶的廣泛存在和難以滅活的頑固本性，使得RNA的抽提純化和后續工作特別困難。雖然 Trizol試劑和各類RNA抽提純化試劑盒的廣泛應用使得RNA抽提和純化不再特別困難，但是涉及RNA的工作仍然是分子生物學研究中最讓人頭痛的。歸根結底，RN
??? 在所有RNA實驗中，最關鍵的因素是分離得到全長的RNA。而實驗失敗的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩定，一般反應不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA酶就會引起RNA在制備與分析過程中的降解，而所制備的 RNA的純度和完整性又可直接影