細胞生物基本方法:肌組織細胞培養
肌組織細胞培養1)骨骼肌細胞培養1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化。明膠制備比較簡單,常用Hanks液配的0.01%明膠。 2) 肌細胞培養1.選新鮮受精雞卵,置溫箱中孵育(溫箱中放有水槽,以維持箱內溫度),每日翻動一次(180度),孵育9~12天。2.取雞胎法相間《組織培養和分子細胞學技術》53頁。3.用眼科剪剪開胸腔,剝出心臟,置入皿中用Hanks液漂洗1~2次。4.小心剪除大的動靜脈,保留心室肌,用組織塊或消化培養法均可。......閱讀全文
細胞生物基本方法:肌組織細胞培養
肌組織細胞培養1)骨骼肌細胞培養1.殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5厘米小塊。2.用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無菌紗網或紗布濾過,合成培養基加10%小牛血清培養,為促進分化可加1%的胎汁。3.細胞接種量為2×106/皿,接種在膠原或明膠的底物上能促進細胞分化
細胞生物基本方法:神經組織細胞培養
神經組織細胞培養1.獲取腦組織后,先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍的Hanks液中,腦組織比較柔軟,反復吹打即可制成細胞懸液。2.為排除脂肪成分和其它碎塊,把懸液注入離心管中,在室溫直立5~10分鐘后,細胞或細胞團塊自然下沉,脂肪等雜物易漂浮于懸液表
細胞生物基本方法:結締組織類細胞培養
結締組織類細胞培養 1)成纖維細胞培養 用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養;如為人胚,可取皮膚培養。幼兒包皮是培養成纖維細胞的很好對象。 ? 2)??巨噬細胞培養 1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內)
肌組織細胞培養實驗
骨骼肌細胞培養實驗 心肌細胞培養實驗 神經組織細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 肌組織
肌組織細胞培養實驗
實驗材料 肌組織試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶血清胎汁儀器、耗材 紗布實驗步驟 動物胚或幼體的大腿肌組織為最好的培養材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1. ?殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5 厘米小塊;2. ?用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25 %胰
肌組織細胞培養實驗——神經組織細胞培養實驗
實驗方法原理神經組織主要由兩種神經細胞(神經元)和神經膠質細胞組成。神經元為高度分化的細胞,在組織發生晚期已失掉增殖能力,對生存條件要求高,只有在適宜情況下,如接種在膠原底層上,或在加入神經生長因子(NGF)和膠質細胞因子時,才能生存,并可能出現一定程度的分化現象,如長出突起等,但卻難使之增殖;即使
細胞生物基本方法:腫瘤細胞培養
腫瘤細胞培養特殊之處在于成纖維細胞的排除(成纖維細胞常與腫瘤細胞同時混雜生長,致難以純化腫瘤組織)。有以下一些方法:1.機械刮除法2.反復帖壁法3.消化排除法4.膠原酶消化法?1)??機械刮除法1.標記:鏡下觀察,用不脫色筆在培養瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位。2.刮除:棄掉培養液,把無菌膠刮伸入
細胞生物基本方法:上皮細胞培養
上皮細胞培養1)表皮細胞培養1.取材:取外科植皮或手術殘余皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方厘米小塊。2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鐘。3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。5.
肌組織細胞培養實驗——骨骼肌細胞培養實驗
實驗材料肌組織試劑、試劑盒Hanks胰蛋白酶血清胎汁儀器、耗材紗布實驗步驟動物胚或幼體的大腿肌組織為最好的培養材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1. ?殺死動物,無菌取大腿肌組織,切成0.3~0.5 厘米小塊;2. ?用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消
肌組織細胞培養實驗——心肌細胞培養實驗
實驗方法原理心肌組織是最早利用的培養材料,Carrel曾長期培養過雞胚心肌組織,至今心肌仍不失為好的培養物。最常用的是雞胚心肌、小鼠、大鼠以及人胎兒心肌等都可應用。心肌是比較容易培養和生長的組織,可應用多種方法進行培養,如懸滴培養、組織塊培養和消化培養法等,主要取心室肌培養,均能獲得良好的生長效果。