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    DNA定量法比較——紫外—可見吸收光譜和熒光光譜優勢比較

    通常情況下,對定量DNA應用熒光或紫外-可見光譜。兩種方法各有優缺點,重要的是應考慮在整個分析中,包括上、下游工藝的方法。 對分子生物學家而言,DNA定量是一種重要而常規的技術。量化數據本身很少被當作實驗的最終結果,更常見的是將其作為生物源提取物和下游使用、分析之間的橋梁。定量是重要的,但是,由于生物系統始終存在的變化,因此導致提取的DNA存在差異:不僅在數量上有差異,而且也與從原始來源及提取方法本身的污染水平有關。錯誤的濃度測量,容易導致下游應用過度或不足;或者因污染物的存在,抑制下游的分析。 DNA定量最常用的兩種方法是紫外-可見吸收光譜法和熒光光譜法。對于純化的DNA,采用紫外可見分光光度計測定樣本在260nm的吸光度(A260)是應用最廣泛的技術,其優點為快速、易于實現。熒光法則需要使用熒光探針,如Hoechst或PicoGreen熒光染料,當這些染料與DNA結合時,可以發出熒光。因為兩種方法各具優點,因此......閱讀全文

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