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    酶聯免疫吸附(ELISA)實驗——雙抗體夾心法(測抗原)

    酶聯免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各種細胞內成份的定位。(2)研究抗酶抗體的合成。(3)顯現微量的免疫沉淀反應。(4)定量檢測體液中抗原或抗體成份。實驗方法原理圖1. 雙抗體夾心法測抗原示意圖 本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌后,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。 這種方法欲測的抗原必須有兩個可以與抗體結合的部位,因為其一端要包被于固相載體上的抗體作用,而另一端則要與酶標記特異性抗體作用。因此,不能用于分子量小于5000的半抗原之類的抗原測定。我們用在霍亂腸毒素的測定。HbSAg及HbS的測定。實驗材料血清血漿體液試劑、試劑盒碳酸鹽包被緩沖液抗體球蛋白吐溫檸檬酸硫酸儀器、耗材酶標比色計96孔板移液槍離心管離心管盒實驗步......閱讀全文

    酶免疫分析技術進展與自動化

    郝繁運   綜述 中國誤診學雜志  2007年 第一期  第五次全國中青年檢驗醫學學術會議論文匯編 摘要:本文主要介紹了酶免疫分析的發展現狀,從酶免疫分析標記技術若干環節的技術進步、在方法學上與現代化技術的融合與發展、酶免疫分析技

    ELISA技術綜述

      ELISA原理   ELISA利用抗原抗體之間專一性結合之特性,對標本進行檢測;由于結合與固體承載物(一般為塑膠孔盤)上之抗原或抗體仍可具有免疫活性,因此設計 其結合 機制後,配合酵素顯色反應,即可顯示特定抗原或抗體是否存在,并可利用顯色之深淺進行定量分析。根據待測樣品與結合機制的不同,ELI

    抗體的概念動物產生抗體的機理及單克隆抗體的制備方法

      抗體的概念    動物機體受到抗原物質的刺激后, 由B淋巴細胞轉化為漿細胞產生的, 能與相應抗原發生特異性結合反應的免疫球蛋白, 這類免疫球蛋白稱為抗體(Antibody,簡稱 Ab)。   免疫球蛋白   免疫球蛋白(Immunogolobulin, 簡稱Ig) 是指存在于人和動物血液(

    從事生物藥研發的你,不可不知的ELISA開發方法

    ELISA在生物藥物研發的各個環節均有廣泛的應用:如以生物大分子檢測為目的,在藥效藥代評估時,對動物實驗和臨床實驗中的血液樣品的藥物濃度和生物大分子標志物進行定量檢測;以親和力測定為目的,在質量分析過程中,對抗體相對于靶點抗原的親和力檢測; 以親和力篩選為目的,在抗體發現過程中,對雜交瘤細

    抗體的概念、動物產生抗體的機理及單克隆抗體...(三)

    單克隆抗體雜交瘤技術基本流程單克隆抗體的制備步驟1、免疫原的制備;2、免疫動物 ;選擇體重18-20g BALB/C 雌性小鼠用于免疫。50-100ug抗原/只與等體積福氏完全佐劑混合,充分乳化后,經背腹部皮下多點注射及腹腔注射相結合的方式免疫,總的免疫體積0.2-0.3ml每只;間隔3周,取與

    食品安全快速檢測技術你知多少?

    快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。    1、食品安全問題主要有害污染物    (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 

    ELISA開發方法

    一、前言ELISA在生物藥物研發的各個環節均有廣泛的應用:如以生物大分子檢測為目的,在藥效藥代評估時,對動物實驗和臨床實驗中的血液樣品的藥物濃度和生物大分子標志物進行定量檢測;以親和力測定為目的,在質量分析過程中,對抗體相對于靶點抗原的親和力檢測;以親和力篩選為目的,在抗體發現過程中,對雜交瘤細胞克

    ELISA原理與分類

    一、ELISA的原理ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合

    ELISA實驗所用試劑詳解

    在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定。ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物等。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制

    ELISA檢測方法有哪些?

    酶聯免疫吸附測定(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是研究蛋白抗體的重要方法。它是采用抗原與抗體的特異結合將被測物質與酶標抗體進行直接或間接結合,然后通過標記酶與底物產生顏色反應進行定性和定量分析。那么,它與其它檢測方法的靈敏度及您了解嗎?

    食品安全快速檢測技術大匯總(一)

    快速檢測技術廣泛用于食品安全快速檢測,臨床檢驗、檢驗檢疫、毒品檢驗等公共領域。食品安全快速檢測是指對食品利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。 1、食品安全問題主要有害污染物: (1)農藥,化肥:有機磷,有機氯,硝酸鹽 (2)獸藥:興奮劑,鎮靜劑,抗生素 (3)

    兩種測定抗體效價方法的實驗原理和操作步驟

    酶聯免疫吸附實驗法一、實驗目的1. 深入了解ELISA法測定抗體效價的原理。2. 掌握ELISA法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。免疫酶技術是將酶標記在抗體/抗原分子上,形成酶

    江蘇大學 檢驗醫學專業實驗-臨床免疫學檢驗

      抗血清的制備  【原理】:用抗原刺激機體可以產生抗體,抗原的性質、純度和活性影響其免疫動物后獲得的抗體的的特異性和效價。在體外有目的的制備抗原,經初次、再次免疫的過程可以獲得高質量的抗體。  【注意事項】  ①制備佐劑時,一定要順著同一方向用勁磨。  ②檢查油包水的方法:培養皿內加水,滴入混勻液

    ELISA技術測定單克隆抗體效價方法

    一、實驗目的1.深入了解elisa 法測定抗體效價的原理。2.掌握ELISA 法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA 是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。免疫酶技術是將酶標記在抗體/抗原分子上,形成

    ELISA的試劑-2

    3.1.3  包被用抗原   用于包被固相載體的抗原按其來源不同可分為天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原三大類。天然抗原可取自動物組織、微生物培養物等,須經提取純化才能作包被用。如HBsAg可以從攜帶者的血清中提取,一般的細菌和病毒抗原可以從其培養物中提取,蛋白成份抗原可從富含此抗原的材料中

    ELISA中的試劑(1)-免疫吸附劑

    在臨床檢驗中一般采用商品試劑盒進行測定。前文(2.2)已述,ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結合物和酶的底物。完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)

    酶聯免疫吸附法檢測瘦肉精

      摘要:介紹了競爭酶聯免疫吸附法測定豬肉中的鹽酸克倫特羅的方法。利用鹽酸克倫特羅試劑盒,對豬肉組織中殘留的鹽酸克倫特羅經抽提、競爭后,用酶標儀進行檢測分析。此法較適用于現場檢驗,檢測速度快、靈敏度高,是保證肉品衛生安全的較好監控方法。   酶聯免疫吸附法是目前最佳的檢測方法。ELISA 檢測

    ELISA檢測結果準確可靠的必要條件全方位分析

    1.  標本的采取和保存    可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血

    如何挑選擇適合自己實驗的ELISA試劑盒?

    elisa試劑盒在實驗室已經相當普及,絕大多數ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實驗更便利,往往還更加。現在市面上的ELISA試劑盒既有國產也有進口,數量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出zui適用的產品呢?一起來聽聽上海恒遠

    酶聯免疫吸附法檢測瘦肉精

    酶聯免疫吸附法是目前最佳的檢測方法。ELISA 檢測方法有雙抗體夾心法測抗原、間接法測抗體、競爭法測抗體等。該文是利用酶聯免疫吸附法中的競爭法測抗體,其原理是利用多克隆抗體既能與鹽酸克倫特羅結合,也能與包被抗原結合。這些包被抗原被固定在酶標板孔壁上,當樣品中含有瘦肉精時,它與包被抗原競爭結

    淋巴細胞雜交瘤單克隆抗體制備技術4

     (二)細胞融合  1.細胞融合前準備  (1)骨髓瘤細胞系的選擇:骨髓瘤細胞應和免疫動物屬于同一品系,這樣雜交融合率高,也便于接種雜交瘤在同一品系小鼠腹腔內產生大量McAb。常用的骨髓瘤細胞系見表2-4。表2-4用于融合試驗的主要骨髓瘤細胞系名 稱來 源耐 受 藥 物Ig鏈H LP3/X63-Ag

    實驗室HIV檢測技術概述及進展

    艾滋病(AIDS)又稱獲得性免疫缺陷綜合征,是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一種免疫缺陷性疾病。HIV感染的診斷是艾滋病預防控制 工作的重要組成部分,建立敏感實用的檢測方法對于監測、診斷或血液篩查,控制艾滋病的流行顯得尤為重要。以下本文就HIV的檢測技術現狀及進展做一綜述。1 

    ELISA技術測定單克隆抗體效價方法

    一、實驗目的1.深入了解elisa 法測定抗體效價的原理。2.掌握ELISA 法測定單克隆抗體效價的方法。二、實驗原理ELISA 是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。免疫酶技術是將酶標記在抗體/抗原

    酶聯免疫吸附(ELISA)實驗

    酶聯免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各種細胞內成份的定位。(2)研究抗酶抗體的合成。(3)顯現微量的免疫沉淀反應。(4)定量檢測體液中抗原或抗體成份。實驗方法雙抗體夾心法(測抗原)間接法(測抗體)競爭法測抗原實驗方法原理圖1. 雙抗體夾心法測抗原示意圖 本法首先也是用特異性抗體

    免疫熒光技術(immunofluorescence technique)-1

    免疫熒光技術(immunofluorescence technique)是一種以熒光物作為標記物的免疫分析技術,熒光物質分子在特定條件下吸收激發光的能量后,分子呈激發態而極不穩定,其迅速回到基態時,可以電磁輻射形式釋放出所有的光能,發射出波長較照射光長的熒光。用熒光素與已知的抗體(或抗原,較少用

    ELISA

    實驗概要ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。實驗原理ELISA是以

    ELISA技術

     ELISAELISA是酶聯接免疫吸附劑測定 Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay 的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。   

    ELISA的概念、原理、操作步驟

    ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域。(一) 原理ELISA是以免疫學反應為

    ELISA的概念、原理、操作步驟

    ELISA是酶聯接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫學科學的許多領域

    側流免疫層析技術在真菌毒素檢測中的應用

        1、側流免疫層析檢測技術    側流免疫層析檢測技術(LFIA) 也稱橫向流動免疫檢測技術,是出現于20世紀60年代初期的一種獨特的免疫分析方式,以條狀纖維層析材料為固相,借助毛細管的吸附作用使樣品在層析材料上移動,其中樣品

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