離子交換柱層析(ionexchangechromatography)分離核苷酸
一、目的:學習離子交換柱層析法分離核苷酸的原理及方法。二、原理:離子交換作用一般指在固相和液相之間發生的可逆的離子交換反應,它可用于分離各種可解離的物質。通常離子交換劑是在一種高分子的不溶性母體上引入若干活性基團。這樣人工會成的離子交換劑具有各種各樣的性能。作為不溶性母體的離分子有樹脂、纖維素、葡聚糖、瓊脂糖或無機聚合物等,引入的活性基團可以是酸性基團,如強酸型的含有磺酸基(—SO3H)、中強酸型的含磷酸基(—PO3H2)、亞磷酸基(—PO2H)、弱酸型的含有羧基(—COOH)或酚羧基(—OH)等。也可以是堿性基團,如強堿型的含季銨[—N+(CH3)3]、弱堿型的含叔胺[—N(CH3)2]、仲胺(—NHCH3)、伯胺(—NH2)等。在一定條件下,離子交換樹脂吸附的物質數量和在溶液中的物質數量達到平衡時,兩者數量之比叫分配系數(平衡常數)。理想的情況是洗脫曲線和分配系數相符合,待分離的各種物質的分配系數,應有足夠的差別,以Kd表示......閱讀全文
離子交換凝膠柱層析
原理 在植物生理生化的研究中,往往要從一個組分復雜的混合物中,將性質很相近的生物大分子分離,這是研究工作中一個很關鍵的問題,需要一種具有高度分辨力的技術,才能滿足這一要求。離子交換層析就是這樣的技術,能夠分離只有很小差異的物質(例如僅有一個氨基酸不同的兩種蛋白質),是分離生物大分子的一
離子交換柱層析原理
離子的半徑電荷等差異會影響它在離子交換柱上的移動速度,進而實現層析。
離子交換柱層析條件的選擇
對于分離一個特定的蛋白質,選擇什么樣的柱子、離子交換劑和流動相等需根據具體情況統籌考慮,主要是根據待分離蛋白質本身的理化性質和生物學性質確定。因此,在采用離子交換層析法進行蛋白質的分離之前,應當對待分離的蛋白質的性質有所了解,如等電點、相對分子質量、疏水性、生物活性及測定方法、溶解性、濃度、發生
離子交換柱層析法(層析實驗簡介)概略
一、??? 原理:有些高分子物質含有一些可以分離的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的離子產生交換反應。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-? —————? R-NH3CL+OH-這類高分子物質通稱離子交換劑,其中使用最普遍的是離子交換樹脂。由
離子交換柱層析分離核苷酸實驗_離子交換層析法
本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離子交換柱層析進行分離, 最后采用紫外吸收法進行鑒定。旨在了解并掌握RNA 堿水解的原理和方法,掌握離子交換柱層析的分離原理和方法,熟練掌握紫外吸收分析方法。實驗方法原理本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離
離子交換柱層析分離核苷酸實驗
離子交換層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離子交換柱層析進行分離, 最后采用紫外吸收法進行鑒定。同時通過
離子交換柱層析分離蛋白原理詳解
1.離子交換與洗脫? 所謂離子交換,是指溶液中的某一種離子與另一種靠靜電力結合在惰性載體上的離子進行可逆交換的過程,即溶液中的離子結合到載體上而載體上的離子被替換下來。若惰性載體上以共價鍵結合著帶正電荷的活性基團,則可交換陰離子,叫陰離子交換劑;若以共價鍵結合著帶負電荷的活性基團,則可交換陽離子
離子交換柱層析分離核苷酸實驗
實驗方法原理 本實驗以酵母RNA 為材料, 將RNA 用堿水解成單核苷酸,再用離子交換柱層析進行分離, 最后采用紫外吸收法進行鑒定。同時通過測定各單核苷酸的含量, 可以計算出酵母RNA 的堿基組成。實驗材料 酵母RNA試劑、試劑盒 陰離子交換樹脂聚苯乙烯-二乙烯苯-三甲胺季銨甲酸甲酸鈉KOH蒸餾水過
離子交換柱層析(ion-exchange chromatography)分離核苷酸
一、目的:學習離子交換柱層析法分離核苷酸的原理及方法。二、原理:離子交換作用一般指在固相和液相之間發生的可逆的離子交換反應,它可用于分離各種可解離的物質。通常離子交換劑是在一種高分子的不溶性母體上引入若干活性基團。這樣人工會成的離子交換劑具有各種各樣的性能。作為不溶性母體的離分子有樹脂、纖維素、葡聚
怎樣利用離子交換柱層析法分離不同的蛋白質
離子交換柱層析法的核心在于不同的蛋白質的等電點不同所以說,利用離子交換柱層析法分離不同的蛋白質其實就是利用不同蛋白質不同的等電點來分離。比如目的蛋白等電點是5,那么在環境pH為8.0的情況下,目的蛋白可以結合陰離子交換層析,而雜蛋白可能不能結合或者結合能力比目的蛋白弱。通過不同的鹽濃度的洗脫讓結合能