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    激光掃描共焦顯微鏡技術及應用(一)

    樣品要求:經熒光探劑標記(單標、雙標、三標)2.固定的或活的組織3.固定的或活的貼壁培養細胞(Confocal專用小培養皿,蓋玻片)4.懸浮細胞,甩片或滴片后,用蓋玻片封一. 組成倒置或直立熒光顯微鏡、掃描頭(照明針孔、探測針孔、熒光濾片系統、鏡掃描系統和光電倍增管)、掃描頭控制電路、計算機和圖像輸出設備二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明針孔和放置在檢測器前的探測針孔實現點照明和點探測,來自光源的光通過照明針孔發射出的光聚焦在樣品焦平面的某個點上,該點所發射的熒光成像在探測針孔上,該點以外的任何發射光均被探測針孔阻擋。照明針孔與探測針孔對被照射點或被探測點來說是共軛的,因此被探測點即共焦點,被探測點所在的平面即共焦平面。計算機以像點的方式將被探測點顯示在計算機屏幕上,為了產生一幅完整的圖像,由光路中的掃描系統在樣品焦平面上掃描,從而產生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺沿著Z軸上下移動,將樣品新的一個層面移動到共焦平......閱讀全文

    基因芯片檢測原理

    雜交信號的檢測是DNA芯片技術中的重要組成部分。以往的研究中已形成許多種探測分子雜交的方法,如熒光顯微鏡、隱逝波傳感器、光散射表面共振、電化傳感器、化學發光、熒光各向異性等等,但并非每種方法都適用于DNA芯片。由于DNA芯片本身的結構及性質,需要確定雜交信號在芯片上的位置,尤其是大規模DNA芯片由于

    基因芯片檢測原理(二)

    1.熒光標記雜交信號的檢測方法使用熒光標記物的研究者最多,因而相應的探測方法也就最多、最成熟。由于熒光顯微鏡可以選擇性地激發和探測樣品中的混合熒光標記物,并具有很好的空間分辨率和熱分辨率,特別是當熒光顯微鏡中使用了共焦激光掃描時,分辨能力在實際應用中可接近由數值孔徑和光波長決定的空間分辨率,而在傳統

    激光共焦顯微鏡的工作原理分析

     激光共焦顯微鏡基于模塊化概念而設計,可集成多種功能,不僅包括納米技術,還可靈活升級到受激發射損耗系統(STED)。更有超高分辨率激光掃描共聚焦顯微鏡,激光共焦顯微鏡采用獨有光學技術,滿足您對分辨率的高要求。激光共焦顯微鏡是20世紀80年代發展起來的一項具有劃時代意義的高科技新產品,是當今世界zui

    激光掃描共聚焦顯微鏡在細胞凋亡研究中的應用(一)

    摘要 激光掃描共聚焦顯微鏡作為80年代發展起來的一種高精度分子細胞生物學分析儀器,具有組織細胞斷層掃描、活細胞動態熒光監測、三維圖像重建、共聚焦圖像定量分析等先進功能,在近年的細胞凋亡這一研究熱點中得到了大量創造性的應用。本文擬就對激光掃描共聚焦顯微鏡在凋亡的形態學、分子水平變化及重要生理過程三方面

    原子力激光共焦顯微鏡的使用需求判斷

    原子力激光共焦顯微鏡的主要原理是利用激光掃描束通過光柵針孔形成點光源,在熒光標記標本的焦平面上逐點掃描,采集點的光信號通過探測針孔到達光電倍增管,再經過信號處理,在計算機監視屏上形成圖像。對于物鏡焦平面的焦點處發出的光在針孔處可以得到很好的會聚,可以全部通過針孔被探測器接收。而在焦平面上下位置發出的

    共聚焦顯微鏡介紹

      一、激光掃描共聚焦顯微鏡的基本原理和發展   科學研究工作對更高圖像分辨率的追求產生了激光掃描共聚焦顯微鏡。隨著免疫熒光技術在生物學研究領域的廣泛應用,研究人員注意到,熒光顯微照片的分辨率較低,傳統的熒光顯微鏡使用場光源,因標本鄰近結構(細胞或亞細胞結構)產生的衍射光和散射光的干擾,使標本中細

    共聚焦顯微鏡

    一、激光掃描共聚焦顯微鏡的基本原理和發展科學研究工作對更高圖像分辨率的追求產生了激光掃描共聚焦顯微鏡。隨著免疫熒光技術在生物學研究領域的廣泛應用,研究人員注意到,熒光顯微照片的分辨率較低,傳統的熒光顯微鏡使用場光源,因標本鄰近結構(細胞或亞細胞結構)產生的衍射光和散射光的干擾,使標本中細微結構的成像

    激光掃描共聚焦熒光顯微鏡的成像原理和基本結構

        激光掃描共聚焦熒光顯微鏡是一種利用計算機、激光和圖像處理技術獲得生物樣品三維數據、先進的分子細胞生物學的分析儀器。主要用于觀察活細胞結構及特定分子、離子的生物學變化,定量分析,以及實時定量測定等。   成像原理   采用點光源照射標本,在焦平

    激光掃描共聚焦顯微鏡使用說明

    激光掃描共聚焦顯微鏡可以:(1)光切片掃描、3D圖像處理、時間序列拍攝成像;(2)細胞、綠熒光蛋白、生物熒光樣品觀察分析;(3)熒光原位雜交分析。實驗方法原理激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃

    顯微成像小課堂丨告別非焦平面信息干擾

      雖然我們常說的分辨率指的焦平面上的分辨率(即XY方向),決定分辨率高下的決定因素是物鏡的數值孔徑,但是其實在寬場熒光顯微鏡中,樣本中整個被照亮的區域都會發射出熒光,這些非焦平面上的熒光其實對于焦平面上發射出的熒光,也就是我們真正關注的信息來說就是一種干擾,這也可以理解為在Z方向上,也是有分辨率的

    細胞研究用的顯微鏡分類和工作原理

      顯微鏡是觀察細胞的主要工具。根據光源不同,可分為光學顯微鏡和電子顯微鏡兩大類。前者以可見光(紫外線顯微鏡以紫外光)為光源,后者則以電子束為光源。   —、光學顯微鏡   (一)、普通光學顯微鏡   普通生物顯微鏡由3部分構成,即:①照明系統,包括光源和聚光器;②光學放大系統,由物鏡和目鏡組

    激光器應用——激光掃描共聚焦顯微

    iFLEX激光器應用——激光掃描共聚焦顯微1,什么是激光掃描共聚焦顯微共聚焦顯微技術是近十幾年迅速發展起來的一項高新研究技術,目前應用領域擴展到細胞學、微生物學、發育生物學、遺傳學、神經生物學、生理和病理學等學科的研究工作中,成為現代生物學微觀研究的重要工具。激光掃描共聚焦顯微鏡的主要是利用激光掃描

    激光掃描共聚焦顯微鏡使用說明

    實驗方法原理 激光共聚焦掃描顯微鏡(Confocal laser scanning microscope,CLSM)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。由于激光束的波長較短,光束很細,所以共焦激光掃描顯微

    激光共聚焦顯微鏡技術的應用

    最近需要做成骨細胞培養的實驗,師兄給個建議,說是可以做激光共聚焦顯微鏡 檢測。關于這個我還真不知道該如何下手設計這個實驗,網上搜集了一些資料,分享給大家,供參考。激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世紀80年代發展起

    激光掃描共聚焦顯微鏡系統及其在細胞生物學中的應用

    激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser scanning Confocal Microscopy ,簡稱LSCM)是近代生物醫學圖像儀器的最重要發展之一,它是在熒光顯微鏡成像的基礎上加裝激光掃描裝置,使用紫外光或可見光激發熒光探針,利用計算機進行圖像處理,從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖像,以及在亞

    光學顯微鏡的應用領域

    光學顯微鏡是一種既古老又年輕的科學工具,從誕生至今,已有三百年的歷史光學顯微鏡的用途十分廣泛,例如在生物學中,化學中,物理學中,天文等等在一些科研工作中都是離不開顯微鏡。  目前,幾乎成了科學技術的形象代言,你只需看媒體上有關科學技術的報道中頻頻出現其身影,便可見此言之不謬也。 

    細胞研究用的顯微鏡分類和工作原理(二)

    細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光,熒光顯微鏡(圖2-2,3,4)就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。圖2-3 落射式照明原理熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區別:1、照明方式通常為落射式,

    顯微技術(圖)

    顯微鏡是觀察細胞的主要工具。根據光源不同,可分為光學顯微鏡和電子顯微鏡兩大類。前者以可見光(紫外線顯微鏡以紫外光)為光源,后者則以電子束為光源。—、光學顯微鏡(一)、普通光學顯微鏡普通生物顯微鏡由3部分構成,即:①照明系統,包括光源和聚光器;②光學放大系統,由物鏡和目鏡組成,是顯微鏡的主體,為了消除

    激光共聚焦掃描顯微境

       LCSM照片,藍色為細胞核,綠色為微管    激光共聚焦掃描顯微鏡(laser confocal scanning microscope)用激光作掃描光源,逐點、逐行、逐面快速掃描成像,掃描的激光與熒光收集共用一個物鏡,物鏡的焦點即掃描激光的聚焦點,也是瞬時成像的物點。由于激光束的波長較短,

    綠色熒光蛋白(GFP)標記亞細胞定位

    一、原理利用綠色熒光蛋白(GFP)來示蹤胞內蛋白的技術。利用GFP融合蛋白技術來進行活細胞定位研究是目前較為通行的一種方法,在光鏡水平進行研究,不需要制樣,沒有非特異性標記的影響。并且GFP的分子量為27kD,經激光掃描共聚集顯微鏡激光照射后,可產生一種綠色熒光,從而對蛋白質進行精確定位。激光掃描共

    激光掃描共聚焦顯微鏡在生命科學中的應用

    實驗目的與要求1. 掌握激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理及其在生命科學中的應用。一、激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理1.普通熒光顯微鏡的不足 使用熒光物質標記細胞中的特定成分或結構,不僅圖像與對比度增強,而且由于許多熒光顯微鏡的光源使用短波長的紫外光,大大提高了分辯率(δ=0.61 λ/ N

    共聚焦顯微鏡的基本原理

    傳統的光學顯微鏡使用的是場光源,標本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾;激光掃描共聚焦顯微鏡利用激光束經照明針孔形成點光源對標本內焦平面的每一點掃描,標本上的被照射點,在探測針孔處成像,由探測針孔后的光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點或逐線接收,迅速在計算機監視器屏幕上形

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    傳統的光學顯微鏡主要由光學系統及支撐它們的機械結構組成,光學系統包括物鏡、目鏡和聚光鏡,都是由各種光學玻璃做成的復雜化了的放大鏡。物鏡將標本放大成像,其放大倍率M物由下式決定:M物=Δ∕f"物 ,式中f"物是物鏡的焦距,Δ可理解為物鏡與目鏡間的距離。目鏡將物鏡所成之像再次放大,成

    LaVision雙光子顯微鏡-多線掃描雙光子成像(一)

    Journal of Neuroscience Methods 151 (2006) 276–286Application of multiline two-photon microscopy to functional in vivo imagingRafael Kurtz a,?, Matthi

    材料分析及外觀檢查金相顯微鏡都可以實現嗎?

    作為一種微觀形態學工具,光學顯微鏡在工業測試方面的應用,目前主要大家比較熟悉的主要是以下方面:首先,單獨作為形態學工具,進行材料組織分析和外觀缺陷檢查,其典型的產品是金相顯微鏡和立體顯微鏡。第二、光柵量測結合,進行部件的精密尺寸測量,其典型的產品是工具顯微鏡,測量顯微鏡。近年來,隨著計算機軟件技術的

    LaVision雙光子顯微鏡-多焦點掃描與光激活蛋白在...(一)

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    激光掃描共聚焦顯微鏡技術原理

    光學顯微鏡作為細胞生物學的研究工具,可以分辨出小于其照明光源波長一半的細胞結構。隨著光學、視頻、計算機等技術飛速發展而誕生的激光掃描共聚焦顯微鏡 (Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM),則使現代顯微鏡有能力研究和分析細胞在變化過程中的結構。特別是

    顯微鏡的分類及用途

         (一) 按使用目鏡的數目可分為單目、雙目和三目顯微鏡。  單目價格比較便宜,可以作為初學愛好者的選擇,雙目稍貴點,觀察的時候兩眼可以同時觀察,觀察得舒適些,三目又多了一目,它的作用主要是連接數碼相機或電腦用,比較適合長時間工作的人員選用。  (二)根

    顯微鏡的主要分類、功能及應用領域

    著人類的發展,顯微鏡的種類也越來越多,可觀察的范圍也越來越廣,我們對光學顯微鏡的分類作一個了解。一、按使用目鏡數目可分為單目、雙目和三目顯微鏡單目價格比較便宜,可以作為初學愛好者的選擇,雙目稍 一、       &nbs

    激光共聚焦掃描顯微鏡基本組成、特點

    一、激光共聚焦顯微鏡的基本組成激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscope,LSCM)是20世紀80年代發展起來的一項具有劃時代意義的高科技新產品,是當今世界最先進的細胞生物學分析儀器。激光共聚焦顯微鏡利用激光作為光源,在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦

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