植物組織提取高質量的DNA五大方法詳解(一)
蛋白質純化是旨在從細胞,組織或整個生物體中分離出一種或幾種蛋白質。蛋白質純化對于表征目的蛋白質的功能,結構和相互作用至關重要。蛋白質分離與提取是生命科學研究基礎中的基礎。植物細胞由于存在細胞壁的結構,因此比動物細胞蛋白的提取相對復雜。 提取植物中的DNA對植物基因工程,植物生理、病理研究等方面具有重要作用。不同植物的核酸結合蛋白的情況各不相同,因而需要采取不同的提取方法。植物中次生代謝產物多酚類化合物會影響DNA降解,同時多糖的污染也會影響植物DNA純度。因此從富含多酚和多糖的植物組織中分離獲得高質量的基因組DNA難度較大。一般常用方法如下: 一,CTAB 法 CTAB法即十六烷基三乙基澳化按......閱讀全文
植物組織提取高質量的DNA五大方法詳解(一)
? ?? 蛋白質純化是旨在從細胞,組織或整個生物體中分離出一種或幾種蛋白質。蛋白質純化對于表征目的蛋白質的功能,結構和相互作用至關重要。蛋白質分離與提取是生命科學研究基礎中的基礎。植物細胞由于存在細胞壁的結構,因此比動物細胞蛋白的提取相對復雜。?? ? ? ?提取植物中的DNA對植物基因工程,植
植物組織提取高質量的DNA五大方法詳解(二)
? ? ? ?廠家驗證結果圖:??? ? (A)植物組織裂解物的SDS-PAGE:各25μl生菜(20μg,泳道2),青椒(20μg,泳道3),鱷梨(40μg,泳道4)和蘭花葉(10μg,泳道5)加載到4-20% SDS-PAGE上,并在電泳后用考馬斯亮蘭染色。按照試劑盒方案制備植物裂解物。
植物組織中DNA的提取與測定
一、原理 脫氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)是一切生物細胞的重要組成成分,主要存在于細胞核中,鹽溶法是提取DNA的常規技術之一。從細胞中分離得到的DNA是與蛋白質結合的DNA,其中還含有大量RNA,即核糖核蛋白。如何有效地將這兩種核蛋白分開是技術的關鍵。D
提取動物組織DNA的方法
【實驗步驟】1.組織塊解凍,用生理鹽水洗去血污,剪取約0.5g組織,剪小放入2.0ml離心管中,用FM-200P研磨45秒;2.加入0.45ml TES混勻,再加入50ul SDS(10%),5.0ul蛋白酶K(20mg/ml),充分混勻后,于56°C保溫4-6h,每2h搖1次。3.放置到室溫,加入
植物組織mRNA的提取方法
實驗概要本實驗介紹了植物組織mRNA的提取方法。實驗原理由于mRNA末端含有多poly(A) ,當總RNA流徑oligo(dT)纖維素時,在高鹽緩沖液作用下,mRNA被特異的吸附在oligo(dT)纖維素柱上,在低鹽濃度或蒸餾水中,mRNA可被洗下,經過兩次oligo(dT)纖維素柱,可得到較純的m
植物組織類樣本DNA提取完整解操作方法
植物DNA的提取和純化是植物基因工程研究的基礎操作。實施分子標記、基因圖譜、基因指紋圖譜、基因文庫構建、遺傳多態性分析、DNA重組、RAPD(隨機引物多態性DNA)、RFLP(限制性酶多態性)、基因分離及遺傳轉化和鑒定等都以提取DNA為前提。目前,對從植物組織中提取DNA方法的要求是:簡便、有效、快
石蠟包埋組織DNA提取方法
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義
石蠟包埋組織的DNA提取方法
近10年來,現代分子生物學技術越來越廣泛地被用于人類疾病研究的諸領域,為了解病理狀態下基因組DNA的變化積累了新資料。目前認為,人類基因組并非人們想像的那樣穩定,諸如基因重排、擴增、缺失,突瘺和DNA甲基化類型改變等時有發生,這些改變對于基因表過和調控,以及疾病過程的發展與轉歸等方面均具有重要意義。
動物、植物、微生物中提取高質量的基因組DNA(一)
基因組DNA的提取概 述基因組DNA的提取通常用于構建基因組文庫、Southern雜交(包括RFLP)及PCR分離基因等。利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DN
植物組織蛋白質提取方法
1、植物組織蛋白質提取方法(summer)1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清