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實驗室里經常聽到這樣的抱怨：實驗沒做好，實驗沒結果，心情郁悶。但其實靜下心來查找原因，往往是由于操作上面的不認真，或是一些小小的細節沒有注意到，以下是10個實驗室日常小技巧。 主題： 關于質粒提取的小技巧 內容： 現在用質粒提取試劑盒非常方便，而且菌體培養后，可以多管濃縮提取，提到的質粒量多，可以-20℃保存，以后用于酶切、轉化等實驗，可以提前跑個膠，只要不降解，就可以繼續用，避免每次要用，都要培養一遍再提取一遍。 1.質粒DNA提取 提取質粒的時候，最后一步的酒精揮發很關鍵，基本上是其后續的酶切反應的決定性因素。所以這一步盡量揮發長一點時間，最好是空調吹熱風，或是37度溫箱放長一點的時間，我試過室溫過夜，酶切很好。 將amp濃度提高到200μg/mL，下班前接種，次日一早收獲菌體，此時OD雖然不高，質粒豐度卻不一般。菌體量少些，操作體積(管數......閱讀全文
實驗室里經常聽到這樣的抱怨：實驗沒做好，實驗沒結果，心情郁悶。但其實靜下心來查找原因，往往是由于操作上面的不認真，或是一些小小的細節沒有注意到，以下是10個實驗室日常小技巧。 主題： 關于質粒提取的小技巧 內容： 現在用質粒提取試劑盒非常方便，而且菌體培
各位小伙伴，大家還記得當初進實驗室的時候接觸到的一個實驗技能是什么呢？沒錯，是 PCR 擴增。小編曾經也是，看著自己親自配比 PCR 克隆擴增的每個組分，親眼看著瓊脂糖凝膠在紫外透光臺上發出的幽綠色的熒光，也是深深被迷住。但總不可能成天就對著這個邪魅的熒光發呆，對吧？看久了，她會愛上你的眼
1. 跑page膠的時候 小電壓跑會避免高電壓產生的熱量爾導致的膠層變形。低電壓泳道會比大電壓泳道跑的直一些，且分離效果更高，有利于分子量相差不大的蛋白分離。 2. 提取質粒的時候 最后一步的酒精揮發很關鍵，基本上是其后續的酶切反應的決定性因素。所以這一步盡量揮發長一點時間，最好是空調吹熱
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題，包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸，關于包涵體的處理一般包括這么幾步：菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化，內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌？ 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎
實驗原理： 抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性，免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原