mRNA存在于原核和真核生物的細胞質及真核細胞的某些細胞器(如和)中。RNA病毒和RNA噬菌體中的 RNA既是遺傳信息的載體又具有mRNA的功能。生物體mRNA種類的多少與生物進化水平有關,高等生物所含的遺傳信息多,mRNA的種類也多。生物體內某種mRNA的含量根據需要而有不同,如5齡蠶后部絲腺體的 主要任務是快速合成大量絲心蛋白,因而編碼絲心蛋白的mRNA含量特別多。有些細菌需要不斷適應外部環境,其體內編碼某些誘導酶的mRNA的含量也較多。......閱讀全文
mRNA存在于原核和真核生物的細胞質及真核細胞的某些細胞器(如和)中。RNA病毒和RNA噬菌體中的 RNA既是遺傳信息的載體又具有mRNA的功能。生物體mRNA種類的多少與生物進化水平有關,高等生物所含的遺傳信息多,mRNA的種類也多。生物體內某種mRNA的含量根據需要而有不同,如5齡蠶后部絲腺
從 (DNA)轉錄合成的帶有遺傳信息的一類單鏈(RNA),他作為蛋白質合成的模板,決定了核糖體合成肽鏈的種類。1961年F.雅各布和根據大腸桿菌誘導酶生成的實驗結果提出:信息從DNA到蛋白質之間的轉移,必需有一種RNA起傳遞作用,由此提出了信使核糖核酸的名稱。 生物體內的每種多肽鏈都由特定的m
原核生物mRNA一般5′端有一段不翻譯區,稱前導區,3′端有一段不翻譯區,中間是蛋白質的編碼區,一般編碼幾種蛋白質。真核生物mRNA(細胞質中的)一般由5′端帽子結構、5′端不翻譯區、翻譯區(編碼區)、3′端不翻譯區和3′端聚腺苷酸尾巴構成。分子中除m7G構成帽子外,常含有其他修飾核苷酸,如m6
從 (DNA)轉錄合成的帶有遺傳信息的一類單鏈(RNA),他作為蛋白質合成的模板,決定了核糖體合成肽鏈的種類。1961年F.雅各布和根據大腸桿菌誘導酶生成的實驗結果提出:信息從DNA到蛋白質之間的轉移,必需有一種RNA起傳遞作用,由此提出了信使核糖核酸的名稱。 生物體內的每種多肽鏈都由特定的m
一、核糖體RNA:大腸桿菌共有7個核糖體RNA的轉錄單位,每個轉錄單位由16S、23S、5SRNA和若干轉運RNA基因組成。16S和23S之間常由轉運RNA隔開。轉錄產物在RNA酶III的作用下裂解產生核糖體RNA的前體P16和P23,再由相應成熟酶加工切除附加序列。前體加工時還進行甲基化,產生
一、核糖體RNA:基因拷貝數多,在幾十到幾千之間。基因成簇排列在一起,由RNA聚合酶I轉錄生成一個較長的前體,哺乳動物為45S。核仁是rRNA合成與核糖體亞基生物合成的場所。RNA酶III等核酸內切酶在加工中起重要作用。5SRNA基因也是成簇排列的,由RNA聚合酶III轉錄,經加工參與構成大亞基
1.噬菌體的RNA聚合酶結構簡單,是單鏈蛋白,功能也簡單。 2.細菌則具有復雜的多亞基結構(450Kd),可識別并轉錄超過1000個轉錄單位。 3.真核生物的酶有多種,根據a-鵝膏蕈堿(環狀8肽,阻斷RNA延伸)的抑制作用可分為三類:聚合酶A對它不敏感,分布于核仁,轉錄核糖體RNA;聚合酶B
一、轉運RNA的拼接:由酶催化,酶識別共同的二級結構,而不是序列。通常內含子插入到靠近反密碼子處,與反密碼子配對,取代反密碼子環。第一步由內切酶切除插入序列,不需ATP;第二步由RNA連接酶連接,需要ATP。 二、四膜蟲核糖體RNA的拼接:某些四膜蟲26S核糖體RNA基因中有一個內含子,其拼接
對mRNA的檢測、分析及定量方法目標RNA的類型同時定量的目標RNA的數量用途缺點Northern雜交mRNA通常為一個,最多幾個。主要用于估測不同組織、細胞中目標mRNA的分子質量,可用于mRNA的粗略定量。需要大量RNA;只可同時檢測一個或最多幾個mRNA;與PCR方法相比,靈敏度差、耗時。RN
1.將0.5-1.0g寡聚(dT)-纖維懸浮于0.1M的NaOH溶液中。 2.用DEPC處理的1ml注射器或適當的吸管,將寡聚(dT)-纖維素裝柱0.5-1ml,用3倍柱床體積的DEPC H2O洗柱。 3.使用1×上樣緩沖液洗柱,直至洗出液pH值小于8.0。 4.將RNA溶解于DEPC H