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【摘要】 目的建立抗草甘膦轉基因大豆的快速檢測方法。方法：針對轉基因大豆基因組中被導入的35S啟動子、NOS終止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因，自行設計了兩對引物，采用雙重PCR同時擴增上述基因，用8g/L羥丙基甲基纖維素為篩分介質，在50cm×100μm i．d．涂壁毛細管中，于一10kV電壓下用激光誘導熒光-毛細管電泳檢測轉基因大豆的PCR擴增產物。結果在優化的PCR反應和毛細管電泳條件下，本法可以同時檢測出轉基因大豆樣品中三種外源基因，雙重PCR擴增產物經測序證實與原基因序列完全一致，表明本研究設計的引物合理，擴增結果可靠。毛細管電泳進樣量僅需5nl，分析時間為24min，遷移時間的相對標準偏差≤3.2。結論本方法較常規瓊脂糖凝膠電泳特異性高，分析時間短，重現性好，檢測靈敏，適合于大豆中轉基因成分的快速檢測。【關鍵詞】雙重PCR；激光誘導熒光-毛細管電泳；轉基因大豆PCR產物檢測；羥丙基甲基纖維素隨著轉基因農......閱讀全文
雙重PCR-毛細管電泳法檢測大豆轉基因可應用于快速檢測抗草甘膦轉基因大豆。實驗方法原理針對轉基因大豆基因組中被導入的35S啟動子、NOS終止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因，自行設計了兩對引物，采用雙重PCR同時擴增上述基因，用8g/L羥丙基甲基纖維素為篩分介質，在50cm×100μm
實驗方法原理 針對轉基因大豆基因組中被導入的35S啟動子、NOS終止子和CP4-EPSPS抗草甘膦基因等外源基因，自行設計了兩對引物，采用雙重PCR同時擴增上述基因，用8g/L羥丙基