植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗
實驗材料黃化苗 試劑、試劑盒勻漿緩沖液 &n......閱讀全文
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗
實驗材料黃化苗試劑、試劑盒勻漿緩沖液清洗緩沖液Percoll 梯度溶液儀器、耗材分光光度計實驗步驟在選好植物材料和勻漿緩沖液后,接下來關鍵的因素包括勻漿方法、緩沖液的 pH、使用的緩沖液與植物組織之間的比例、研磨時間及溫度等(見注釋 5) 。3.1 勻漿根據植物組織的不同可以采取不同的勻漿方法,或者
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗
實驗材料黃化苗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒勻漿緩沖液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?清洗緩沖液 ?
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗(二)
3.5 純度鑒定可以通過各種細胞器標志性酶的活性來確定線粒體的污染程度。過氧化物酶體可以鑒定過氧化氫酶、羥基丙酮酸還原酶或者乙二醇氧化酶的活性;葉綠體可以用葉綠素含量,白色體可以用類胡蘿卜素的含量或堿性焦磷酸酶的活性;乙二醛循環體可以用異檸檬酸裂解酶的活性;內質網可以用對抗霉素 A 不敏感的細胞
植物線粒體制備及其亞結構分級分離實驗(一)
實驗材料?黃化苗試劑、試劑盒?勻漿緩沖液清洗緩沖液Percoll 梯度溶液儀器、耗材?分光光度計實驗步驟 在選好植物材料和勻漿緩沖液后,接下來關鍵的因素包括勻漿方法、緩沖液的 pH、使用的緩沖液與植物組織之間的比例、研磨時間及溫度等(見注釋 5) 。3.1 勻漿根據植物組織的不同可以采取不同的勻漿方
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。在
植物細胞線粒體DNA的提取
實驗方法原理?分離線粒體DNA和葉綠體DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分離完整的細胞器,然后從細胞器中提取DNA。要獲得高純度的細胞器DNA,關鍵是要把所要的細胞器與其他亞細胞結構分離開來,這可以通過差速離心或梯度離心來完成。完整的細胞器經裂解后,可以通過CsCl離心或酚-氯仿抽提獲得DNA。
植物所揭示裸子植物線粒體丟失基因的進化命運
線粒體經內共生事件起源后,丟失了大量的基因,演變為半自主性細胞器。不同生物支系的線粒體基因組差異巨大,尤其是相較于動物和其他真核生物(其蛋白質編碼基因含量較穩定),陸地植物的多個支系中線粒體基因的轉移/丟失經常發生。因此,植物線粒體編碼基因的組成以及丟失基因的進化命運引發關注。 裸子植物代表了
綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
實驗方法原理 利用差速離心,將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來,再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA,然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核酸酶 A。通過 CsCl 梯度離心,線粒體 RNA 沉
綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 利用差速離心,將線粒體從其他亞細胞結構中分離出來,再用蔗糖梯度離心進一步純化得到線粒體。用核糖核酸酶 A 處理從中去除葉綠體 RNA,然后加入高濃度硫氰酸胍滅活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作為一種蛋白變性劑可非常有效的滅活核糖核
線粒體和細胞核的制備與觀察
實驗概要本實驗介紹了線粒體和細胞核制備的基本原理及操作。對分離得到的細胞核及線粒體進行了活性鑒定,有助于掌握用差速離心技術分離制備動物細胞核及線粒體的方法。實驗原理利用細胞核與線粒體在一定介質中的沉降速度的差異,可采取分級差速離心的方法,將細胞核與線粒體逐級分離出來(差速離心技術)。線粒體是真核細胞