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    細胞膜蛋白質的提取方法

    1.熱變性及酸堿變性沉淀法 用于選擇性的除去某些不耐熱及在一定PH值下易變性的雜蛋白。 2.有機溶劑沉淀法 多用于生物小分子、多糖及核酸產品的分離純化,有時也用于蛋白質沉淀。 3.等電點沉淀法 用于氨基酸、蛋白質及其它兩性物質的沉淀。但此法單獨應用較少,多與其它方法結合使用。 4.非離子多聚體沉淀法 用于分離生物大分子。 5.生成鹽復合物沉淀 用于多種化合物,特別是小分子物質的沉淀。 6.鹽析法 多用于各種蛋白質和酶的分離純化。 鹽析法 一般來說,所有固體溶質都可以在溶液中加入中性鹽而沉淀析出,這一過程叫鹽析。在生化制備中,許多物質都可以用鹽析法進行沉淀分離,如蛋白質、多肽、多糖、核酸等,其中以蛋白質沉淀最為常見,特別是在粗提階段。 鹽析法分為兩類,第一類叫Ks分段鹽析法,在一定PH和溫度下通過改變離子強度實現,用于早期的粗提液;第二種叫b分段鹽析法,......閱讀全文

    蛋白質提取與制備

    1蛋白質提取與制備蛋白質提取與制備蛋白質種類很多,性質上的差異很大,既或是同類蛋白質,因選用材料不同,使用方法差別也很大,且又處于不同的體系中,因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質的分離。但多數分離工作中的關鍵部分基本手段還是共同的,大部分蛋白質均可溶于水、稀鹽、稀酸或稀堿溶液中,少數與脂類結合

    抗原的制備-1

    抗原的制備  除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。  一、抗原的提取 

    抗原的制備方法

    抗原的制備  除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。  一、抗原的提取 

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗

    實驗步驟一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗

    實驗步驟 一、化學法和酶法細胞裂解 微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些

    蛋白質提取與純化技術

     選擇材料及預處理  以蛋白質和結構與功能為基礎,從分子水平上認識生命現象,已經成為現代生物學發展的主要方向,研究蛋白質,首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識,但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別,把它們分配到

    一種無酚/無氯仿組織研磨從熱帶木本植物中提...(二)

    三、結果1、無苯酚/氯仿的CTAB / PVP / SDS-based RNA提取在下面介紹的第一批實驗中,我們開發并測試了一種使用40-60 mg牛油果、夏威夷果和芒果成熟葉片的冷凍葉組織提取RNA的方法。在發表的文獻中,用于困難樹種開發的大多數RNA提取方法,通過使用CTAB / PVP

    生物大分子制備的前處理

    生物大分子制備的前處理 生物大分子制備的前處理(生物材料的選擇、細胞破碎、生物大分子的提取) 1 生物材料的選擇  制備生物大分子,首先要選擇適當的生物材料。材料的來源無非是動物、植物和微生物及其代謝產物。從工業生產角度選擇材料,應選擇含量高、來源豐

    蛋白質純化所需的生物提取物制備的實驗(一)

    一、化學法和酶法細胞裂解微量的細胞裂解經常通過化學法或酶法或二者共同采用來完成。例如, 超聲和弗式細胞壓碎器 (Frenchpress 均質機) 都不便于用在收集小于或等于 5 mL 的培養液的情況,而且應用這些機械的方法經常會遇到過度的產熱和樣品被氧化等問題。微量細胞裂解的簡化方面的重大進

    亞細胞結構的分離與鑒定-2

    第三節 微粒體的分離細胞通過勻漿破碎時,細胞質膜碎成片段,這些膜片段的末端融合形成的直徑小于100nm的小泡。來自不同細胞器(細胞核、線粒體、質膜、內質網等)的小泡有不同的特性,所以可以將這些小泡相互分離。由內膜系統衍生而來的小膜泡形成相似大小的膜泡異質性集合體,稱微粒體(microsome)。分離

    蛋白質提取與純化技術(二)

    二、蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化方法很多,主要有:(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析  中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶

    細胞總蛋白質的分離提取

    細胞器是一種動態的結構,如內質網、細胞核和高爾基體等,其蛋白質組成除了駐留蛋白質之外,還包括穿梭蛋白質和瞬間相互作用的蛋白質。對于這些組成成分的研究,即亞細胞蛋白質組研究將有助于對這些蛋白質做全面的挖掘,從而對細胞器的功能作深入的闡述。蛋白質提取與制備具體操作方法如下:一、材料的選擇早年為了研究的方

    Western Blot技術篇之樣品制備

      Western Blot 是一種用于檢測蛋白質以及蛋白質翻譯后修飾的常用方法,可以對簡單或復雜生物樣品中的目標蛋白質進行半定量或定量分析。其操作步驟包括:   從細胞、組織或體液中制備樣品(蛋白質提取和蛋白質濃度測量)   十二烷基硫酸鈉(SDS)聚丙烯酰胺凝膠通過電泳按大小分離蛋白質

    Western Blot技術篇之樣品制備

      Western Blot 是一種用于檢測蛋白質以及蛋白質翻譯后修飾的常用方法,可以對簡單或復雜生物樣品中的目標蛋白質進行半定量或定量分析。其操作步驟包括:   從細胞、組織或體液中制備樣品(蛋白質提取和蛋白質濃度測量)   十二烷基硫酸鈉(SDS)聚丙烯酰胺凝膠通過電泳按

    Western Blot技術篇之樣品制備

      Western Blot 是一種用于檢測蛋白質以及蛋白質翻譯后修飾的常用方法,可以對簡單或復雜生物樣品中的目標蛋白質進行半定量或定量分析。其操作步驟包括:   從細胞、組織或體液中制備樣品(蛋白質提取和蛋白質濃度測量)   十二烷基硫酸鈉(SDS)聚丙烯酰胺凝膠通過電泳按大小分離蛋白質

    水平電泳儀選型

         Western Blot 是一種用于檢測蛋白質以及蛋白質翻譯后修飾的常用方法,可以對簡單或復雜生物樣品中的目標蛋白質進行半定量或定量分析。其操作步驟包括:      從細胞、組織或體液中制備樣品(蛋白質提取和蛋白質濃度測量)      十二烷基硫酸鈉(SDS)聚丙烯酰胺凝膠通過電

    目標蛋白(target proteins)粗提方法-3

    3)pH值 一般在被提取蛋白質的等電點的兩側,堿性蛋白用稀酸提取、酸性蛋白用稀堿提取。在某些情況下,為了破壞所分離的蛋白質與其他雜質的靜電結合,選擇偏酸(pH3-6)或偏堿(pH10-11),可以使離子鍵破壞而獲得單一的蛋白成分。4)溫度 提取時通常要求低溫操作。只有對某些耐高溫的蛋白質或酶(如胃蛋

    蛋白質的純化

    蛋白質的分離純化方法很多,主要有:(一)根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析  中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響,一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高,蛋白質的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽濃度繼續升高時,蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出,這種現象稱鹽析,將大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子

    煮沸裂解法提取質粒DNA

      質粒是存在于細菌染色體外的一個或多個能獨立復制并穩定遺傳的小型環狀雙鏈DNA分子,其分子量一般在0.2-10KD范圍內。由于質粒分子小,便于分離和提取,可以攜帶目的基因進入細菌、動物細胞或植物體內進行擴增與表達。  質粒提取方法即去除 RNA,將質粒與細菌基因組 DNA分開,去除蛋白質及其它雜質

    生物醫學光學技術

      摘 要:隨著生物分子光學標記技術的不斷進步,光學技術在揭示生命活動基本規律的研究中正發揮越來越重要的作用,也為醫學診斷與治療提供了更多、更有效的手段。本報告首先簡要介紹光學技術在生物醫學應用中的發展概況,然后從基因表達及蛋白質—蛋白質相互作用研究方面,討論生物分子光學技術的特點與優勢,闡明基于分

    生物醫學光學技術

      摘 要:隨著生物分子光學標記技術的不斷進步,光學技術在揭示生命活動基本規律的研究中正發揮越來越重要的作用,也為醫學診斷與治療提供了更多、更有效的手段。本報告首先簡要介紹光學技術在生物醫學應用中的發展概況,然后從基因表達及蛋白質—蛋白質相互作用研究方面,討論生物分子光學技術的特點與優勢,闡明基于分

    蛋白質提取與純化技術(二)

    2、等電點沉淀法 蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉淀,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用。3、低溫有機溶劑沉淀法 用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低并析出,此法分辨

    幾種DNA提取方法的優缺點比較

      幾種DNA提取方法的優缺點比較   文章來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司   自然界中無論是植物、動物還是病毒,DNA作為大部分生物的遺傳物質,在遺傳中起著不可替代的作用,為了研究生物的基因,就需要將DNA從細胞中提取出來,這個過程有很多方法可以實現,目前比較常用的有苯酚氯仿抽提法、離心柱法

    2014年北京色譜年會大會報告集錦(一)

      2014年12月12日,2014年北京色譜年會在龍爪樹賓館成功召開。本屆色譜年會由北京色譜學會主辦、北京理化分析測試技術學會承辦。年會以“色譜技術在環境和食品安全分析中的應用”為主題,共設立10篇大會報告和3篇廠商報告,吸引了色譜及相關領域的科技工作者300余人到場

    蛋白質提取與純化技術-2

    2、等電點沉淀法 蛋白質在靜電狀態時顆粒之間的靜電斥力最小,因而溶解度也最小,各種蛋白質的等電點有差別,可利用調節溶液的pH達到某一蛋白質的等電點使之沉淀,但此法很少單獨使用,可與鹽析法結合用。 3、低溫有機溶劑沉淀法 用與水可混溶的有機溶劑,甲醇,乙醇或丙酮,可使多數蛋白質溶解度降低并析出,此法分

    蛋白質提取與制備(Protein Extraction and Preparation)-2

    三、蛋白質提取與制備具體操作方法1、原料的選擇早年為了研究的方便,盡量尋找含某種蛋白質豐富的器官從中提取蛋白質。但至目前經常遇到的多是含量低的器官或組織且量也很小,如下丘腦、松果體、細胞膜或內膜等原材料,因而對提取要求更復雜一些。原料的選擇主要依據實驗目的定。從工業生產角度考慮,注意選含量高、來源豐

    幾種DNA提取方法的優缺點比較

      文章來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司   自然界中無論是植物、動物還是病毒,DNA作為大部分生物的遺傳物質,在遺傳中起著不可替代的作用,為了研究生物的基因,就需要將DNA從細胞中提取出來,這個過程有很多方法可以實現,目前比較常用的有苯酚氯仿抽提法、離心柱法和磁珠法,吉恩特實驗室就這三種提取方法

    幾種DNA提取方法的優缺點比較

    自然界中無論是植物、動物還是病毒,DNA作為大部分生物的遺傳物質,在遺傳中起著不可替代的作用,為了研究生物的基因,就需要將DNA從細胞中提取出來,這個過程有很多方法可以實現,目前比較常用的有苯酚氯仿抽提法、離心柱法和磁珠法,吉恩特實驗室就這三種提取方法進行了梳理和比較,總結出各方法的優缺點供廣大科研

    抗原的制備方法

    實驗步驟一、抗原的提取抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中,如

    抗原的制備方法

    實驗概要除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。實驗步驟一、抗原的提取  

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