人類滑膜原代細胞培養步驟和體會
1、將切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中(可不要動它),在手術完成時將標本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中帶回實驗室;2、在超凈臺中將標本放入培養皿中,加入α-MEM洗滌;3、獲得組織切開,仔細辨認于關節反折處及增生的白色光滑的滑膜組織,附于關節軟骨面的增生的血管翳也為滑膜組織(可作另一管消化),仔細剔除脂肪組織,用α-MEM洗二次(以去除紅細胞),放在小青瓶中用解剖剪銳性切碎4、用雙倍獲得組織的體積含有4mg/mlⅠ型膠原酶的α-MEM消化37℃孵育120分鐘(在此期間震動混勻數次);5、30分鐘后收集第一管細胞:細胞懸液經70μm細胞濾網過濾,用1500-2000轉離心6分鐘,上清為Ⅰ型膠原酶加入未過濾網的組織,繼續用于消化;6、離心管底細胞用α-MEM離心洗滌2次,每次用α-MEM重懸浮后用1500-2000轉,離心6分鐘,最后一次用記數板觀察到有細胞。細胞最終懸浮于含有10%胎牛血清的α-MEM中,接......閱讀全文
人類滑膜原代細胞培養步驟和體會
1、將切下的組織在手術臺上請護士將標本放入低溫生理鹽水中(可不要動它),在手術完成時將標本放入PBS冰水液中并放入消毒的容器中帶回實驗室;2、在超凈臺中將標本放入培養皿中,加入α-MEM洗滌;3、獲得組織切開,仔細辨認于關節反折處及增生的白色光滑的滑膜組織,附于關節軟骨面的增生的血管翳也為滑膜組織(
正常滑膜細胞原代培養
正常滑膜細胞原代培養實驗材料:1.?實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2.?清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3.?培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:1.?將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2.
正常滑膜細胞原代培養
實驗材料:實驗動物:大鼠、兔,人手術切除的關節等;2. 清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml鏈霉素,pH7.2;3. 培養液:RPMI1640培養基,補加15%小牛血清;實驗方法:將大鼠處死后,用75%酒精消毒;2. 用手術剪剖開其四肢皮膚與肌肉
人滑膜細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
人滑膜細胞原代培養實驗
酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人滑膜細胞原代培養實驗_酶消化法
人滑膜細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于相應細胞生理、形態學研究;(3)用于相關疾病研究。實驗方法原理將人滑膜從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置α-MEM生長培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料滑膜組織試劑、試劑盒Ⅰ型膠原酶胎牛血清生理鹽水
人原代類風濕關節炎滑膜成纖維細胞
細胞詳述:滑膜是關節囊的內層,淡紅色,平滑閃光,薄而柔潤,由疏松結締組織組成。關節腔內的所有結構,除關節軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關節腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。滑膜分泌滑液,在關節活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層,即薄的細胞層(內腔層)和血管層(內膜下層),是血管豐富的關節囊內膜,
人滑膜細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型
人滑膜細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 滑膜細胞是襯于關節內表面的細胞性內膜和內膜下層,分為A型滑膜細胞(滑膜巨噬細胞)和B型滑膜細胞(滑膜成纖維細胞).其中A型細胞最顯著的功能是吞噬作用和胞飲作用,該型細胞具有吞噬壞死細胞碎屑及病理狀態下關節腔內其他物質的功能;B型