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  • 血細胞分離培養方法和步驟1

    以前認為紅細胞、粒細胞、淋巴細胞、巨噬細胞等血細胞都屬終末分化細胞,很難在體外培養生長或僅能短期培養而不能傳代,近年來由于細胞培養技術的發展,已有血細胞培養成功的報道,正常血細胞在體外培養生長時間短,只有白血病細胞,血友病細胞、淋巴瘤細胞可培養成功并建立細胞系,但多半為EB病毒等致瘤病毒引起的轉化細胞,(EBNA檢查陽性),二甲基亞砜(DMSO)處理也可誘導這些細胞分化發生逆轉,表現為正常細胞。所建立的細胞系多半為單核細胞系、B淋巴細胞系、T淋巴細胞系,只在IL-2產品問世后,T細胞才可在體外建系、建株。血細胞可從外周血中用梯度液通過離心分層后分離獲得。也可從脾臟、扁桃體、淋巴結中用機械法切碎過篩分離獲得淋巴細胞,從腹腔刺激后的沖洗液中可獲得大量的單核-巨噬細胞,從骨髓中可以獲得前提血細胞,并可長期培養生長。加入生長因子或某些物質有利于細胞純化并促進分化和生長繁殖,例如在淋巴細胞中加入IL-2(TCGF),可促進T細胞生長,建立......閱讀全文

    血細胞分離培養方法和步驟2

    收集渾濁帶分離獲得的淋巴細胞,用無鈣、鎂離子的PBS洗3次后,再用培養基洗1次后計數,分瓶培養。此法分離獲得淋巴細胞純度高。分離液的制備:9% Ficoll(20℃下相對密度約1.020)24份與33.4%泛影葡胺(用泛影鈉或Conray400也可,在20℃下相對密度約1.200)10份混合后,

    血細胞分離培養方法和步驟1

    以前認為紅細胞、粒細胞、淋巴細胞、巨噬細胞等血細胞都屬終末分化細胞,很難在體外培養生長或僅能短期培養而不能傳代,近年來由于細胞培養技術的發展,已有血細胞培養成功的報道,正常血細胞在體外培養生長時間短,只有白血病細胞,血友病細胞、淋巴瘤細胞可培養成功并建立細胞系,但多半為EB病毒等致瘤病毒引起的轉化細

    血細胞分離技術

    實驗概要血細胞是免疫學研究或臨床檢驗常用的檢測對象或試驗材料,分離和純化血細胞是實驗室中的基本技術。目前分離血細胞的技術大多是根據各種細胞群特有的大小、沉降率、粘附性和吞噬能力等設計而成。實驗原理外周血液中的紅細胞與白細胞的比例在幾百甚至上千比一,兩類細胞的大小和密度不同,其沉降速度也就不同,紅細胞

    血細胞分離技術

    采血 (一)材料與試劑 1.抗凝劑 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是

    血細胞分離技術(一)

    采血 ? (一)材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理

    血細胞分離技術(二)

    (二)操作方法1.取抗凝血,自然沉降,如是馬屬動物的血液,可直接直立試管架上,讓其自然沉降1h,取上層血漿。如是牛、羊血液,由于其血沉速度非常慢,可加等量3%明膠液,混勻后讓其自然沉降,1h后取上層血漿。2.2 000r/min離心10min,棄上清。3.沉淀用Hank’s液混懸后,再2 000r/

    血細胞的分離實驗技術

    采血??(一)材料與試劑?1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一種螯合劑。用生理

    血細胞的分離方法2

    4、從3中所獲得的中性粒細胞進行純化 ? 1)因為方法3只能獲得80-85%純度的中性粒細胞,可以把方法2與方法3聯合對中性粒細胞進行純化。 2)收集從方法3 dextran沉降所得到的富含白細胞的血漿,275g*6min,離心。 3)管底

    血細胞的分離方法1

    血細胞由紅細胞,白細胞,血小板等組成.實驗中常用白細胞來做研究,如炎癥滲出,細胞遷移,識別等都涉及到白細胞.白細胞又分為:粒細胞,淋巴細胞,單核細胞等.它們具有不同的功能.實驗中常需要分離血細胞方能進行。這里主要論述人外周白細胞的分離,主要是中性粒細胞(Neutrophil),淋巴細胞(Lympho

    血細胞的離心分離

    在現代臨床醫學研究中,常常需要將全血中單核白細胞(淋巴細胞、大單核細胞)與紅細胞和多形核白細胞分離。在臨床治療應用中常常需要將全血作成分分離(全血分離成血漿,血小板,白細胞,紅細胞等等)(一)血細胞的實驗室純化:血液中存在著各種不同類型的血細胞,每種類型細胞有不同的特點和功能。醫學研究常常需要較純的

    什么是血細胞分離機?

    血細胞分離機是通過對全血進行處理,根據不同血液成分的密度、粘度等指標不同的特性將全血進行不同血液成分的分離,以便于根據需要采集其中部分血液成分的一種醫療器械。

    血細胞分離機臨床應用

    血細胞分離機可以進行的血液成份單采及相關治療項目1. ELP-延長血小板壽命的單采程序該程序可以從正常供者體內分離出兩份滿足臨床需要的濃縮血小板制品, 同時可以附 帶收集 200ml-400ml 血漿。有效采集時間約 60-100 分鐘/次。COBE 公司所提供的每一套 管道均帶有兩個可保存 150

    取走血漿的血細胞怎么分離pbmc

    我用一種叫buffycoat的東西分離PBMC,應該就是你說的取走血漿的血細胞了。看上去就非常的稠,靜置一會就會分層,上層是淡黃色的,感覺像是血細胞,下層還是深紅色。我的方法是用這種液體稀釋四倍后鋪在ficoll上梯度離心,和全血一樣。鋪的時候沒有全血好鋪,感覺很容易和ficoll混起來,不像全血是

    血細胞分離機的發展歷程

    1877年瑞典卡爾博士最早發明離心分離技術,隨后廣泛地應用于手動奶油分離技術中。現代血液離心分離采集技術源于1914年美國Johns Hopkins醫學院的研究小組。兩次世界大戰期間血液離心、分離、儲存技術得到了很大的發展。20世紀50年代初,Dr Cohn開發出第一臺封閉式的血液分離機,首次把重力

    血細胞分離機有哪些種類

    按血細胞分離機的分離技術原理不同可以分為三大類:離心式、濾膜式和吸附式。

    血細胞分離機應用范圍介紹

    1. 血小板/血漿采集:原發性血小板增多癥患者單采血小板后配合化療可使病情緩解快,持續時間長。2. 干細胞采集:外周血干細胞移植治療惡性腫瘤如慢性粒細胞白血病、急性白血病,多發性骨髓瘤。3. 淋巴細胞單采:淋巴細胞單采主要用于急慢性淋巴細胞性白血病的治療和惡性腫瘤患者。4. 粒細胞單采:急慢性白血病

    血細胞分離技術的操作程序

      (一)材料與試劑   1.抗凝劑   (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。   (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是

    骨髓造血細胞的長期培養

    實驗方法原理 將骨髓吸入培養液。作為附著的多層細胞,骨髓至少維持 12 周,可達 30 周。干細胞、趨向成熟的骨髓細胞和成熟骨髓細胞從附著的細胞層釋放入培養液。粒細胞或巨噬細胞的祖細胞可用軟凝膠培養檢測。實驗材料 小鼠試劑、試劑盒 Fischer培養液生長培養液儀器、耗材 注射器紗布拭子解剖剪解剖鑷

    骨髓造血細胞的長期培養

    實驗方法原理將骨髓吸入培養液。作為附著的多層細胞,骨髓至少維持 12 周,可達 30 周。干細胞、趨向成熟的骨髓細胞和成熟骨髓細胞從附著的細胞層釋放入培養液。粒細胞或巨噬細胞的祖細胞可用軟凝膠培養檢測。實驗材料小鼠試劑、試劑盒Fischer培養液生長培養液儀器、耗材注射器紗布拭子解剖剪解剖鑷培養瓶實

    骨髓造血細胞的長期培養

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將骨髓吸入培養液。作為附著的多層細胞,骨髓至少維持 12 周,可達 30 周。干細胞、趨向成熟的骨髓細胞和成熟骨髓細胞從附著的細胞層釋放入培養液。粒細胞或巨噬細胞的祖細胞可用軟凝膠培養檢測。

    骨髓造血細胞的長期培養

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將骨髓吸入培養液。作為附著的多層細胞,骨髓至少維持 12 周,可達 30 周。干細胞、趨向成熟的骨髓細胞和成熟骨髓細胞從附著的細胞層釋放入培養液。粒細胞或巨噬細胞的祖細胞可用軟凝膠培養檢測。

    厭氧菌的分離培養

    厭氧菌的分離培養主要分初代培養和次代培養兩個階段,其中初代培養相對比較困難,關鍵的問題就是厭氧環境和培養基的選擇。  初代培養的一般原則是:  (1)先將標本涂片染色直接鏡檢,指導培養基的選擇。  (2)盡量選用在厭氧菌中覆蓋面寬的非選擇性培養基。  (3)最好多選1~2種覆蓋面不同的選擇性培養基。

    血細胞分離機按原理如何劃分?

    按血細胞分離機的分離技術原理不同可以分為三大類:離心式、濾膜式和吸附式。

    血細胞分離機的應用領域

    1. 血小板/血漿采集:原發性血小板增多癥患者單采血小板后配合化療可使病情緩解快,持續時間長。2. 干細胞采集:外周血干細胞移植治療惡性腫瘤如慢性粒細胞白血病、急性白血病,多發性骨髓瘤。3. 淋巴細胞單采:淋巴細胞單采主要用于急慢性淋巴細胞性白血病的治療和惡性腫瘤患者。4. 粒細胞單采:急慢性白血病

    血細胞分離技術之大容量離心機

    ???????血細胞分離技術大容量離心機采血??(一)材料與試劑1.抗凝劑(1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。(2)乙二胺四

    新生大鼠心臟細胞的分離和培養實驗_分離及培養程序

    實驗材料Sprague Dawley 幼鼠試劑、試劑盒胰酶液乙醇儀器、耗材攪拌臺燒杯實驗步驟組織消化和分離細胞1. 在細胞操作間內,放一個加熱攪拌臺,上放一個裝有 100 ml 滅菌水的容量 600 ml 的燒杯,加熱至 37℃。2. 準備胰酶液。用水浴或溫箱使胰酶液溫度保持在 37℃。3. 做一個

    關于濾膜式血細胞分離機的簡介

      濾膜式血細胞分離機在臨床上的適用范圍小。其功能單一,主要用于患者血漿置換或者供者血漿/血小板的采集,不具有離心式血細胞分離機的多種功能和用途。其工作原理是利用濾膜的分子篩特性,將血漿或者顆粒大小不等的血小板與其他血細胞成分(紅細胞、白細胞、粒細胞等)分離。

    關于血細胞分離機的應用范圍介紹

      1. 血細胞分離機的應用范圍— 血小板/血漿采集:原發性血小板增多癥患者單采血小板后配合化療可使病情緩解快,持續時間長。  2. 血細胞分離機的應用范圍—?干細胞采集:外周血干細胞移植治療惡性腫瘤如慢性粒細胞白血病、急性白血病,多發性骨髓瘤。  3. 血細胞分離機的應用范圍—?淋巴細胞單采:淋巴

    大容量離心機分離血細胞的技術

      (一)材料與試劑   1.抗凝劑   (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其鈉鹽或鉀鹽,它能阻止凝血酶原轉化為凝血酶,進而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白,從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1 000U/ml,市售肝素多為100U~126U/mg。   (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是

    離心式血細胞分離機工作原理

    離心式血細胞分離機的基本原理是通過特制的封閉管路,使供血者的部分全血通過血細胞分離機進行體外循環,分離機根據全血中各種血液成份的比重不同,經離心力的作用將各血液成份分層、分離,然后通過電腦控制的管路系統,使不同的血液成份進入不同的通道,將需要采集的血細胞收集于產品袋,而將不需要的成份回輸給獻血者。

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