人PBMC分離和培養步驟和體會

1、將靜脈血20ｍl用ACD抗凝劑以容積比血：抗凝劑＝9：1抗凝處理。 2、按血：分離液＝1：2注入國產淋巴細胞分離液上層，400g 20℃離心30分鐘。 3、交接層重浮于4倍體積的RPMI1640并通過離心法200g，10min洗三次。 4、獲得細胞可做分選或其他實驗。體會： 1、實驗中我用過肝素方法抗凝，但效果不好，因為肝素抗凝后交接層混濁，洗滌后沒有細胞。后來是一位老師推薦我用ACD抗凝劑，效果very good。 2、實驗用的是國產淋巴細胞液（天津TBD），沒有用過進口的Ficoll/Paqnl。 3、分層時的離心溫度只能在20－25℃，過高細胞容易死亡或破壞，過低分層效果不好。我剛開始不知道，試過用5℃離心，其結果是一塌糊涂。 4、不能使用角離心機。......閱讀全文

流式細胞儀實驗方法

一、實驗準備1．標本制備：2． zui小化非特異性結合：二、凋亡1．凋亡的檢測方法：網站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA 四、血小板

2018-07-13 13:36 News WIKI 相關搜索

流式細胞儀實驗方法-1

流式細胞儀實驗方法一、實驗準備1．標本制備：2． zui小化非特異性結合：二、凋亡1．凋亡的檢測方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、細胞因子1．激活的細胞因子2．C

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