流式細胞儀實驗方法1
流式細胞儀實驗方法 一、 實驗準備1． 標本制備：2． zui小化非特異性結合： 二、凋亡1．凋亡的檢測方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法 三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA 四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板 五、紅細胞1．網織紅細胞2．PNH3．胎兒紅細胞 六、腫瘤學1．DNA 細胞周期2．蛋白3．多藥耐藥4．微小殘留白血病 *部分 標本處理 一、流式細胞術常規檢測時的樣品制備 （一）直接免疫熒光標記法 取一定量細胞（約1X106細胞／ml），在每一管中分別加入50μl的HAB，并充分混勻，于室溫中靜置1分鐘以上（）,再直接加入連接有......閱讀全文
流式細胞儀實驗方法-1
流式細胞儀實驗方法?一、?實驗準備1．?? 標本制備：2．?? zui小化非特異性結合：?二、凋亡1．凋亡的檢測方法：和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法?三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA?四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板?五、紅細胞1．網織紅細胞2．
流式細胞儀實驗方法
一、?實驗準備1．?? 標本制備：2．?? zui小化非特異性結合：?二、凋亡1．凋亡的檢測方法：網站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法?三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA?四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板?五、紅細胞1．網織紅細胞2．PNH3．胎兒紅
流式細胞儀實驗方法（二）
第二部分 細胞因子 細胞內細胞因子的流式細胞儀檢測 一、簡介隨著研究的進展，僅僅對細胞進行定量和活性的檢測已不能滿足需要。在單細胞水平研究細胞因子的表達能力對研究細胞因子在疾病中的作用越來越顯的重要無比。目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括：ELIspot、原位雜交、免疫細胞化學、限制
流式細胞儀實驗方法-2
六、流式檢測細胞染色基本過程（以全血為例）1、???收獲細胞：肝素鈉抗凝的靜脈血，按1：1與培養基混勻，加刺激劑，同時加蛋白轉運抑制劑（參照說明書）， 混勻后，37℃，5%二氧化碳培養4-6小時2、???阻斷Fc受體：用于消除非特異性的結合染色①??????在小鼠，可使用純化的FcII/III受體的
流式細胞儀實驗方法（三）
四、所需試劑1、細胞表面染色的熒光標記的單抗試劑依據實驗需要選擇特殊表面標志CD45圈定所有淋巴細胞CD3 圈定T淋巴細胞CD4 圈定T輔助淋巴細胞亞群CD8 圈定T抑制淋巴細胞亞群CD19/或CD20圈定B淋巴細胞CD56圈定NK淋巴細胞CD14圈定單核細胞2、熒光標記的細胞因子抗體：R&D提供F
流式細胞儀實驗方法（一）
一、實驗準備1． ? 標本制備：2． ? 最小化非特異性結合：二、凋亡1．凋亡的檢測方法：網站和其它2．PI染色法3．Annexin V 法4．TUNNEL法三、細胞因子1．激活的細胞因子2．CBA四、血小板1．活化2．活化檢測3．網織血小板五、紅細胞1．網織紅細胞2．PNH3．胎兒紅細胞六、腫瘤學
實驗動物的麻醉方法-1
麻醉（anesthesia）的基本任務是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺，保障實驗動物的安全，使動物在實驗中服從操作，確保實驗順利進行。一、常用的麻醉藥（一）常用局部麻醉劑：普魯卡因，此藥毒性小，見效快，常用于局部浸潤麻醉，用時配成0.5％～1％；利多卡因，此藥見效快，組織穿透性好，常用1％～2％
流式細胞儀標本制備-1
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器，已廣泛應用于免疫學、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷，對淋巴細胞群和亞群進行精確分類，還能分離純化某一群或亞群細
免疫熒光實驗方法-1
免疫熒光技術是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。它是根據抗原抗體反應的原理，先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團，再用這種熒光抗體（或抗原）作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原（或抗體）。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織，從而確定抗原或抗體的性質和定位，以及利用定量技術
沉淀反應實驗原理、材料和實驗方法（1）
可溶性抗原（如血清中的蛋白,組織浸出液,細胞裂解液等）與其相應的抗體在溶液中或凝膠中結合,若比例合適,可形成肉眼可見的抗原-抗體復合物,這就是免疫沉淀反應。免疫沉淀反應可以在小玻璃管中或毛細玻璃管及凝膠平板中進行。在用凝膠平板做實驗時,常用瓊脂糖凝膠做介質,有的加電流,使反應更快更靈