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    啟動子克隆方法研究進展(4)

    1.6 TAlL-PCR 很早就有用隨機引物的PCR,但由于無法有效地控制由隨機引物引發的非特異產物的產生,所以一直未能廣泛應用。近年來由IJiu等設計的TAIL-PCR(Termal Asymmetric Interlaced PCR)又叫熱不對稱交錯PCR,則解決了這個問題,后來有研究表明,經改良過的TAIL-PCR成功地從突變體中克隆到外源插入基因的旁側序列,從而為啟動子的克隆提供了有效的新方法。 在利用特異引物和隨機引物進行PCR中一般有3種產物生成:(1)由特異性引物和簡并引物擴增出的產物;(2)由同一特異性弓l物擴增出的產物;(3)由同一簡并引物擴增出的產物。在TAIL-PCR反應中,其中后2種目標產物可以通過以嵌套的特異性引物進行的后續反應來消除。 TAIL-PCR的基本原理是利用目標序列旁的已知序列設計3個嵌套的特異性引物(specialprimer,簡稱sp1,sp2,sp3,約20bp),用它......閱讀全文

    反向遺傳學技術及其在FMDV 研究中的應用

    劉光清 劉在新 謝慶閣(中國農業科學院蘭州獸醫研究所農業部畜禽病毒學重點開放實驗室,蘭州730046)摘 要:  反向遺傳技術是一種新興的分子生物學技術, 已廣泛應用于生命科學研究的各個領域。綜述反向遺傳技術研究進展,并討論該技術在口蹄疫病毒研究中的應用。關鍵詞:  反向遺傳學 反向遺傳技術 全長c

    21世紀海洋生物技術發展展望(二)

    2.3病原生物學與免疫隨著海洋環境逐漸惡化和海水養殖的規模化發展,病害問題已成為制約世界海水養殖業發展的瓶頸因子之一。開展病原生物(如細菌、病毒等)致病機理、傳播途徑及其與宿主之間相互作用的研究,是研制有效防治技術的基礎;同時,開展海水養殖生物分子免疫學和免疫遺傳學的研究,弄清海水魚、蝦、貝類的免疫

    選擇重組蛋白表達的合適方法

    重組蛋白是研究生物學過程的重要工具。需要使用表達系統來對其進行制備。合適表達系統的選擇取決于重組蛋白的特性、重組蛋白的預期應用以及該系統能否生產足夠量的蛋白質。作者: 伯吉斯等,主譯:陳薇,本實驗來自「蛋白質純化指南」實驗步驟一、引言選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及

    選擇重組蛋白表達的合適方法

    實驗步驟 一、引言 選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及 時 獲 取 所 需 數 量 和 質 量 的 重z組蛋白非常關鍵。選 擇 了 錯 誤 的表達宿主可 能 導 致 蛋 白 質錯 誤 折 疊 或

    選擇重組蛋白表達的合適方法(三)

    五、哺 乳 動 物 細 胞以前通常認為哺乳動物表達方法是重組蛋白表達效率最低的方法。然 而 ,最近的研究進展已經極大地提高了哺乳動物細胞系的表達水平(詳 見 第 15章)。例如, 有報道稱利用穩定轉染的中國倉鼠卵巢(Chinese hamster ovary,C H O )細胞,重組抗體的表

    破譯中國人基因密碼:“中國十萬人基因組計劃”將4年完成

      我是誰?我從哪里來?我將到哪兒去?這一終極哲學命題,有多種不同的解答視角。從基因角度給出的答案,無疑是非常重要的一種。近一段時間,有關基因領域的新聞將基因檢測、基因編輯、癌癥的靶向治療等原本屬于生物醫學領域的專業話題,一下子變成了公眾話題。人們對于基因的好奇在于:基因是如何影響人類的長相、身高、

    活體成像——讓腫瘤細胞無處遁形

    在科普今天的知識前,不禁讓小編回憶起大學校園的美好時光,那個時候小編還是個走在綠樹蔭下的青澀少年啊,在一次參加關于腫瘤免疫學的學術會議上,看到了類似下面這種圖,我就在想,這小鼠是修煉了什么內家功法,被打通任督二脈了?那五顏六色的東東是什么?經過向老師還有身邊的小伙伴們請教才知道,這是利用活體成像技術

    抗體類熱門新靶點巡禮(神經、降血脂、腫瘤、自身免疫)

      單克隆抗體技術發展日新月異。早期,抗體類藥物主要是解決免疫原性問題,上世紀80年代以前的單抗主要是鼠源抗體,包括免疫原性反應在內的安全性問題使其難以得到臨床認同。1989年Winter研究所用PCR方法克隆出機體全部基因,這為人類在不依賴鼠抗體的情況下直接制備人抗體奠定了基礎。如今,全人源抗體技

    華中農大轉基因水稻:師生福利糧 連吃14年

      近期,關于轉基因食品的新聞層出不窮。61名院士聯名上書請求盡快推進轉基因水稻產業化;上千噸轉基因菜籽油流入國儲庫風波乍起;崔永元稱年內計劃再赴美國拍攝轉基因紀錄片;國產非轉基因大豆種植區九成豆企虧損停產;張掖一紙禁令喊停種植轉基因作物。轉基因食品猶如待嫁新娘,或許是由于打扮得與眾不同,大家都在猜

    轉基因水稻技術解密:原理清晰操作嚴謹

    光照培養室,轉基因水稻幼苗在白熾燈模擬的日照環境下生長 水稻實驗田剛收獲的黃金大米   近期,關于轉基因食品的新聞層出不窮。61名院士聯名上書請求盡快推進轉基因水稻產業化;上千噸轉基因菜籽油流入國儲庫風波乍起;崔永元稱年內計劃再赴美國拍攝轉基因紀錄片;國產非轉基因大豆種植區九成豆企虧損停產;張掖

    RNAi的作用機制及siRNA的合成方法

    RNAi的作用機制及siRNA的合成方法RNA干擾(RNA interference,RNAi)是由雙鏈RNA(double strandedRNA, dsRNA)分子在mRNA水平關閉相應序列基因表達或使其沉默的過程。dsRNA可以抑制不同類型細胞的靶向基因表達,用特異性的抗體幾乎檢測不到靶向

    RNAi的作用機制及siRNA的合成方法(二)

    2.3 倍增階段    siRNA在RNA依賴性RNA聚合酶(RdRP)的作用下,以mRNA為模板,siRNA為引物,擴增產生足夠數量的dsRNA作為底物提供給Dicer酶,產生更多的siRNA, 可再次形成RISC,并繼續降解mRNA,從而產生級聯放大效應

    單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)簡介

    摘要對單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)的研究分析近幾年被廣泛應用于生物及醫學研究的諸多領域,篩查SNPs的方法很多,各具特色,并一直不斷地發展.本文對篩查SNP的幾種常用及最新方法做一簡要介紹,其中包括PCR-RFLP,分子信標等.細胞外基質

    超級耐藥菌接踵而至!科學家們如何正面剛?

      隨著關于“超級細菌”的新聞的不斷出現,人們對耐藥細菌和超級細菌的擔心和恐慌也與日俱增。誠然,耐藥基因的出現成為了壓垮抗生素的最后一根的稻草,而超級細菌的出現則給人類的生命健康帶來了紅果果的威脅。那么在這些威脅面前,科學家們如何應用最新知識和技術來創造對抗這些細菌的新技術和新方法呢?本文就為大家盤

    DNA分子標記技術研究進展(二)

    2.第二代分子標記2.1 SSR標記技術    在真核生物基因組中存在許多非編碼的重復序列,如重復單位長度在15~65個核苷酸的小衛星DNA(Minisatellite DNA),重復單位長度在2~6個核苷酸的微衛星DNA(Microsatellite DN

    華中農業大學一天連發2篇Nature子刊和1篇Cell 子刊!

      作為農業領域實力最強的高校之一,華中農業大學在作物遺傳育種、微生物學、果樹學、分子化學與分子生物學、遺傳學、細胞生物學等學科領域一直很有優勢。  近幾年,華中農業大學的這些優勢學科發展也都非常迅速。繼上個月一周連發3篇Nature子刊后,4月11日,華中農業大學3個研究團隊又同時發表了3篇頂尖論

    Natureasia聚焦:CRISPR/Cas研究進展Top20

      CRISPR/Cas系統是目前發現存在于大多數細菌與所有的古菌中的一種后天免疫系統,其以消滅外來的質體或者噬菌體并在自身基因組中留下外來基因片段作為“記憶”。  CRISPR/Cas系統全名為常間回文重復序列叢集/常間回文重復序列叢集關聯蛋白系統(clustered regularly inte

    2019年中國學者發表CNS統計,誰是CNS發表之王?

      【51/52】2019年4月4日,清華大學柴繼杰課題組、中科院遺傳發育所周儉民課題組和清華大學王宏偉課題聯合同期背靠背發表兩篇重量級Science文章,完成了植物NLR蛋白復合物的組裝、結構和功能分析,揭示了NLR作用的關鍵分子機制,是植物免疫研究的里程碑事件。兩篇文章分別是: "Li

    大躍進 | 中國學者CNS發表超過100篇生命科學領域研究成果

      【50】2019年4月12日,中科院上海藥物所徐華強,王明偉,浙江大學張巖及匹茲堡大學醫學院Jean-Pierre Vilardaga共同通訊在Science發表題為“Structure and dynamics of the active human parathyroid hormone r

    2019中國生命科學領域CNS盤點:曹雪濤 顏寧 施一公上榜

      截至2019年12月23日,中國學者在Cell,Nature及Science在線發表了107篇文章(2019年的Cell ,Nature 及Science 已經全部更新),iNature團隊對于這些文章做了系統的總結:  按雜志來劃分:Cell 發表了31篇,Nature 發表了44篇,Scie

    RNAi技術研究進展

      RNA干擾(RNA interference,RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA,dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現,植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri

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    “主要農業動物功能基因組研究與應用”總結交流工作舉行

       2017年4月20-21日,863計劃現代農業技術領域“主要農業動物功能基因組研究與應用”在重慶西南大學召開了項目總結交流會。項目首席專家中國農業大學趙要風教授、各課題負責人以及主要學術骨干等60余人參加了項目總結會,中國農村技術開發中心農業高技術處相關同志參加了會議。會上,863計劃項目首席

    2016年腫瘤干細胞重磅研究進展

      腫瘤干細胞是一群具有自我更新、多向分化潛能、具有啟動和重建腫瘤組織表型能力的腫瘤細胞。前期研究均表明,腫瘤干細胞參與腫瘤的轉移、復發和對化療和放療耐受。因此,靶向腫瘤干細胞的治療策略將有望為癌癥的治療帶來希望。科學家們也在腫瘤干細胞的研究中投入了不少精力,試圖通過腫瘤干細胞的研究解決腫瘤起源及治

    能源植物“小桐子”在版納植物園獲得新發展

      小桐子計劃繁華難現?   “小桐子是一種可以在干旱條件下茂盛生長的灌木,其種子可以生產類似于柴油的燃油,但目前人們將其當做綠色金子的期望正在減退——許多人曾把小桐子當做邊際土地上最有潛力的拯救者,一種可以使發展中國家擺脫貧窮并將其帶入一個可持續的、油料供應充足的未來能源植物。”   這段話,

    泛冠狀病毒藥物開發的基礎知識

      高致病性冠狀病毒感染成了這十年來廣受關注公共衛生問題。嚴重急性呼吸綜合征(SARS,2002-2004),中東呼吸綜合征(MERs,2012-至今),2019-nCov(COVID-19),每一個對人類健康,經濟發展都帶了巨大的沖擊。   病毒通過接觸,飛沫,氣溶膠等形式,引起廣泛傳播,引起高

    范云六:一位女院士的基因工程之路

    一片丹心為蒼生   范云六,湖南長沙人。農業生物工程專家。1952年畢業于武漢大學。1960年獲蘇聯列寧格勒大學副博士學位。現任中國農業科學院生物技術研究所研究員;國家973計劃專家顧問組成員;農作物基因資源與基因改良重大科學工程學術委員會主任;國際HarvestPlus項目

    2011年"中國高等學校十大科技進展"入選項目介紹

      2011年12月12日,由教育部科學技術委員會組織評選的2011年度“中國高等學校十大科技進展”在京揭曉。現將2011年度入選項目名單予以介紹。 一、正調控水稻種子大小、粒重和產量的GS5基因克隆與功能研究   主持單位:華中農業大學 主持人:何予卿   經過近10年的研究,由華中農業大學

    Nature:14項人類癌癥研究的里程碑式進展

      癌癥目前仍然是全世界人類最大的殺手之一。近日,Nature Genetics 和 Nature Medicine 聯合發表了題為:Nature Milestones in Cancer 的文章,總結了21世紀以來癌癥研究旅程中的14個重要的里程碑事件,以展示在理解癌癥和開發新療法方面取得的重大進

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