小鼠巨噬細胞的表型檢測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管，將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻斷 I g G 4ul， 4°C 孵育 lOmin。3 . 按 表 6. 2. 2 所示 ，在 1 號 和 2 號管中加入適量的生物素偶聯的單抗，然 后 將 1 號 、 2號 和 3 號試管冰浴 15 min。4 . 在 4 號管中加人 5M1 E M A ，混勻。將 試 管 置 白 熾 燈（如 40W 白熾燈）18c m 遠 處 ，室 溫 lOmin。E M A 只 能 進 入 死 細 胞 。 利 用 死 細 胞 的 強 染 色 性 ， 在 F L l 和 F L 3 雙 變 量 散 點 圖上 可 與 活 細 胞 相 區 分 。5 ......閱讀全文
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－表－型－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管，將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－分－離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細
巨－噬－細－胞－一－氧－化－氮－的－檢－測
實驗步驟基本方案材料展開
P－C－R－檢－測－小－鼠－T－細－胞－受－體－表－達
實驗步驟?基本方案 I P C R 分析小鼠 T C R 基因表達材 料正常小鼠的組織勻漿或者是 H B S S 制備的單個細胞懸液（IO4?IO7) (附 錄 1)無菌水展開
巨－噬－細－胞－抗－腫－瘤－活－性－的－檢－測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
巨－噬－細－胞－吞－噬－功－能－和－殺－傷－功－能－的－檢－測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核
ELISPOT方－法－檢－測－分－泌－細－胞－因－子－的－細－胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基（或其他適宜培養基）分泌細胞因子的細胞（小鼠或人的）絲裂原，抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
細－胞－毒－性－T－淋－巴－細－胞－的－誘－導－及－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
流－式－細－胞－儀－檢－測－全－血－的－人－淋－巴－細－胞
實驗步驟基本方案材 料（打 V 項 目 見 附 錄 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉，過濾除菌單 克 隆 抗 體（標記的，未標記的或生物素化的），通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗（僅用于未標記的一抗）F T T C 標記的鏈霉
B－細－胞－分－泌－抗－體－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞（P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板（Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 10
P－C－R－檢－測－人－T－細－胞－受－體－基－因－的－表－達
實驗步驟?基 本 方 案 PCR檢 測 人 T 細胞受體基因的表達展
BrdU－檢－測－丁－細－胞－和－B－細胞增殖
實驗步驟基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
NK/L－A－K－細－胞－殺－傷－活－性－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案?51C r 釋 放 法檢 測 NK/LA K 細胞殺傷活性材 料展
PCR－檢－測－細－胞－因－子－m－R－N－A－的表達
實驗步驟基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表達水平材 料內參照：轉 錄 質 粒 載 體（含有臨床生物檢測標本相關的c D N A )胍鹽溶液50 U/ul RNasin5 X 反轉錄酶緩沖液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
B－細－胞－功－能－的－增－殖－檢－測－方－法
實驗步驟基 本 方 案 抗 I g M 與 L P S 刺激的 B 細胞增殖材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)純化的靜息 B 細 胞（單 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度離心制備V D M E M -10 完全培養基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
干細胞的鑒定實驗——流－式－細－胞－儀－檢－測－分－析－技－術
實驗步驟流 式 細 胞 儀 檢 測 分 析 技 術實 驗 材 料(1) 不同來源的干細胞，細胞數不少于 5xl0?5?個/管。(2) 熒光標記的抗體或抗體及熒光二抗。(3)PBS。實 驗 步 驟(1) 將 細 胞 用 PBS 充分洗滌后重懸于 5000 PBS 中，如果細胞收集和鑒定不能同天完成，可
小鼠巨噬細胞的分離
基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細胞用）7
IL－2－和－IL－4－的檢測實驗
實驗步驟基 本 方 案 采 用 CTLL- 2 細 胞 檢 測 小 鼠 IL - 2 和 IL -4材 料較 總 T C G F 和 抗 IL-4 存在時的 T C G F 單位數獲得。通過比較抗 IL-4 抗體存在下的T C G F 活性和兩種抗體都存在下的 T C G F 活性的不同來計算 IL
人單核/－巨噬細胞的表型檢測
實驗步驟基本方案材料待 測 單 個 核 細 胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或 外 周 血 單 個 核 細 胞（單 元 8.1)或者單核/巨 噬 細 胞（單 元 8. 5 , 推薦采用陰性分選）PBSPBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS阻 斷 IgG，濃 度 3 mg/ml (
人單核/－巨噬細胞的表型檢測
基本方案材料待 測 單 個 核 細 胞（肝素抗凝血或肝素抗凝骨髓）或 外 周 血 單 個 核 細 胞（單 元 8.1)或者單核/巨 噬 細 胞（單 元 8. 5 , 推薦采用陰性分選）PBSPBS/肝素：含 0.1% (V/V ) 肝 素 的 PBS阻 斷 IgG，濃 度 3 mg/ml (如正常小
T－細－胞－克－隆－的－建－立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
小鼠巨噬細胞的活化
巨噬細胞的活化經歷兩個階段：致敏階段和激活階段。活化巨噬細胞的方案多采用一 步 法 （致敏并且激活），本方案則明確區分巨噬細胞活化的這兩個階段。經過一段時間 誘 導 后 （48?72h) ，可 檢 測 巨 噬 細 胞 對 病 原 體 （如寄生蟲或細菌；單 元 6. 5 和 6. 6)的殺傷作用或所合
胞質小RNA的概念
中文名稱胞質小RNA英文名稱small cytoplasmic RNA;scRNA定 義細胞質中的小分子RNA。通常指轉移核糖核酸(tRNA)和小的核糖體RNA(rRNA)，如5S rRNA、5.8S rRNA等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）
HIV的檢測與分析_在單核細胞和巨噬細胞中培養－HIV
實驗步驟基 本 方 案 單 核 細 胞 來 源 的 巨 噬 細 胞 培 養 和 H IV 感染藥物或生長因子的加入時間依試劑及實驗方案而定，單核細胞通常在分離的當天加入 ，成熟的單核細胞來源的巨卩蜜細胞（monocyte-derived macrophages， M D M ) 則在H I V 感染
Fcγ－受－體－介－導－的－黏－附－作－用－和－吞－噬－作－用－的－檢－測
實驗步驟基本方案 FcY 受體介導的吞噬作用材 料原代巨噬細胞或巨噬細胞株（單 元 6.1 和 8. 5)R P M I -5 完 全 培 養 基（或其他培養基）綿 羊 紅 細 胞（S R B C ) ，用 Alsever 溶 液 I : I (V /V ) 稀 釋（附 錄 1)生理鹽水： 0. 9
敵鼠鈉鹽速測盒說明
敵鼠鈉鹽速測盒【簡 介】敵鼠鈉鹽為淡黃色粉末，無臭無味，可溶于熱水和乙醇等有機溶劑。敵鼠鈉鹽是目前應用最廣泛的第一代抗凝血殺鼠品種之一。本方法適用于食物、水及中毒殘留物中敵鼠鈉鹽的快速檢測。【檢 測 原 理】敵鼠鈉鹽又名敵鼠，化學名為 2- 二苯基乙酰基 -1,3- 茚二酮，可與三氯化鐵反應出現
外周血和臍帶血中分離單個核細胞
基 本 方 案 FicoH-Hypaque梯度離心法分離單個核細胞材 料肝 素 抗 凝 血（附 錄 3 G ) 或 者 肝 素 化 的 臍 帶 血（I Oml臍 帶 血 加 入 I m l 含 250U 的P B S 為宜）P B S聚蔗糖-泛影葡胺（Ficoll-Hypaque) 溶液H B S
人－NK－T－細－胞－的－分－離－和－擴－增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選）流 式 細 胞 緩 沖 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
γ干－擾－素－的－檢－測
實驗步驟基本方案材 料展
胞質小RNA的基本信息
中文名稱胞質小RNA英文名稱small cytoplasmic RNA;scRNA定 義細胞質中的小分子RNA。通常指轉移核糖核酸(tRNA)和小的核糖體RNA(rRNA)，如5S rRNA、5.8S rRNA等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），核酸與基因（二級學科）