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    蛋白質提取與制備(ProteinExtractionandPreparation)3

    水溶液提取:大部分蛋白質均溶于水、稀鹽、稀堿或稀酸溶液中。因此蛋白質的提取一般以水為主。稀鹽溶液和緩沖溶液對蛋白質穩定性好、溶度大,也是提取蛋白質的最常用溶劑。鹽溶液提取:以鹽溶液及緩沖液提取蛋白質進常注意下面幾個因素。鹽濃度等滲鹽溶液尤以0.02~0.05mol/L 磷酸鹽緩沖液和碳酸鹽緩沖液常用。0.15mol/L 氯化鈉溶液應用也較多。如6-磷酸葡萄糖脫氫酶用0.1mol/L 碳酸氫鈉液提取等。有時為了螯合某些金屬離子和解離酶分子與其他雜質的靜電結合,也常使用枸櫞酸鈉緩沖液和焦磷酸鈉緩沖液。有些蛋白質在低鹽濃度下濃度低,如脫氧核糖核蛋白質需用1mol/L 以上氯化鈉液提取。總之,只要能溶解在水溶液中而與細胞顆粒結合不太緊密的蛋白質和酶,細胞破碎后選擇適當的鹽濃度及PH,一般是不難提取的。只有某些與細胞顆粒上的脂類物質結合較緊的,需采用有機溶劑或加入表面活性劑處理等方法提取。PH 值:蛋白質提取液的PH ......閱讀全文

    BioTechniques:2015最受歡迎的技術文章

      BioTechniques雜志日前評出了2015年最受歡迎的十篇技術文章,涵蓋了對PCR、DNA提取、無細胞蛋白表達等常規技術的改良,以及CRISPR/Cas9、Hi-Plex、微圖案化等新技術的應用。  1. Visual detection of isothermal nucleic aci

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