小鼠肌肉原代細胞的分離和生長(沒有細胞分類)
實驗材料新生的小鼠試劑、試劑盒乙醇PBS膠原蛋白酶 分散酶 氯化鈣溶液F-10肌肉原代細胞培養基分化培養基儀器、耗材用于斷頭術的器具或者是用于二氧化碳吸人的裝置鋒利的彎手術剪(滅菌)組織培養板滅菌的剃刀刀片尼龍網桌面離心機膠原包被的組織培養板帶相位光軸的倒置顯微鏡實驗步驟1.用斷頭術或者二氧化碳吸入法處死 1~5 只新生小鼠。2.用 70% 的乙醇沖洗四肢,并用鋒利的彎手術剪切下來。在立體解剖顯微鏡下工作,用鉗狀骨針將肌肉從皮膚和骨頭上切下來。如果四肢都成功地切下來,將肌肉組織存放在一個的組織培養板中,滴上滅菌 PBS,確保這些累計的組織的無菌性。3.加足夠量的 PBS 保持組織濕潤然后用剌刀在培養板中將其切碎成肉泥。然后加膠原蛋白酶/分散酶/氯化鈣溶液,按每克 2 ml 的量加人(對于 1~5pups 的量加 0.5 ml), 繼續切割幾分鐘。以上操作和接下來的步驟都在滅菌的組織培養罩上進行。4.將切碎的組織轉移到一個滅菌管中......閱讀全文
小鼠肌肉原代細胞的分離和生長(沒有細胞分類)
實驗材料新生的小鼠試劑、試劑盒乙醇PBS膠原蛋白酶 分散酶 氯化鈣溶液F-10肌肉原代細胞培養基分化培養基儀器、耗材用于斷頭術的器具或者是用于二氧化碳吸人的裝置鋒利的彎手術剪(滅菌)組織培養板滅菌的剃刀刀片尼龍網桌面離心機膠原包被的組織培養板帶相位光軸的倒置顯微鏡實驗步驟1.用斷頭術或者二氧化碳吸入
原代細胞培養-小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞培養-小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞培養-小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于:(1)分子生物學;(2)細胞生物學;(3)遺傳學;(4)免疫學;(5)腫瘤學;(6)病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物體內取出所需的組織(或器官),經胰酶消化,
小鼠原代海馬神經元細胞的分離培養方法
原代小知識——小鼠原代海馬神經元細胞的分離培養方法海馬體主要負責記憶和學習,日常生活中的短期記憶都儲存在海馬體中。神經元是構成神經系統結構和功能的基本單位。神經元具有長突起,由細胞體和細胞突起構成。小鼠海馬神經元細胞的組織來源于實驗小鼠的正常腦組織,因為海馬神經元細胞類似于干細胞屬于高分度分化的細胞
原代細胞的取材和分類方法
將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。 原代細胞培養的步驟一般是:取材→分離→培養和維持,今天我們重點介紹原代細胞的取材和分離方法。 一、取材 人和動
原代細胞分離技術
1. 懸浮細胞的分離方法 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。 2) 去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的PBS清洗后1000rpm/分鐘離心5分鐘。此步重復兩次。 3) 用培養基重懸,調整適當細胞濃度后分瓶培養。 4) 如選用懸液中某種細胞,
原代細胞分離技術
實驗概要本文介紹了原代細胞分離技術,包括懸浮細胞的分離方法和實體組織材料的分離方法。實體組織材料的分離方法有機械分散和消化分離兩種。實驗步驟1. 懸浮細胞的分離方法?? 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。?? 2) 去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的P
原代細胞分離技術
取人或動物體內(或胚胎)的組織,將其剪碎至1mm3的組織塊,再采用的如下方法進行分離培養:一、懸浮細胞的分離方法1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。2、去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的PBS清洗后1000rpm/分鐘離心5分鐘。此步重復兩次。3、用培養基
成年大鼠心室肌肉細胞的分離和培養實驗_分離ARVM細胞
實驗材料鼠試劑、試劑盒KH 緩沖液混合氣體儀器、耗材對流工作臺或層流式超凈臺乙醚罩冷凝器循環水浴和水浴搖床圈型架蠕動泵臺式醫用離心機無菌燒杯ColorpHast pH 試紙實驗步驟一、ARVM 細胞分離的準備工作1. 準備如下設備及器材:對流工作臺或層流式超凈臺乙醚罩冷凝器循環水浴和水浴搖床帶夾的圈