一、定性分析在高效液相色譜中,常用的定性分析有下列五種方法。1、利用已知標準樣定性由于每一種化合物在特定的色譜條件下有其特定的保留值,如果在相同的色譜條件下,被測物與標樣的保留值相同,則可初步認為被測物與標樣相同。2、利用紫外和熒光光譜定性由于不同的化合物有其不同的紫外吸收或熒光光譜,對檢測池中的待檢樣品進行全波長(180~800nm)掃描,得到紫外可見光或熒光光譜圖;再用相應標準品,按同樣方法處理,也得到一個光譜圖,比較這兩張圖譜,即可鑒別該樣品是否與標準品相同。對于某些有特征光譜圖的化合物,也可以與所發的標準圖譜來比較以進行定性。3、收集柱后流出組分,再用其他化學或物理方法定性液相色譜常用化學檢測器,被測物經過檢測器后不受破壞,所以可以收集各組分,然后再用紅外光譜、質譜、核磁共振等方法進行鑒定。4、HPLC 指紋圖譜分析法HPLC 指紋圖譜分析法是指紋圖譜與 HPLC 相結合的一種分析方法,目前已成為中藥質量控制的首選方法,......閱讀全文
一、定性分析在高效液相色譜中,常用的定性分析有下列五種方法。1、利用已知標準樣定性由于每一種化合物在特定的色譜條件下有其特定的保留值,如果在相同的色譜條件下,被測物與標樣的保留值相同,則可初步認為被測物與標樣相同。2、利用紫外和熒光光譜定性由于不同的化合物有其不同的紫外吸收或熒光光譜,對檢測池中的待
與氣相色譜相比,高效液相色譜定性的難度更大。HPLC過程中影響待測組分遷移的因素較多,同一組分在不同色譜條件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作條件下,同一組分在不同色譜柱上的保留值也可能有很大差別。因此,在高效液相色譜分析過程中,對定性分析方法提出了更高的要求。 (1)利用檢測器的選擇性進
液相色譜法作為一種重要的分離分析手段,具有能通過色譜柱分離復雜樣品中不組分的能力,這種能力是任何其他分析方法所無法比擬的。對色譜柱分離后的組分進行。盡管液相色譜法包多定性及定量鑒定,是色譜工作者完成分析工作的一個重要環節。盡管液相色譜法包括多種模式,但無論采用何種模式,對樣品進行定性及定量分析皆基于
色譜圖橫軸是保留時間,可以定性。就是說,已知在這個方法下,甲基萘是6.1min出峰。位置樣品在6.1min處有色譜峰,那么這個樣品中就含有甲基萘。色譜圖的縱軸市電信號,反應出來就是峰高或者是峰面積。而這個參數就是定量。比如甲基萘0.1mg/ml濃度的樣品峰面積是100,現在未知樣品在6.1min峰面
根據分離機制不同,高效液相色譜可分為四大基礎類型:分配色譜、吸附色譜、離子交換色譜和凝膠色譜。①分配色譜法:分配色譜法是四種液相色譜法中應用最廣泛的一種。它類似于溶劑萃取,溶質分子在兩種不相混溶的液相即固定相和流動相之間按照它們的相對溶解度進行分配。一般將分配色譜法分為液-液色譜和鍵合相色譜兩類。液
高效液相色譜擁有眾多分離模式,建立液相色譜分離方法的第一步即是根據樣品種類選擇合適的分離模式。理論上,任何一種化合物的性質都可以構建相應的分離模式。圖1所示為一個蛋白質分子。根據其分子量、帯電性質、生物活性、溶解性能等性質,可以分別構建凝膠色譜、離子交換、親和色譜、反相色譜等分離模式,用于其與其他化
①液相色譜速率方程:1956年,荷蘭學者 Van Deemter 等人吸收了塔板理論的概念,并把影響塔板高度的動力學因素結合起來,提出了色譜過程的動力學理論——速率理論。它把色譜過程看作一個動態非平衡過程,研究過程中的動力學因素對峰展寬(即柱效)的影響。后來 Giddings 和 Snyder 等人
流動相溶劑的選擇 1)所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。 2)溶劑應當不干擾檢測器的工作,溶劑應與檢測器匹配,選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。 3)在制備分離中,溶劑應當易
氣相色譜儀是一種多組份混合物的分離、分析工具,它是以氣體為流動相,采用沖洗法的柱色譜技術,當多組份的分析物質進入到色譜柱時,由于各組分在色譜 柱中的氣相和固定液液相間的分配系數不同,因此各組份在色譜柱的運行速度也就不同,經過一定的柱長后,順序離開色譜柱進入檢測器,經檢測后轉換為電信號送 至數據處理
氣相色譜儀是一種多組份混合物的分離、分析工具,它是以氣體為流動相,采用沖洗法的柱色譜技術,當多組份的分析物質進入到色譜柱時,由于各組分在色譜 柱中的氣相和固定液液相間的分配系數不同,因此各組份在色譜柱的運行速度也就不同,經過一定的柱長后,順序離開色譜柱進入檢測器,經檢測后轉換為電信號送