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對于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流動相。甲醇/水作流動相時，如果得到的色譜圖出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分離效果又不錯，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。對于一些難分離的物質，要選用乙腈/水作流動相。由于高效液相色譜中流動相是液體，它對組分有親和力，并參與固定相對組分的競爭。因此，正確選擇流動相直接影響組分的分離度。對流動相溶劑的要求是：（1）溶劑對于待測樣品，必須具有合適的極性和良好的選擇性。（2）溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器，應注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。所謂溶劑的紫外截止波長指當小于截止波長的輻射通過溶劑時，溶劑對此輻射產生強烈吸收，此時溶劑被看作是光學不透明的，它嚴重干擾組分的吸收測量。對于折光率檢測器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相，以達最高靈敏度。（3）高純度。由于高效液相靈敏度高，對流動相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會引起基線不穩，或產生......閱讀全文
流動相脫氣對于避免HPLC系統出問題，順利得到一個理想的數據是一個很有效的措施。HPLC系統內是不能夠有氣泡存在的。HPLC泵在輸送液體時要產生很大的壓力，由于氣體的壓縮比與液體相比大的多，因而當氣泡存在時，你將觀察到瞬間的流速降低和系統壓力下降。如果這個氣泡足夠大，液相泵將不能輸送任何溶劑，而且
一、液相色譜流動相的性質要求 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。 選好填料（固定相）后，強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少，相應的容量因子k降低；而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加，相應的容量因子k升高。因此，k值是流動相組成的函數。塔
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力 b、流動相具有一定惰性，與樣品不產生化學反應(特殊情況除外)。 c、流動相的黏度要盡量小 d、流動相的物化性質要與使用的檢測器相適應 e、流動相沸點不要太低，否則容易產生氣泡，導致實驗無法進行。 f、在流動相配制好后，一定要進行脫氣。 對
流動相的脫氣 HPLC所用流動相必須預先脫氣，否則容易在系統內逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率，影響檢測器的靈敏度、基線穩定性，甚至使無法檢測。（噪聲增大，基線不穩，突然跳動）。此外，溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化
流動相 ——色譜分離過程中攜帶組分向前移動的物質。 固定相 ——色譜分離過程中不移動的具有吸附活性的固體或是涂漬在載體表面的液體。
要根據樣品的性質、PH值、樣品的溶解度,由樣品在有機溶劑中溶解度的大小,初步判斷樣品是非極性化合物還是極性化合物,進而推斷用非極性溶劑戊烷、己烷、庚烷等,還是極性溶劑二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙腈等來溶解樣品,并通過實驗判斷.若樣品溶于非極性溶劑,表明樣品為非極性化合物,通常可以選吸附色譜法或
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。 ?????? 流動相選擇 ?????? 1：由強到弱：一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果
流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內，不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑，導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統，可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發引起組成變化，也防止氧和二氧化碳溶入流動相。 磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長
流動相要求 液相色譜的流動相必須符合下列要求： （1）能溶解樣品，但不能與樣品發生反應。 （2）與固定相不互溶，也不發生不可逆反應。 （3）粘度要盡可能小，這樣才能有較高的滲透性和柱效。 （4）應與所用檢測器相匹配。例如利用紫外檢測器時，溶劑要不吸收紫外光。 （5）容易精制、純化、毒性
流動相選擇 1）由強到弱：一般先用90％的乙腈（或甲醇）／水（或緩沖溶液）進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑（乙腈或甲醇）的比例。 2）三倍規則：每減少10％的有機溶劑（甲醇或乙腈）的量，保留因子約增加３倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中