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二、蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化方法很多，主要有：（一）根據蛋白質溶解度不同的分離方法1、蛋白質的鹽析中性鹽對蛋白質的溶解度有顯著影響，一般在低鹽濃度下隨著鹽濃度升高，蛋白質的溶解度增加，此稱鹽溶；當鹽濃度繼續升高時，蛋白質的溶解度不同程度下降并先后析出，這種現象稱鹽析，將大量鹽加到蛋白質溶液中，高濃度的鹽離子（如硫酸銨的SO4和NH4)有很強的水化力，可奪取蛋白質分子的水化層，使之“失水”，于是蛋白質膠粒凝結并沉淀析出。鹽析時若溶液pH在蛋白質等電點則效果更好。由于各種蛋白質分子顆粒大小、親水程度不同，故鹽析所需的鹽濃度也不一樣，因此調節混合蛋白質溶液中的中性鹽濃度可使各種蛋白質分段沉淀。影響鹽析的因素有：（1）溫度：除對溫度敏感的蛋白質在低溫（4度）操作外，一般可在室溫中進行。一般溫度低蛋白質溶介度降低。但有的蛋白質（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時溶解度低，更容易鹽析。（2）pH值：大多數蛋......閱讀全文
蛋白濃縮方法基本有：丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法…… 1.丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉淀法：得有特異性抗體！ 3.硫酸銨沉淀法
蛋白濃縮方法基本有： 丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法…… 1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。 2，免疫沉淀法：得有特異性抗體
藥物血漿蛋白結合率（Plasma Protein Binding, PPB）即血液中與蛋白結合的藥物占總藥量的百分數，可以反映藥物與血漿蛋白結合的程度。藥物血漿蛋白結合率是藥物在動物體內重要的藥理學參數之一，影響著藥物體內游離濃度進而影響藥物的分布與排泄。藥物在進入血液后與血漿蛋白會有不同程度結合，
藥物血漿蛋白結合率（plasma protein binding, PPB）是藥物在動物體內重要的藥理學參數之一，影響著藥物體內游離濃度進而影響藥物的處置過程。藥物在進入血液后與血漿蛋白會有不同程度結合，血液中游離藥物的比例會影響其在體內吸收、分布、代謝和排泄的過程，與血漿蛋白結合的藥物可能會有更長
藥物在血漿中會不同程度地與血漿蛋白結合，其結合的程度能夠影響藥物的體內的吸收、分布、代謝和排泄，進而會影響藥物的藥效學行為。一般來說，藥物在吸收進入血液之后，僅游離的藥物能夠到達作用部位，產生藥理學活性。平衡透析法是基于藥物結合的平衡原理來測定藥物游離濃度最常用的方法，也是研究藥物血漿蛋白結合率的經
摘要：提取液的濃縮作為食品檢驗實驗的重要內容，它能有效地反映出一個人的實驗操作水平。但是常見的提取液濃縮方法存在耗時長、所能濃縮的提取液量少、浪費實驗試劑等缺點，因此，對提取液濃縮方法進行改進就顯得非常有意義。本文在分析幾種常見提取液濃縮方法優缺點的基礎上，對樣品提取液濃縮方法進行了改進。希望本
藥物在血漿中會不同程度地與血漿蛋白結合，其結合的程度能夠影響藥物的體內的吸收、分布、代謝和排泄，進而會影響藥物的藥效學行為。一般來說，藥物在吸收進入血液之后，僅游離的藥物能夠到達作用部位，產生藥理學活性。平衡透析法是基于藥物結合的平衡原理來測定藥物游離濃度最常用的方法，也是研究藥物血漿蛋白結合率的經
15種蛋白質單晶培養的方法：（1）大量養晶法（bulk crystallization）：若急著養出單晶，則將純化之蛋白質溶液加入固體鹽類或飽和鹽液，直到溶液中出現乳白混濁色，離心后把上清液（suppernatant）放置數天至數周，有可能養出單晶。（2）批次養晶法（batch method）:
15種蛋白質單晶培養的方法：（1）大量養晶法（bulk crystallization）：若急著養出單晶，則將純化之蛋白質溶液加入固體鹽類或飽和鹽液，直到溶液中出現乳白混濁色，離心后把上清液（suppernatant）放置數天至數周，有可能養出單晶。（2）批次養晶法（batch method）:
15種蛋白質單晶培養的方法：（1）大量養晶法（bulk crystallization）：若急著養出單晶，則將純化之蛋白質溶液加入固體鹽類或飽和鹽液，直到溶液中出現乳白混濁色，離心后把上清液（suppernatant）放置數天至數周，有可能養出單晶。（2）批次養晶法（batch method）:若發
1 ． HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 樣品量不足：解決辦法為增加樣品量 樣品未從柱子中流出：可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子 樣品與檢測器不匹配：根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器 檢測器衰減太多：調整衰減即可。 檢測器時間常數太大：解決
蛋白質的濃縮有很多方法。大致有超濾法，沉淀法和透析法。超濾比較溫和，對蛋白質不會有修飾和改變，蛋白的種類一般不會有丟失。它的缺點是總樣品的量可能會減少（被膜所吸附）。另外超濾對樣品的要求比較高。甘油，去垢劑都會堵塞濾膜，影響超濾的效果。沉淀法比較快速，容易操作，對鹽，甘油，去垢劑的耐受性好。缺點是可
常見問題——— HPLC 篇 1 ． HPLC 靈敏度不夠的主要原因及解決辦法 樣品量不足：解決辦法為增加樣品量 樣品未從柱子中流出：可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子 樣品與檢測器不匹配：根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器 檢測器衰減
ISO-DALT 方法 IPG-DALT 方法 實驗方法原理 雙向電泳（two-dime
雙向電泳操作步驟 第一向凝膠 第二向凝膠 組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備 實驗方法原理
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒ddH2O溴酚藍指示劑
實驗方法原理雙向電泳（two-dimensional electrophoresis）是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳（按照pI分離），然后再進行SDS-PAGE（按照分子大小），經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。實驗材料蛋白質樣品試劑、試劑盒尿素去污劑儀器、耗材
透射電子顯微鏡法（TEM法） 透射電子顯微鏡法是粒子粒徑分析最常用的方法之一，透射電子顯微鏡可觀察和表征納米粒子的形貌和測定粒徑大小。測定時，將納米粒子制成懸浮液并滴在帶碳支持膜的銅網上，待載液如乙醇揮發后，放入樣品臺。每種納米粒子分別選有代表性的A、B和C三組納米群拍攝高倍電鏡像，每張照
丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法……1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。2，免疫沉淀法：得有特異性抗體！3，硫酸銨沉淀法：利用高濃度鹽將蛋白質析出（鹽析）選擇
蛋白濃縮方法基本有： 丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸銨沉淀法；（低溫）有機溶劑沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超濾法；透析法；離子交換層析和冷凍干燥法…… 1，丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 試驗要求的儀器簡單，但是常常導致蛋白質變性。 2，免疫沉淀法：得有
分子生物學實驗中，常常需要從瓊脂糖凝膠或聚丙酰胺凝膠中回收DNA，進行純化、探針標記或進一步擴增等。鑒于PCR反應具有高度敏感性，微量模板即可擴增出陽性產物。我們從瓊脂糖凝膠中直接回收DNA進行PCR，取得較滿意的結果，報道如下。 1 材料和方法 1.1 試劑 Taq DNA
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結合15～20個，一個IgG分子可結合2～8個分子的FITC，其反應式如下FI
樣品前處理對于藥品分析的成功起著至關重要的作用，近年來科學技術的不斷發展也使一些實用、高效、環保、新型的技術開始廣泛應用于藥物分析領域，本文將側重介紹中藥分析中樣品前處理的新技術。 傳統的中藥提取方法主要有蒸餾法和溶劑萃取法。蒸餾法包括常壓蒸餾、分餾、水蒸氣蒸餾、真空蒸餾、抽提蒸餾等。水蒸
中藥主要來源于天然藥及其加工品，包括植物藥、動物藥、礦物藥及部分化學、生物制品類藥物。 中藥提取方法主要有蒸餾法和溶劑萃取法。蒸餾法包括常壓蒸餾、分餾、水蒸氣蒸餾、真空蒸餾、抽提蒸餾等。水蒸氣蒸餾法又可分為共水蒸餾法、通水蒸氣蒸餾法、水上蒸餾法等。溶劑萃取法是較為有效、應用廣泛的經典方法之一，
FITC熒光素標記抗體的操作步驟 www.runwelltac.com當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的
以蛋白質和結構與功能為基礎，從分子水平上認識生命現象，已經成為現代生物學發展的主要方向，研究蛋白質，首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質。蛋白質的制備工作涉及物理、化學和生物等各方面知識，但基本原理不外乎兩方面。一是得用混合物中幾個組分分配率的差別，把它們分配到可用機械方法分離的兩個或幾個
確定沉淀蛋白質所需硫酸銨濃度的方法將少量樣品冷卻到0～5℃，然后攪拌加入固體硫酸銨粉末，見蛋白質產生沉淀時，離心除去沉淀，分析上清液確定所要蛋白質的濃度，如它仍在溶液中則棄去沉淀，再加更多的硫酸銨于上清液中，直到產生蛋白質沉淀時止。以所要提取的蛋白質在溶液中的濃度對硫酸銨濃度作圖，得沉淀曲線，找出蛋
當FITC在堿性溶液中與抗體蛋白反應時，主要是蛋白質上賴氨酸的r氨基與熒光素的硫碳胺鍵（thiocarbmide）結合，形成FITC-蛋白質結合物，即熒光抗體或熒光結合物。一個IgG分子中有86個賴氨酸殘基，一般zui多能結合15～20個，一個IgG分子可結合2～8個分子的FITC，其反應式如下：F
透析法 實驗方法原理 透析法主要用于更換蛋白質的緩沖溶液，如果在真空或吸濕環境中也可作為濃縮蛋白質
一、熒光素與抗體結合 1、透析法 （1）概述：適用于蛋白質含量低、樣品體積小的抗體溶液的標記。標記較均勻，非特異熒光較低。 （2）步驟：將含10mg/ml的Ig溶液10ml裝入透析袋，將上述透析袋放入燒杯中，含0.1mg/ml FITC的pH9.4的碳酸鹽緩沖液100m