酶聯免疫吸附法檢測黃曲霉的介紹
1996年,nakane 建立了辣根過氧化物酶標記抗體的測定技術.由于該方法簡便,敏感,特異,可作為多種抗原或抗體的測定,20世紀70年代后期,該方法引入真菌毒素的檢測中,下面介紹的是競爭性酶聯免疫吸附間接法檢測黃曲霉毒素b1. 原理:將已知抗原吸附在固態載體表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品(含有抗原)提取液的混合液,競爭培養后,在固相載體表面形成抗原抗體復合物.洗除多余抗體成分,然后加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結合物,與吸附在固體表面的抗原抗體結合物相結合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物發生降解反應,產生有色物質,通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量,從而推知被測樣品中的抗原量.......閱讀全文
酶聯免疫吸附法檢測黃曲霉的介紹
1996年,nakane 建立了辣根過氧化物酶標記抗體的測定技術.由于該方法簡便,敏感,特異,可作為多種抗原或抗體的測定,20世紀70年代后期,該方法引入真菌毒素的檢測中,下面介紹的是競爭性酶聯免疫吸附間接法檢測黃曲霉毒素b1. 原理:將已知抗原吸附在固態載體表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗
黃曲霉毒素的酶聯免疫吸附法檢測
酶聯免疫吸附法(ELISA)是抗原(或抗體)吸附劑和用酶標記的抗體(或抗原)與標本中的待測物(抗原和抗體)起特異的免疫學反應,用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度,是一種定性或半定量的方法。大致采用兩種方法檢測AF:一種是用雙抗體夾心法;另一種是用競爭法。免疫吸附法測定的試劑盒及配套儀器、方法被
檢測黃曲霉毒素M1的酶聯免疫吸附法原理介紹
該方法結合了抗原抗體的特異性免疫反應和酶的高效催化顯色反應。首先將抗AFM1抗體包被于固相的聚乙烯微孔上,加入作為抗原的AFM1標準品或含AFM1的樣品,同時加入AFM1酶結合物,與抗體進行免疫競爭反應,然后加入酶基質:顯色劑進行顯色,通過標準品孔、樣品孔的顏色深淺來確定樣品中AFM1的含量。
關于黃曲霉毒素M1酶聯免疫吸附法檢測分析步驟介紹
(1)樣品處理 牛奶樣品:將50ml含脂牛奶降溫至10℃以下,3500r/min離心10min,用吸管吸棄上層脂肪層,取下層牛奶液 作為待測液。奶粉樣品:稱取5g奶粉于100ml三角瓶中,加入50ml蒸餾水振搖5~10min混勻,以下步驟同上述牛奶樣品處理方法。 (2)試劑準備 抗體:將小
TLC法檢測黃曲霉的方法介紹
TLC法是檢測黃曲霉素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃曲霉素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化后,再在薄板上展開后分離。利用黃曲霉素的熒光特性,根據熒光斑點的強弱與標準比較確定其含量,對于一些組分很復雜的試樣
微柱篩選法檢測黃曲霉的介紹
原理 樣品提取液中的黃曲霉毒素被微柱管風硅鎂型吸附層吸附后,在波長365nm紫外光燈下顯示藍紫色熒光環,其熒光強度與黃曲霉毒素在一定的光密度范圍內成正比例關系.若硅鎂型吸附劑層未出現藍紫色熒光,則樣品為陰性(方法靈敏度為5-10ug/kg).由于在微柱上不能分離黃曲霉毒素b1,b2,g1,g2,
金標試紙法檢測黃曲霉的方法介紹
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲霉素。該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
薄層分析法檢測黃曲霉毒素的介紹
TLC法是檢測黃曲霉素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃曲霉素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化后,再在薄板上展開后分離。利用黃曲霉素的熒光特性,根據熒光斑點的強弱與標準比較確定其含量,對于一些組分很復雜的
酶聯免疫法(ELISA)檢測黃曲霉的方法介紹
ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。
液相色譜法(HPLC)檢測黃曲霉的方法介紹
HPLC法是近年來發展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱后衍生系統分離,再用熒光檢測器測定。與其配套的柱后衍生系統有碘衍生化法、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來凈化、分離,其凈化效果優異。該法能準確地分離不同種類的黃曲霉素(例如:
生物傳感器法檢測黃曲霉的方法介紹
生物傳感器是使用固定化技術將具有分子識別能力的生物活性物質與物理化學換能器結合,可以用來探測生物體內外的環境化學物質或與之起特異性交互作用后產生響應的一種裝置。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物傳感器為免疫傳感器口。
金標試紙法檢測黃曲霉毒素的方法介紹
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲霉素。該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
酶聯免疫吸附法檢測瘦肉精
摘要:介紹了競爭酶聯免疫吸附法測定豬肉中的鹽酸克倫特羅的方法。利用鹽酸克倫特羅試劑盒,對豬肉組織中殘留的鹽酸克倫特羅經抽提、競爭后,用酶標儀進行檢測分析。此法較適用于現場檢驗,檢測速度快、靈敏度高,是保證肉品衛生安全的較好監控方法。 酶聯免疫吸附法是目前最佳的檢測方法。ELISA 檢測
酶聯免疫吸附法檢測瘦肉精
酶聯免疫吸附法是目前最佳的檢測方法。ELISA 檢測方法有雙抗體夾心法測抗原、間接法測抗體、競爭法測抗體等。該文是利用酶聯免疫吸附法中的競爭法測抗體,其原理是利用多克隆抗體既能與鹽酸克倫特羅結合,也能與包被抗原結合。這些包被抗原被固定在酶標板孔壁上,當樣品中含有瘦肉精時,它與包被抗原競爭結
毛細管電泳法(CE)檢測黃曲霉的方法介紹
毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃曲霉素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了較為理想的分離效果,其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高,操作復雜,不適宜在試樣檢測中廣
熒光光度法(IAC/SFB)檢測黃曲霉的方法介紹
IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃曲霉素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃曲霉素的含量。該方法對檢測人員身體健康無危害,檢測速度迅速,靈敏度高,適用于大量試樣檢測,且定量準確,但檢測費用較高,需要配置專用設備,且不能對單一的毒素進行檢測。
酶聯免疫法檢測黃曲霉毒素B1的介紹
酶聯免疫法檢測AFB1的理論基礎是抗原抗體反應,其采用單克隆或多克隆抗體技術,具有特異性強、分析時間短等優點。其原理是抗原(或抗體)吸附于載體上的免疫吸附劑和用酶標抗體(或抗原)與標本中的待測物(抗原或抗體)起特異的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類:一是用雙抗體
液相色譜法檢測黃曲霉毒素B1的介紹
高效液相色譜法對黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2分別進行定量分析。其主要是用熒光檢測器檢測,在適宜的流動相條件下,采用反相C18柱,使多種黃曲霉毒素同時分離。 [3] 黃曲霉毒素免疫親和柱HPLC法采用單克隆抗體免疫技術,可以特效地將黃曲霉毒素與其他真菌素分離出來,分離效率和回收率高。此方法已得
薄層色譜法檢測黃曲霉毒素B1的介紹
TLC法是測定黃曲霉毒素的經典方法,是中國測定食品及飼料中AFT黃曲霉素B1(AFB1)的標準方法之一(GB/T5009.23-2006)。其原理是針對不同的樣品,用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來,經溶劑萃取純化,再在薄層板上層析展開,分離,利用AFB1的熒光特性,根據熒光斑點的大小和
薄層分析法檢測黃曲霉毒素
TLC法是檢測黃曲霉素最為經典的方法,也是以前最為常用的方法,至今仍為一些檢測機構所用,也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,用適宜的萃取溶劑將黃曲霉素從試樣中萃取出來,經柱層析凈化后,再在薄板上展開后分離。利用黃曲霉素的熒光特性,根據熒光斑點的強弱與標準比較確定其含量,對于一些組分很復雜的
酶聯免疫法檢測黃曲霉毒素
ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。 該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理
黃曲霉毒素高效液相色譜法檢測
HPLC具有高分辨率,分析時間較短等優點。它的原理是樣品溶液中欲分離的幾種化合物在流動相和固定相之間有不同的分配量,從而達到分離的目的。AF經柱后電化學衍生化后,能發射特征性熒光,被熒光檢測器捕獲后而得到檢測,最后經化學工作站處理數據。這一檢測方法,將化學分析試驗與領先的計算機技術結合,使自動化
黃曲霉毒素檢測方法金標試紙法
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲霉素。該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
酶聯免疫吸附法檢測HBV抗HBc假陽性的探討
【摘要】? 目的 鑒別并糾正酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測乙型肝炎抗-HBc過程中出現的假陽性結果。方法 在乙型肝炎“兩對半”臨床檢測標本中隨即挑選抗-HBc陽性的標本310份,根據“兩對半”檢測結果的不同模式分為三組:A組HBs-Ag(+)、抗-HBs(-)、HBeAg或抗-HBe(+)、抗-H
普洱茶為何檢出黃曲霉?云南科研機構發聲
廣州市疾病預防控制中心研究人員抽查廣州市場上普洱茶樣品100%檢測出黃曲霉素?同樣是云南農業大學,為何有學者發表論文稱100%檢出黃曲霉,也有學者沒有檢出任何黃曲霉?昨日上午,云南農業大學普洱茶學教育部重點實驗室、云南省食品安全管理學院、云南省生物大數據重點實驗室共同召開新聞發布會稱,此前一些
檢測黃曲霉毒素M1的免疫親和柱法原理介紹
試樣經過離心、脫脂、過濾后,濾液經過鍵合有AFM1特異性單克隆抗體的免疫親和柱凈化,AFM1被柱吸附,先用某一溶劑洗滌雜質,再用洗脫液將AFM1洗下,得到較純的AFM1洗脫液,最后結合熒光光度計或高效液相色譜儀進行AFM1含量的測定。
關于黃曲霉毒素M1的薄層色譜法檢測原理介紹
樣品經提取、濃縮、薄層分離后,AFM1在波長365nm的紫外光下產生藍紫色熒光,根據其在薄層板上顯示熒光的最低檢出量與標準溶液的熒光強度相比較來測定含量。
酶聯免疫吸附測定黃曲霉毒素B1
(1)分析原理??將已知抗原吸附在固態載體表面,洗除未吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品(含有抗原)提取液的混合液,競爭培養后,在固相載體表面形成抗原抗體復合物。洗除多余抗體成分,然后加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結合物,與吸附在固體表面的抗原抗體復合物相結合,再加入酶的底物。在酶的催化作用下,底物
酶標儀檢測黃曲霉素的方法介紹
酶聯免疫法(ELISA) ELISA法也是近年來研究開發出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。 該方法檢測速度快、對人體危害小、但重復性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽
檢測黃曲霉素的方法之金標試紙法
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲霉素。該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。