分泌蛋白(secretedprotein)是指酶(主要由附著型核糖體合成)、抗體、部分激素(例如:蛋白質類激素)等在細胞內合成后,分泌到細胞外起作用的蛋白質。在核糖體上合成的分泌蛋白,要經過內質網和高爾基體,而不是直接運輸到細胞膜。進一步的研究表明,在核糖體上翻譯出的蛋白質,進入內質網腔后,還要經過一些加工,如折疊、組裝、加上一些糖基團等,才能成為比較成熟的蛋白質。然后,由內質網腔膨大、出芽形成具膜的小泡,包裹著蛋白質轉移到高爾基體,把蛋白質輸送到高爾基體腔內,做進一步的加工。接著,高爾基體邊緣突起形成小泡,把蛋白質包裹在小泡里,運輸到細胞膜,小泡與細胞膜融合,把蛋白質釋放到細胞外。高中常見的分泌蛋白有胰腺細胞分泌胰島素、胰高血糖素等,還有抗體、各種促激素等......閱讀全文
非經典分泌途徑在細菌中普遍存在,能夠分泌不具有典型信號肽的蛋白。枯草芽孢桿菌利用非經典分泌途徑可分泌多種細胞質蛋白,但其分泌機制知之甚少。目前在非經典分泌途徑研究中有多個公認的熱點問題:非經典蛋白分泌的通道挖掘;非經典蛋白分泌的選擇機制,非經典蛋白如何定位,非經典蛋白分泌對菌株具有怎樣的生理意義
非經典分泌途徑在細菌中普遍存在,能夠分泌不具有典型信號肽的蛋白。枯草芽孢桿菌利用非經典分泌途徑可分泌多種細胞質蛋白,但其分泌機制知之甚少。目前在非經典分泌途徑研究中有多個公認的熱點問題:非經典蛋白分泌的通道挖掘;非經典蛋白分泌的選擇機制,非經典蛋白如何定位,非經典蛋白分泌對菌株具有怎樣的生理意義等。
非經典分泌途徑在細菌中普遍存在,能夠分泌不具有典型信號肽的蛋白。枯草芽孢桿菌利用非經典分泌途徑可分泌多種細胞質蛋白,但其分泌機制知之甚少。目前在非經典分泌途徑研究中有多個公認的熱點問題:非經典蛋白分泌的通道挖掘;非經典蛋白分泌的選擇機制,非經典蛋白如何定位,非經典蛋白分泌對菌株具有怎樣的生理意義
脫發是目前非常難于有效治愈的一種流行病,近期研究結果證實真皮乳頭細胞早期分泌蛋白可以誘導毛發的產生。小編今天來給大家分享一篇通過蛋白質組學研究的手段尋找誘導毛發重生的關鍵細胞分泌蛋白的文章。 iTRAQ-Based Quantitative Proteomic Comparisonof E
蛋白質組學應用于誘導毛發重生的關鍵細胞分泌蛋白的鑒定思路脫發是目前非常難于有效治愈的一種流行病,近期研究結果證實真皮乳頭細胞早期分泌蛋白可以誘導毛發的產生。小編今天來給大家分享一篇通過蛋白質組學研究的手段尋找誘導毛發重生的關鍵細胞分泌蛋白的文章。iTRAQ-Based Quantitative
在擁擠喧嘩的酒吧中很難好好聊天,所以大家都選擇在安靜的小咖啡館里促膝長談。不過科學家們現在可以在復雜的細胞培養環境中,選擇性傾聽細胞間的“對話”。 細胞通過分泌蛋白來相互交流并對環境改變進行應答,分泌蛋白還能幫助細胞遷移。位于德國海德堡的著名歐洲分子生物學實驗室EMBL與德國癌癥研
在擁擠喧嘩的酒吧中很難好好聊天,所以大家都選擇在安靜的小咖啡館里促膝長談。不過科學家們現在可以在復雜的細胞培養環境中,選擇性傾聽細胞間的“對話”。 細胞通過分泌蛋白來相互交流并對環境改變進行應答,分泌蛋白還能幫助細胞遷移。位于德國海德堡的著名歐洲分子生物學實驗室EMBL與德國癌癥研究中心DK
大麗輪枝菌是一種土傳病原真菌,通過形成附著枝感染植物根部,在世界范圍內引起嚴重的黃萎病害,對我國棉花生產造成巨大的經濟損失。和其他病原微生物一樣,大麗輪枝菌的重要致病策略之一是分泌效應蛋白到植物細胞,干擾植物免疫反應;但其分泌結構和分泌轉運機制亟待探究。 中國科學院微生物研究所研究員郭惠珊課題
大麗輪枝菌是一種土傳病原真菌,通過形成附著枝感染植物根部,在世界范圍內引起嚴重的黃萎病害,對我國棉花生產造成巨大的經濟損失。和其他病原微生物一樣,大麗輪枝菌的重要致病策略之一是分泌效應蛋白到植物細胞,干擾植物免疫反應;但其分泌結構和分泌轉運機制亟待探究。 中國科學院微生物研究所研究員郭惠珊課題
2018年12月31日和2019年1月10日,西湖大學校長、清華大學生命學院、結構生物學高精尖創新中心施一公教授領導的研究團隊分別于《自然》和《科學》發表兩篇長文:《人源γ-分泌酶識別底物Notch的結構機制》、《人源γ-分泌酶底物淀粉樣前體蛋白的識別》,報道了人體γ-分泌酶分別結合底物Notc
1 甲醇酵母表達系統的特點 1.1 宿主 七十年代巴斯德畢赤酵母曾被用于生產單細胞蛋白(SCP),有很好的發酵基礎,菌體密度可達100g/L干重。其生長培養液的組分包括無機鹽、微量元素、生物素、氮源和碳源,廉價而無毒。它能在以甲醇為唯一碳源的培養基中快速生長,其中醇氧化酶AOX——甲醇代謝途徑
通過外源DNA的重組、克隆、以及鑒定,可以獲得所需的特異DNA克隆。外源克隆基因在某種表達載體及適宜的宿主細胞中可表達為相應的蛋白質,這就組成了外源基因的蛋白表達系統。表達后的蛋白質必須具有原來的生物學活性,這是基于正確的基因轉錄、轉錄后加工、mRNA翻譯及翻譯后修飾,同時與表達載體的結構和表達體系
近日,來自哈佛醫學院、麻省總醫院(MGH)的研究人員在《細胞》旗下的Cell Reports上發表了一篇與阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease)有關的研究,揭開了困擾多年的謎團:影響阿爾茨海默病的關鍵蛋白——β淀粉樣蛋白(Aβ,amyloid beta),到底是如何在大腦神經元的
重組蛋白是研究生物學過程的重要工具。需要使用表達系統來對其進行制備。合適表達系統的選擇取決于重組蛋白的特性、重組蛋白的預期應用以及該系統能否生產足夠量的蛋白質。作者: 伯吉斯等,主譯:陳薇,本實驗來自「蛋白質純化指南」實驗步驟一、引言選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及
2、表達框的染色體整合位點和方式雖然相對于自主復制載體來講,整合性載體的轉化率較低,但由于Pp沒有天然質粒,所以設計表達載體偏向于染色體整合,通過同源重組,載體整合到細胞染色體中間。整合性載體具有表達框穩定和可控制整合位點等優越性,并且能夠發生多位點整合而獲得多拷貝。AOX1和組氨酸脫氫酶(hist
實驗步驟 一、引言 選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及 時 獲 取 所 需 數 量 和 質 量 的 重z組蛋白非常關鍵。選 擇 了 錯 誤 的表達宿主可 能 導 致 蛋 白 質錯 誤 折 疊 或
中科院武漢病毒研究所陳士云研究員領導的病原細菌學科組在耶爾森氏菌三型分泌系統主調控蛋白LcrQ分泌機制研究中取得重要進展,相關結果近期發表在國際微生物學刊物Molecular Microbiology。 三型分泌系統(Type III secretion system,T3SS)是革蘭氏陰性
蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系,通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。 1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性
蛋白表達是指用模式生物如細菌、酵母、動物細胞或者植物細胞表達外源基因蛋白的一種分子生物學技術。蛋白表達系統是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系,通過這個體系可以實現外源基因在宿主中表達的目的。1、宿主。表達蛋白的生物體。可以為細菌、酵母、植物細胞、動物細胞等。由于各種生物的特性不同,適合表
大腸桿菌表達系統最突出的優點是工藝簡單、產量高、周期短、生產成本低。然而,許多蛋白質在翻譯后,需經過翻譯后的修飾加工,如磷酸化、糖基化、酰胺化及蛋白酶水解等過程才能轉化成活性形式。大腸桿菌缺少上述加工機制,不適合用于表達結構復雜的蛋白質。另外,蛋白質的活性還依賴于形成正確的二硫鍵并折疊成高級結構,在
2016年日本科學家大隅良典(Yoshinori Ohsumi)獨獲諾貝爾生理或醫學獎,獲獎理由是在細胞自噬(autophagy)領域所做出的杰出貢獻。自從細胞自噬(該概念并非大隅良典首創)這一概念被提出以后,至今已經有將近40000篇文章與其有關。 細胞自噬,是細胞內容物(Cargo)被運輸
2、選擇標記選擇標記一般為對應于營養缺陷型受體的野生型基因,常用HIs4。由于P.Pasotris不利用蔗糖,所以也可用啤酒酵母的蔗糖酶基因suC2作為標記。AMP:氨芐抗性基因,可在大腸 桿菌中篩選。G418和Zeocinr(Invitrogen,sandiego,CA)也是篩選標記,使得到高
2.包涵體的分離與純化細胞破碎時提取細胞內產物的關鍵。對于細菌的裂解常用的有酶溶法、超聲破碎法、化學滲透法、玻璃珠研磨等。包涵體可通過超聲波、勻漿等常規的方法是菌體破碎后,離心就可得到。密度梯度離心后可得到高純度的包涵體。包涵體一般不溶于水,為了獲得可溶性的蛋白質可加入強蛋白質變性劑后使其溶解。一般
阿爾茨海默病(AD)的標志是AD患者腦中存在淀粉樣蛋白斑。淀粉樣斑塊的主要成分是源自淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)的β-淀粉樣肽(Aβ)。I型跨膜蛋白APP首先被α-或β-分泌酶切割,分別產生83或99個殘基的跨膜片段(APP-C83或APP-C99)。然后APP-C99通過其內肽酶活性被γ-分泌酶切
蛋白質組(Proteome)的概念最先由Marc Wilkins提出,指由一個基因組,或一個細胞、組織表達的所有蛋白質。 蛋白質組的概念與基因組的概念有許多差別,它隨著組織、甚至環境狀態的不同而改變。 在轉錄時,一個基因可以多種mRNA形式剪接,一個蛋白質組不是一個基因組的直接產物,蛋白質組中蛋
弗吉尼亞聯邦大學梅西癌癥研究中心科學家發現兩個基因的相關作用能夠殺死多種癌細胞。Paul B. Fisher博士領導的研究團隊發現mda-7/IL-24 和 SARI有望能夠用來治療多種癌癥,如腦癌,乳腺癌,結腸癌,卵巢癌,前列腺癌,皮膚癌等等。相關報道發表在近期的Cancer Rese
瘧原蟲入侵紅細胞之后,會利用宿主細胞的膜為自己建立一個保護性隔間。這種寄生蟲需要劫持紅細胞以獲得營養并排出廢物。為此,它們啟動了一系列程序最終將紅細胞轉變為自己的安樂窩。 華盛頓大學的一項新研究表明,負責上述任務的蛋白必須跨越小隔間上的一個孔道才能進入紅細胞。科學家們在體外培養的細胞中阻斷了這
鮭魚堿性成纖維細胞生長因子(bFGF) ELISA試劑盒檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。
水貂γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒固體樣本的收集 步驟1、組織標本:切割標本后,稱取 1g 組織,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清。分裝一 份待檢測,其余冷凍備用,保存
裸鼠白細胞介素-6(IL-6)ELISA試劑盒檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺