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    核酸分離與純化的設計與原則(二)

    (四)核酸的濃縮、沉淀與洗滌隨著核酸提取試劑的逐步加入,以及去除污染物過程中核酸分子不可避免的丟失,樣品中核酸的濃度會逐漸下降,及至影響到后面的實驗操作或不能滿足后繼研究與應用的需要時,需要對核酸進行濃縮。沉淀是核酸濃縮最常用的方法,其優點在于核酸沉淀后,可以很容易地改變溶解緩沖液和調整核酸溶液至所需濃度;另外,核酸沉淀還能去除部分雜質與某些鹽離子,有一定的純化作用。加入一定濃度的鹽類后,用有機溶劑沉淀核酸。其中常用的鹽類有醋酸鈉、醋酸鉀、醋酸銨、氯化鈉、氯化鉀及氯化鎂等,常用的有機溶劑則有乙醇、異丙醇和聚乙二醇。核酸沉淀往往含有少量共沉淀的鹽,需用70%~75%的乙醇洗滌去除。對于濃度低并且體積較大的核酸樣品,可在有機溶劑沉淀前,采用固體的聚乙二醇或丁醇對其進行濃縮處理。三、鑒定、保存與應用(一)核酸的鑒定1.濃度鑒定 核酸濃度的定量鑒定可通過紫外分光光度法與熒光光度法進行。(1)紫外分光光度法:紫外分光......閱讀全文

    核酸分離與純化的設計與原則(二)

    (四)核酸的濃縮、沉淀與洗滌隨著核酸提取試劑的逐步加入,以及去除污染物過程中核酸分子不可避免的丟失,樣品中核酸的濃度會逐漸下降,及至影響到后面的實驗操作或不能滿足后繼研究與應用的需要時,需要對核酸進行濃縮。沉淀是核酸濃縮最常用的方法,其優點在于核酸沉淀后,可以很容易地改變溶解緩沖液和調整核酸溶液至所

    核酸分離與純化的設計與原則

    細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質結合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA

    核酸分離與純化的設計與原則

    細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質結合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)。其中真核生物的DNA又有染色體DNA

    核酸分離與純化的設計與原則(一)

    第一節????????核酸分離與純化的設計與原則細胞內的核酸包括DNA與RNA兩種分子,均與蛋白質結合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA與蛋白質結合成脫氧核糖核蛋白(deoxyribonucleoprotein,DNP),RNA與蛋白質結合成核糖核蛋白(ribonucleoprotein

    核酸分離與純化的原則、步驟

      磁珠提核酸   磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟、磁珠法純化DNA原理。   核酸分離與純化的原則   核酸在細胞中總是與各種蛋白質結合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與

    核酸的分離與純化

    從細胞中提取核酸后,仍混雜著蛋白質、多糖和各種大小分子核酸同類物。除去這些“雜質”的過程,也就是核酸提純過程。在核酸的分離純化時,為防止核酸大分子的變性降解,必須在0~4℃的低溫條件下操作。核酸酶的水解作用,是過去制備具有活性核酸大分子的嚴重障礙,現普遍采用加入去污劑或加入EDTA、8-羥基喹啉、檸

    核酸分離與純化的原則、步驟、磁珠法純化DNA原理

    磁珠提核酸磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟、磁珠法純化DNA原理。核酸分離與純化的原則核酸在細胞中總是與各種蛋白質結合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與蛋白質、多糖、脂肪等生物大分

    簡述核酸分離純化的原則

      (一)材料與方法的選擇  臨床常見的標本有血液,尿液,唾液,組織及培養細胞等;核酸分離與純化的方法非常多,如何恰當地收集與準備材料,選擇適宜的分離與純化方法是一個首要的問題。首先我們應當明確核酸的分離與純化并不是最終的目的,不同的實驗研究與應用對核酸的產量,完整性,純度和濃度可能有不同的要求;至

    分離純化核酸的基本原則

    堿的作用時間不能太長 作用過久的話容易使DNA斷裂 其他 就是提取核酸的速度要快,不能磨洋工 動作該輕柔的步驟一定要輕柔(如堿作用過程的混勻過程)

    分離純化核酸的基本原則

    堿的作用時間不能太長 作用過久的話容易使DNA斷裂 其他 就是提取核酸的速度要快,不能磨洋工 動作該輕柔的步驟一定要輕柔(如堿作用過程的混勻過程)

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