TRIzolRNA提取試劑盒操作說明
TRIzol RNA提取試劑盒是由GIBCO BRL公司推出專供提取RNA的產品,其操作方便、快捷。 在TRIzol中,RNA是隔離在RNA酶污染之外的。而對樣品的后續操作會要求用無RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C 的烘箱中烘烤4小時。塑料器皿可以在0.5 M NaOH 中浸泡10 分鐘,用水徹底漂洗干凈后高壓滅菌備用。(一)試劑準備1.TRIzol試劑。 2.氯仿 3.異丙醇 4.75%乙醇(DEPC H2O配制) 5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理: (1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。 (2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-70℃及液氮中保存的組織均可)置1.5ml離心管中,加入1ml Trizol充分勻漿,室溫靜置5min。 2.加入0.2ml氯仿,振蕩15s,......閱讀全文
TRIzol RNA提取試劑盒操作說明
TRIzol RNA提取試劑盒是由GIBCO BRL公司推出專供提取RNA的產品,其操作方便、快捷。 在TRIzol中,RNA是隔離在RNA酶污染之外的。而對樣品的后續操作會要求用無RNA 酶的非一次性的玻璃器皿或塑料器皿。玻璃器皿可以在150°C 的烘箱中烘烤4小時。塑料器皿可以在0.
總RNA提取(Trizol提取)
在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA 制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA 時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase 的作用。1. 提取組織RNA 時,每50~100mg 組織用1ml
TRIzol RNA提取方法
研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作簡單的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的質量高,對cDNA庫,RT-PCR和Northern?Blot等分子生物學實驗起著很重要的影響。實驗方法原理Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采
TRIzol RNA提取方法
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構
TRIzol RNA提取方法
(一)試劑準備1.TRIzol試劑。2.氯仿3.異丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理:(1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。(2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-
總RNA提取試劑(Trizol法)使用說明
『用途與特點』1.? ? 本試劑盒可用于幾乎所有新鮮或液氮保存的動物和植物組織、昆蟲和細胞RNA的快速提取,通用性好。2.? ? 無須DNA酶、RNA酶抑制劑等。3.? ? 所需樣品量少,并且可根據起始材料的多少自行調整。4.? ? 操作簡便,整個過程
總RNA的提取(Trizol法提取)
在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase的作用。1.????? 提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml
TRIZOL提取RNA的詳細步驟
1、在提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml Trizol試劑對組織進行裂解;提取細胞RNA時,先離心沉淀細胞,每5-10╳106個細胞加1ml Trizol后,反復用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞。2、將組織或細胞的Trizol裂解液轉入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘;在EP管中,
動物RNA提取實驗——Trizol試劑提取法
實驗方法原理Trizol試劑是一個包含酚、異硫氰酸胍和SDS的單相酸性溶液,其在裂解細胞的同時抑制RNase的活性,隨后加入氯仿,酚會大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下層的氯仿酚溶液中,RNA則分布在上層的水相中,最后用異丙醇沉淀水相中的RNA,并用70
Trizol法提取總RNA的原理
Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對細胞進行裂解,從而使細胞當中的蛋白質以及核酸物質解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質變性,但它不能完全抑制RNA酶的活性,因此Trizol中還加入了8-羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase(即RNA酶)。Tr