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    基因槍的使用注意事項

    1)質粒DNA的儲存濃度在槍擊前最好調至1ug/ul,這樣有利于制備微粒子彈時的DNA取樣。質粒DNA與金粉形成復合體的比例以0.75~1Pg/mg(金粉)為宜。 2)質粒DNA的純度和濃度是影響轉化率的重要參數之一。一般每槍用0.75~l/1gDNA。3)亞精胺最好是現用現配,或者儲存于一20~C冰箱中(時間不超過1個月)。如沒有保存好或保存時間過長,亞精胺會發生降解,從而影響DNA吸附于金屬微粒表面的能力 4)對于植物材料轉化,微粒子彈載體的選擇視受體材料而定。此外,可裂圓片的規格應與微粒子彈載體對應。......閱讀全文

    什么是基因槍?

    基因槍技術, 又被稱為生物彈道技術(Biolistic Technology) 或微粒轟擊技術(Particle Bombardment Technology),是 用火藥爆炸或者高壓氣體加速將包裹了DNA的球狀金粉或者鎢粉顆粒直接送入完整的組織或者細胞中的一種技術。它是基因轉移技術中的一種方法。其

    基因槍的分類

    這一方法是依靠一種基因槍來幫助導入外源基因。基因槍根據動力系統可分為火藥引爆、高壓放電和壓縮氣體驅動三類。其基本原理是通過動力系統將帶有基因的金屬顆粒(金粒或鎢粒),將DNA吸附在表面,以一定的速度射進植物細胞,由于小顆粒穿透力強,故不需除去細胞壁和細胞膜而進入基因組,從而實現穩定轉化的目的。它具有

    基因槍的歷史

    基因槍的歷史可以追溯到1987年。第一代基因槍是臺式基因槍,其中火藥型臺式基因槍是基因槍中最原始的類型。最早的基因槍是由美國康奈爾大學Sanford于1987年與該校工程技術專家Wolf及Kallen合作研究出的一種基因轉移的新方法。該方法一經發明便在學界嶄露頭角,Klein等人于1987年最早應用

    基因槍操作步驟

      微彈制備(金粉母液配制)   (1)稱取60mg金粉加入Eppendorf管。   (2)加入1mL 75%乙醇,充分渦旋,靜置15min,1500rpm離心5min。   (3)棄上清,加入1mL無菌水,充分渦旋,1500rpm離心5min。重復3次。   (4)棄上清,加入1mL無菌

    什么是基因槍法?

    基因槍法,又叫粒子轟擊細胞法或微彈技術。基因槍的作用是用壓縮氣體(氦或氮等) 動力產生一種冷的氣體沖擊波進入轟擊室(因此可免遭由“熱”氣體沖擊波引起的細胞損傷),把粘有DNA?的細微金粉打向細胞,穿過細胞壁、細胞膜、細胞質等層層構造到達細胞核,完成基因轉移。只有很少部分的細胞符合這樣的要求,大多數會

    手提基因槍和臺式基因槍應用范圍有哪些區別?

    手提基因槍主要應用于活體或者戶外植物以及需要貼壁轟擊的受體。臺式主要適用于組織,或者外植體以及細胞器、葉綠體、線粒體。原理沒有區別主要是受體選擇上,原則上可以通用。

    基因槍法轉化小麥實驗——使用 PDS-1000/He 基因槍轟擊

    實驗材料金粉試劑、試劑盒乙醇消毒液實驗步驟注意:由于基因槍通過高壓使粒子加速到極高的速度,故操作基因槍時應采取適當的安全措施并且佩戴安全眼鏡。在任何使用基因槍轉化的實驗中,必須設置對照檢測分化和選擇效率(見注 40) 。( 1 )? 根據 PDS-1000/He (見圖 4.2 ) 基因槍操作指南操

    基因槍法轉化大麥實驗

    實驗材料麥穗試劑、試劑盒植物凝膠乙醇次氯酸鈉蒸餾水亞精胺儀器、耗材EP 管移液槍實驗步驟1. 組織培養基的準備( 1 ) 首先準備所需濃度 2 倍的植物凝膠,高壓滅菌(見注 2 ) 。( 2 )? 所有的組織培養基都要過濾滅菌,因此除了無菌的儲備液,其他培養基成分按所需濃度 2 倍的量混勻,調到合適

    基因槍技術的歷史

    基因槍的歷史可以追溯到1987年。第一代基因槍是臺式基因槍,其中火藥型臺式基因槍是基因槍中最原始的類型。最早的基因槍是由美國康奈爾大學Sanford于1987年與該校工程技術專家Wolf及Kallen合作研究出的一種基因轉移的新方法。該方法一經發明便在學界嶄露頭角,Klein等人于1987年最早應用

    基因槍技術技術簡介

    基因轉移技術是一種將外源基因以在體(in vivo)或離體(in vitro)的方式導入到靶細胞核內的技術, 屬于基因工程技術(亦稱重組DNA?技術)的一個重要組成部分。基因工程技術以分子生物學等學科發展為基礎, 使人類擁有了構造生物遺傳物質新組合的能力。對在體方式而言, 基因轉移技術需要跨越細胞外

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