HRP標記抗體的方法
酶與抗體交聯的方法有許多種,根據酶的結構不同可采用不同的方法。對于制備HRP結合物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。 戊二醛二步法 1. 原理：戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。 2. 標記步驟： (1) 稱取HRP25mg溶于1.25％戊二醛溶液中，于室溫靜置過夜。 (2) 反應后的酶溶液經Sephadex G-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml／1分鐘，收集棕色流出液。如體積大于5ml，則以PEG濃縮至5ml。放置25ml小燒杯中，緩慢攪拌。 (3) 將待標記的抗體12.5mg用生理鹽水稀釋至5ml，攪拌下逐滴加入酶溶液中。 (4) 用1M PH9.5碳酸緩沖液0.25ml，繼續攪拌3?小時。 (5) 加0.2M賴氨酸0.25ml，混勻后，置室溫2小時。 (6) 在攪拌下逐滴......閱讀全文
HRP標記抗體的方法
?? 酶與抗體交聯的方法有許多種,根據酶的結構不同可采用不同的方法。對于制備HRP結合物，可用戊二醛二步法和過碘酸鈉法。尤以簡易過碘酸鈉法更為常用。 戊二醛二步法 1. 原理：戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。 2. 標記
HRP標記抗體-簡易過碘酸鈉法
實驗概要本實驗用簡易過碘酸鈉法進行HRP標記抗體。本法是以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與Ig上的氨基相結合，所獲酶標記抗體的產率高，將近70%的HRP和Ig結合，99%的Ig與酶結合，酶與Ig的活性無重大損失，是目前最常用的方法。實驗原理經典的過碘酸鈉法中需采用二硝基氟苯封閉H
HRP標記抗體-簡易過碘酸鈉法
實驗概要本實驗用簡易過碘酸鈉法進行HRP標記抗體。本法是以NaIO4先將HRP表面的糖分子氧化成醛基，然后再與Ig上的氨基相結合，所獲酶標記抗體的產率高，將近70%的HRP和Ig結合，99%的Ig與酶結合，酶與Ig的活性無重大損失，是目前最常用的方法。實驗原理經典的過碘酸鈉法中需采用二硝基氟苯封閉H
酶標記抗體-HRP標記抗體-戊二醛二步法
實驗概要本實驗介紹了酶標記抗體-HRP標記抗體中的戊二醛二步法的操作流程。實驗原理戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。主要試劑1. 0.1M PH6.8磷酸緩沖鹽水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M Na
HRP標記抗體-戊二醛二步法
實驗概要本實驗利用戊二醛二步法進行了HRP標記抗體。為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。主要試劑1. 0.1M PH6.8磷酸緩沖鹽水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8
HRP標記抗體-戊二醛二步法
實驗概要本實驗利用戊二醛二步法進行了HRP標記抗體。為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。主要試劑1. 0.1M PH6.8磷酸緩沖鹽水(PBS)：取0.2M Na2HPO4 49ml, 0.2M NaH2PO4 51ml，NaCl1.8
抗體的標記方法
熒光色素標記抗體1．準備好凝膠濾柱以便完成結合反應后用于分離標記抗體和游離的熒光色素。分離球形蛋白使用排除極限為20 000～50 000的凝膠介質和細粒級凝膠（直徑約50μm）。所需凝膠濾柱的大小可根據偶聯反應的總體積×20來確定。依據廠家說明準備好濾柱，用20倍柱床體積的PBS灌注濾柱，直至緩沖
抗體標記方法
Biotinylation of Antibody?( Contributed by?Nanci Donacki)??Antibody labeling?(House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers.??Coupling
HRP標記抗體的方法(戊二醛二步法和簡易過碘酸鈉法)-2
（6）PH7.8飽和硫酸銨溶液及半飽和硫酸銨溶液。?（7）萘氏試劑及聚乙二醇(PEG，MW2000)。?（8）純化的特異性抗體或抗Ig抗體。?（9）HRP(RZ>3.0)。?（10）Sephadex G-25層析柱(2cm×50cm)。?（11）攪拌器，分光光度計，離心機。?（12）透析袋，大、小燒
HRP標記抗體的方法(戊二醛二步法和簡易過碘酸鈉法)-1
一、戊二醛二步法?1. 原理?戊二醛為一種雙功能試劑，通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價結合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結合物。?2. 標記步驟?（1）稱取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室溫靜置過夜。?（2）反應后的酶溶液經Sephadex G-25層析柱，用生理鹽水洗脫。流速