實驗材料 RTA 基因試劑、試劑盒 結合(或漂洗)緩沖液生物素瓊脂糖洗脫緩沖液儀器、耗材 RNeasy?mini 試劑盒實驗步驟 這里介紹的方法概括了表達載體的構建以及篩選功能蛋白的 RIDS 循環系統的構建。3.1 RIDS 表達載體的構建首先,需要準備含編碼 T7 啟動子、蛋白質文庫、連接子、RTA 和間隔區的 DNA 來構建 RIDS ( 圖 13.2A )。13. 3.1.1?13.3.3.3 部分詳述了這個過程。盡管理論上用聚合酶鏈反應(PCR) 制備雙鏈 DNA 是可行的,但是我們推薦用質粒來構建此 DNA,因為用 PCR 來連接不同部分(包括 T7 啟動子、蛋白質文庫、連接子、RTA 和間隔區),很難保證不會引入非特異性擴增。在這個章節中,我們描述了構建 RIDS 載體的過程。由于采用標準的重組 DNA 方法來構建載體,因為篇幅有限,DNA 的操作過程在此就不贅述了。3.1.1 構建 pLRS 表達......閱讀全文
核糖體失活展示系統 實驗材料 RTA 基因
實驗材料RTA 基因試劑、試劑盒結合(或漂洗)緩沖液生物素瓊脂糖洗脫緩沖液儀器、耗材RNeasy?mini 試劑盒實驗步驟這里介紹的方法概括了表達載體的構建以及篩選功能蛋白的 RIDS 循環系統的構建。3.1 RIDS 表達載體的構建首先,需要準備含編碼 T7 啟動子、蛋白質文庫、連接子、RTA 和
時間總是過得很快,2016年馬上就要過去了,迎接我們的將是嶄新的2017年,2016年,我國有很多優秀科研機構的科學家們都做出了意義重大、影響深遠的研究成果,發表在國際頂級期刊上。本文中小編盤點了2016年我國科學家發表的一些重磅級研究,以饕讀者。 --結構生物學 -- 1.清華大學 施一
這篇題為Structure of the Post-catalytic Spliceosome from Saccharomyces cerevisiae的論文首次展示了pre-mRNA中3’剪接位點的識別狀態,該結構為回答RNA剪接反應過程中pre-mRNA中的3’剪接位點如何被識別,第二步轉