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  • 變性高效液相色譜技術

    變性高效液相色譜 (denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)是一項在單鏈構象多態性 (SSCP)和變性梯度凝膠電泳 (DGGE)基礎上發展起來的新的雜合雙鏈突變檢測技術,可自動檢測單堿基替代及小片段核苷酸的插入或缺失。DHPLC檢測變異的基本原理:將工作溫度 (柱溫 )升高使DNA片段開始變性,部分變性的DNA可被較低濃度的乙腈洗脫下來。由于異源雙鏈 (錯配的 ) DNA與同源雙鏈DNA的解鏈特征不同,在相同的部分變性條件下,異源雙鏈因有錯配區的存在而更易變性,被色譜柱保留時間短于同源雙鏈,故先被洗脫下來,從而在色譜圖中表現為雙峰或多峰的洗脫曲線。這一技術最先由Oefner于 1 995年建立,目前全球使用最多也最易操作的是美國transgenomic公司開發的WAVE 核苷酸片段分析系統,它通過一個獨特的DNA色譜柱—DNA Sep柱進行核酸片段的分離和......閱讀全文

    變性高效液相色譜技術

    變性高效液相色譜 (denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC)是一項在單鏈構象多態性 (SSCP)和變性梯度凝膠電泳 (DGGE)基礎上發展起來的新的雜合雙鏈突變檢測技術,可自動檢測單堿基替代及小片段核苷酸的插入或缺失。DHPL

    高效液相色譜技術

    高效液相色譜(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術,是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場

    色譜技術方法高效液相色譜

    高效液相色譜 (HPLC)是目前應用最多的色譜分析方法,高效液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,

    高效液相色譜之高效反相液相色譜(二)

    附:色譜柱操作說明,(以迪馬公司Diamonsil(TM)柱為例)1. 色譜柱常規參數訂貨號:Catalog.No. ? ? ? ? ? ? 產品ZL號 Serial No.出廠日期 ?Date填料 ?Column Paking ? ? 如,Diamonsil(TM)鉆石C18 5цm柱規格 Col

    高效液相色譜之高效反相液相色譜(一)

    反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液相色

    高效液相色譜之高效排阻液相色譜

    高效液相色譜(High Rerformance Liquid Chromatography, HPLC)又叫高壓、高速、近代液相色譜,通常叫做高效液相色譜。它是60年代中期才建立的一種高效快速分離化合物的方法,到了70年代后期才廣泛用于蛋白質的分離純化方面,現已成為分離純化蛋白質非常有效的方

    高效液相色譜技術(HPLC)的技術原理

    盡管二維凝膠電泳(2-DE)是常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應、操作程序復雜等缺陷。對于分析動態范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質的研究往往很難得到滿意的結果。Chong 等使用HPLC/ 質譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質差異表達。利用HPLC 分離蛋白質,并用MAL

    反相高效液相色譜

    實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛(HPLC級)去離子水(HPLC級) 三氟乙酸(TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析(即在步驟①中不加樣)。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。(1)線性梯

    反相高效液相色譜

    方案1 蛋白質 RP-HPLC 的標準色譜條件 方案2 填充 RP-HPLC 毛細管微柱 方案3 不易分離的大分子量多肽的純化實驗 方案4 用 RP-HPLC 對固相合成的多肽進行純化實驗 方案5 用 RP-HPLC 技術對多肽和蛋白質混合

    高效液相色譜柱

    一、怎樣選擇色譜柱?現代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。?(1)硅膠基質填料:?1、正相色譜?正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(

    高效液相色譜原理

    以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以

    高效液相色譜原理

    液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成

    高效液相色譜原理

    以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以

    高效反相液相色譜

    反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反相液

    高效反相液相色譜

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高

    高效反相液相色譜

    實驗方法原理反相色譜(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶質、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式,任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分,這部分越大,一般保留值越高,在高效液相色譜中這是應用面最廣的一種分離模式,在生物大分子的反

    高效液相色譜原理

    采用高效液相色譜(HPLC)法分離單糖和寡糖,較多采用氨基柱,乙腈和水作為流動相,此法具有完全分離麥汁、發酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和麥芽三糖的優點。本文采用Hypersil NH2柱分析麥汁、發酵液和啤酒中三糖以內的可發酵糖。至今尚未見到采用反相高效液相色譜(RP-HPLC)法分離測

    高效液相色譜特點

      ①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。  ②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。  ③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離

    高效液相色譜積分

    正常操作不建議手工積分,手工積分會人為的帶來誤差,同一次測定的對照品和樣品的色譜圖最好是在設定一個固定的積分條件進行積分計算,積分參數一致的情況下進行可減少人為主觀意識上的誤差。

    高效液相色譜柱

    一、怎樣選擇色譜柱現代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。(1)硅膠基質填料:1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,C

    高效液相色譜分類

    按照分離原理分類,大概可以分為:1.吸附色譜:基于各組分對固定相的吸附能力不同而實現分離的方法。比較常見的色譜柱是火星硅膠、氧化鋁、活性炭、聚乙烯、聚酰胺等。用于測定結構異構體。2.分配色譜:基于樣品在流動相和固定相之間溶解度不同的原理實現分離。比較常見的正相氰基柱(正相)和極為普遍的C18色譜柱(

    高效液相色譜原理

    液相色譜儀是一款以用戶為核心的智能化的色譜儀,具有常規HPLC的基本性能,并擴展了更多智能化的功能,能很好的滿足用戶的各類不同的應用要求,使用戶能更加輕松的使用,并獲得準確的分析數據。一、原理:高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色諧的理論,色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成

    高效液相色譜原理

    色譜法是一種分離技術,試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進行著的分配過程。 其中的一相固定不動,稱為固定相; 另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體(氣體或液體),稱為流動相。 當流動相中攜帶的混合物流經固定相時,其與固定相發生相互作用。由于混合物中各組分在性質

    高效液相色譜基線

    高效液相色譜基線色譜基線也常被稱作背景噪音,是在無樣品組分通過色譜檢測器時,檢測器響應信號的隨機分布。基線噪音的大小直接影響色譜分析方法的檢測靈敏度以及對雜質的檢出能力,如純度測試以及痕量物質殘留檢測方法等。對于液相色譜而言,等度洗脫模式下,由于流動相的組成保持一致,其折光率不變,因而基線比較平坦,

    高效液相色譜原理

    采用高效液相色譜(HPLC)法分離單糖和寡糖,較多采用氨基柱,乙腈和水作為流動相,此法具有完全分離麥汁、發酵液和啤酒中的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和麥芽三糖的優點。本文采用Hypersil NH2柱分析麥汁、發酵液和啤酒中三糖以內的可發酵糖。至今尚未見到采用反相高效液相色譜(RP-HPLC)法分離測

    高效液相色譜原理

    高效液相色譜(HPLC)的原理:以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。高效液相色譜對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發性和熱穩定性的限制,因而彌補了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機化合物中,可用氣相色譜分析的約占20%,而80%則需用高效液相色譜來分析。高效液相色譜和氣

    超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升

      超高效液相色譜(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。   超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本

    超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升

      超高效液相色譜(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。   超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本

    高效液相色譜與超高效液相色譜條件有什么差異

    原理是一致的。不同的地方一個是儀器,一個是色譜柱。后者超高效液相色譜,可以縮短檢測時間,節省時間,節省流動相,大大地提高了效率。先說色譜柱,超高效液相色譜柱的粒徑會更小,柱子也更短。如果說樣品流過液相色譜柱的感覺是流過滿是石頭的管路,那么超高效液相色譜柱就是裝滿了沙子的管路。一般液相色譜柱的粒徑是5

    超高效液相色譜相比高效液相色譜有哪些提升

      超高效液相色譜(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)借助于HPLC(高效液相色譜)的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統體積及快速檢測手段等全新技術,增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。   超高效液相色譜法的原理與高效液相色譜法基本

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