用檢測和驅動DNA探針進行差異雜交實驗
試劑、試劑盒 洗滌緩沖液SDSSSCBlocking 溶液經過剪切的鮭魚精 DNA探針儀器、耗材 沸水浴雜交爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑高嚴格性洗滌緩沖液（0.2XSSC，5 g/LSDS），預熱到 68°C(可選，見第 9 步）低嚴格性洗滌緩沖液（2XSSC，5 g/LSDS)，預熱到 68°C(可選，見第 9 步）SDS，5 g/L(可選，見第 9 步）SSC，20X（1L 配方：175.3 gNaCl 和 88.2 g 檸檬酸鈉,pH7.0)2. 核酸和寡核苷酸Blocking 溶液 [含有 2 mg/ml 未純化的 NP1、NP2R、cDNA 合成引物（使用 cDNA 的情況下），以及它們的互補寡核苷酸]經過剪切的鮭魚精 DNA（10 mg/ml)3. 探針純化的檢測者和驅動者探針，隨機引物法標記（每 100ng 消減 DNA 至少 107cpm)(可選，見第 9 步）4. 專用設備沸水浴雜交爐，預熱至 ......閱讀全文
用檢測和驅動 DNA 探針進行差異雜交實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 洗滌緩沖液 SDS SSC Blocking 溶液 經過剪切的鮭魚精 DNA探針
用檢測和驅動 DNA 探針進行差異雜交實驗
下面 4 個探針用于差異篩選雜交。1. 檢測者特異性消減探針（正向消減探針）。2. 驅動者特異性消減探針（反向消減探針）。3. 從檢測者 mRNA(或檢測者基因組 DNA) 直接合成的 cDNA 探針。4. 從驅動者 mRNA(或驅動者基因組 DNA) 直接合成的 cDNA 探針。本實驗來源于 PC
用檢測和驅動 DNA 探針進行差異雜交實驗
試劑、試劑盒 洗滌緩沖液SDSSSCBlocking 溶液經過剪切的鮭魚精 DNA探針儀器、耗材 沸水浴雜交爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑高嚴格性洗滌緩沖液（0.2XSSC，5 g/LSDS），預熱到 68°C(可選，見第 9 步）低嚴格性洗滌緩沖液（2XSSC，5 g/LSDS)，預
用非同位素探針進行原位雜交和檢測實驗
實驗方法原理 實驗材料 載有樣本的載玻片 試劑、試劑盒 20?150 ng非同位素標記的DNA探針去離子的甲酰胺l0 mg mL經超聲處理的鮭精DNA主雜交混合液50% (V V)甲酰胺（未去離子）SSC pH 7.0生物素檢測液或地高辛檢測液或生物素 地高辛檢測液0.1% (V
用非同位素探針進行原位雜交和檢測實驗
熒光原位雜交 雜交信號的放大 地高辛標記探針的信號放大 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料
用非同位素探針進行原位雜交和檢測實驗——雜交信號放大
實驗材料載有樣本的載玻片試劑、試劑盒1?3μg ml生物素酰化抗親和素抗體 溶于4×SSC 1% (m V) BSA (組分 V)生物素信號放大溶液：含2?5μg ml熒光素親和素DCS 溶于 4×SSC 1% (m V) BSA (組分V)儀器、耗材廣口瓶載玻片濕盒實驗步驟1) 用生物素酰化探針與
用非同位素探針進行原位雜交和檢測實驗——熒光原位雜交
實驗方法原理實驗材料載有樣本的載玻片試劑、試劑盒 20?150 ng非同位素標記的DNA探針去離子的甲酰胺l0 mg mL經超聲處理的鮭精DNA主雜交混合液50% (V V)甲酰胺（未去離子）SSCpH 7.0生物素檢測液或地高辛檢測液或生物素 地高辛檢測液0.1% (V V) Triton ×-1
雜交探針的檢測實驗
1. ?將載玻片以膠帶固定于硬紙板或廢膠片上。2. ?將Du Pont Cronex 成像膠片（MRF 34 Clear） 輕壓在玻片上4℃曝光。3. ?當用這種膠片時，應注意以膠片的膠乳面正對樣品。
雜交探針的檢測實驗
實驗步驟 1. ?暗室中，以42~45℃水浴，溫育盛有4盎司（113.3 g）Kodak NTB-2放射自顯影膠乳瓶30 min。同時，在500 ml 三角瓶中預熱等體積的水至相同溫度。 2. ?膠乳熔化后，緩慢沿三角瓶壁（以一角度）倒入瓶中
雜交探針的檢測實驗3
實驗步驟 1. ?暗室中，以42~45℃水浴，溫育盛有4盎司（113.3 g）Kodak NTB-2放射自顯影膠乳瓶30 min。同時，在500 ml 三角瓶中預熱等體積的水至相同溫度。 2. ?膠乳熔化后，緩慢沿三角瓶壁（以一角度）倒入瓶中并混勻（輕旋1~2次，防止氣泡產生）。