大鼠原代細胞分離與培養
一、大鼠神經元細胞(酶消化法) 簡述:新生24h或E18胎鼠,取腦,剝離海馬,剪碎,木瓜酶消化,清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養板中。 二、大鼠雪旺細胞(植塊法) 簡述:新生24h大鼠,取坐骨神經,剝去外膜和束膜,剪成1mm3的小塊,均勻鋪于培養皿內,加少量血清,37℃ CO2培養2h后,再加入培養基,24-48h后有細胞爬出。 三、大鼠胰島(酶消化加密度梯度離心) 簡述:SD大鼠,常規麻醉、固定、消毒、進腹、膽總管插管,逆行注入預冷的1mg/ml膠原酶P溶液10ml。迅速取下胰腺,38℃水浴消化10分鐘,600μm不銹鋼網過濾,加入4℃新生牛血清和4℃Hank’s液終止消化。細胞懸液離心后,4℃ Hank’s液洗滌兩次。沉淀物加25%Ficoll混勻,其上依次分別加入23%、20%、11%Ficoll溶液和Hank’s液,離心后吸出23%-20% 及20%-11%界面的胰島,用4℃Han......閱讀全文
大鼠原代細胞分離與培養
一、大鼠神經元細胞(酶消化法) 簡述:新生24h或E18胎鼠,取腦,剝離海馬,剪碎,木瓜酶消化,清洗過篩后鋪于多聚賴氨酸包被的培養板中。 二、大鼠雪旺細胞(植塊法) 簡述:新生24h大鼠,取坐骨神經,剝去外膜和束膜,剪成1mm3的小塊,均勻鋪于培養皿內,加少量血清,37℃ C
原代細胞分離與培養
對于大部分科研人員來說,研究中一般用到均是現成的細胞系/株,我們只需要:進行細胞傳代和保種。然而,這些細胞系常常由于體外長期培養,而丟失原有生物學特性,對藥物處理的反應差距越來越大。因此,原代細胞的地位日漸凸顯,Paper中若有了原代細胞的數據都會添色不少。然而,就小編親生經歷,原代細胞分離著實是個
原代細胞分離與培養方法介紹
前言 凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞的培養也叫初代培養是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養,是建立細胞系的第一步,是一項基本技術。 原代細胞最接近和最能反映體內生長特性,適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。
原代細胞分離與培養,你都掌握了嗎?
對于大部分科研人員來說,研究中一般用到均是現成的細胞系/株,我們只需要:進行細胞傳代和保種。然而,這些細胞系常常由于體外長期培養,而丟失原有生物學特性,對藥物處理的反應差距越來越大。因此,原代細胞的地位日漸凸顯,Paper中若有了原代細胞的數據都會添色不少。然而,就小編親生經歷,原代細胞分離著實
原代軟骨細胞分離培養
1、一般根據實驗要求,選取不同年齡組的兔子,實際上兔子的年齡越小越好,畢竟幼體組織的活力要高于成體組織的活力,耳靜脈空氣注射法處死后,無菌條件下分離后肢關節軟骨和肋軟骨,剝離包裹軟骨組織的筋膜和軟骨膜,放入盛有PBS液的培養皿中。2、將分離得到的軟骨組織剁碎成0.3-0.5mm的組織塊,移入25cm
原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化
PriCells-原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長,既有上皮樣細胞又有纖維樣細胞,纖維樣細胞又包括成纖維細胞、肌細胞、骨細胞、滑膜細胞等。混雜的細胞會直接影響實驗結果。在體外培養原代細胞時,為了保證實驗結果的可靠性、一致性、穩定性、和可重復性,要求采用
原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化
原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化 PriCells-原代上皮細胞與原代成纖維細胞培養的分離純化 原代細胞、傳代細胞絕大多數都呈混合生長,既有上皮樣細胞又有纖維樣細胞,纖維樣細胞又包括成纖維細胞、肌細胞、骨細胞、滑膜細胞等。混雜的細胞會直接影響實驗結果。 在體外培養原代細胞時,為了保
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
大鼠肝星狀細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
新生大鼠心肌細胞原代培養實驗——原代培養技術
新生大鼠心肌細胞原代培養可應用于:(1)細胞保種;(2)用于細胞形態研究;(3)應用于臨床研究。實驗方法原理將大鼠的心肌細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD 乳鼠試劑、試劑盒低糖 DMEM、胰酶EDTA青鏈
原代細胞培養之——細胞分離技術(一)
原代細胞的分離和制作人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密,不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖,即使采用1mm3的組織塊,也只有少量處于周邊的細胞可能生存和生長,若需獲取大量細胞,必須將現有的組織塊充分散開,使細胞解離出來,常采用的方法如下: 一、懸浮細胞的分離方法 組織材料若來自血液、羊水
原代細胞培養之——細胞分離技術(二)
(2)?膠原酶(Collagenase)消化法? 膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用。適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質有較好的消化作用,對細胞本身影響不大,可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害。該酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的
大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定(一)
大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定?許 川1/舒為群1,/張 亮1/曹 佳2/周 新3(1.第三軍醫大學軍事預防醫學院環境衛生學教研室, 重慶 400038; 2. 第三軍醫大學軍事預防醫學院軍事毒理學教研室,重慶 400038;3. 第三軍醫大學西南醫院燒傷科, 重慶 400038)?Cultur
大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養與鑒定(二)
1.4 顆粒細胞鑒定1.4.1 HE染色 取生長旺盛的第4 d的細胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的細胞懸液,種植于已預置好小蓋玻片的24孔培養板中,放人CO2 培養箱中,在37 ℃、5% CO2及完全飽和濕度條件下進行培養。當細胞生長至70%融合時取出
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
原代細胞培養可應用于:(1)分子生物學;(2)細胞生物學;(3)遺傳學;(4)免疫學;(5)腫瘤學;(6)病毒學等領域。實驗方法原理原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物體內取出所需的組織(或器官),經胰酶消化,
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞培養小鼠胚胎分離實驗
鼠胚原代細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 原代細胞培養,是指直接從動物體內獲取的細胞、組織或器官,在體外培養,直到第一次傳代為止。這種培養,首先用無菌操作的方法,從動物
原代細胞分離和培養基本步驟
?1、器官和組織的選擇??? 盡可能的去除不必要的組織和血跡。??? 2、原代細胞的分離??? (1)應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。??? (2)根據組織來源不同,可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。??? 3、原代細胞的培養:??? (1)PriCells原代
原代細胞分離和培養基本步驟
原代細胞分離和培養基本步驟?1、器官和組織的選擇盡可能的去除不必要的組織和血跡。?2、原代細胞的分離(1)應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。(2)根據組織來源不同,可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。?3、原代細胞的培養:(1)PriCells原代細胞特制培養基(2
細胞技術專題:大鼠肝星狀細胞原代培養實驗
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法 實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。 實驗材料SD大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉
新生大鼠心肌細胞原代培養實驗
原代培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將大鼠的心肌細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
大鼠肺成纖維細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、
新生大鼠心肌細胞原代培養實驗
原代培養技術 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將大鼠的心肌細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。
大鼠肺成纖維細胞原代培養實驗
實驗方法原理 將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料 Wistar乳鼠試劑、試劑盒 PBS牛血清青霉素鏈霉素EDTA胰酶碘酒酒精儀器、耗材 綿球科直剪眼科彎剪眼科直鑷眼科彎鑷玻璃平皿塑料
大鼠肺成纖維細胞原代培養實驗
胰酶消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將大鼠的肺成纖維細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的生長培養基培養基中培養,使細胞得以生存、
原代細胞培養之分離注意事項
1、組織塊培養法 1)組織塊接種后的前3天,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經常翻動和振動,否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。 2)加入的培養液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。 3)當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的
腫瘤組織源性原代細胞分離和培養
腫瘤組織源性原代細胞分離和培養 腫瘤組織源性原代細胞分離的常用方法: 組織塊法、酶消化法、鉭網法、脫落細胞法。 腫瘤組織源性原代細胞對藥物篩選體系的益處: (1)腫瘤組織源性原代細胞培養需要的腫瘤組織較少; (2)不影響其他病理檢查對腫瘤標本的需求; (3)腫瘤組織源性
原代細胞分離和培養基本步驟介紹
1、器官和組織的選擇盡可能的去除不必要的組織和血跡。2、原代細胞的分離(1)應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。(2)根據組織來源不同,可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。3、原代細胞的培養:(1)PriCells原代細胞特制培養基(2)PriCells原代細胞特制添
新生大鼠心肌細胞原代培養實驗(二)
?3. ? 用第二套手術器械進行下列操作。用眼科直鑷和眼科彎剪把培養皿中的心臟周邊的血凝塊及纖維組織剔除掉,放在另一個預先裝好D-Hank's液的培養皿中,把心臟組織再洗一遍后,將心臟組織放在另外一個培養皿中(或者其它合適容器中,視個人習慣),加少許 0.06%胰酶,用眼科彎剪將心臟
新生大鼠心肌細胞原代培養實驗(一)
新生大鼠心肌細胞原代培養可以:(1)細胞保種;(2)用于細胞形態研究;(3)應用于臨床研究。實驗方法胰酶消化法實驗方法原理將大鼠的心肌細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料SD 乳鼠試劑、試劑盒低糖 DMEM、胰