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親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。......閱讀全文
親和色譜法（ affinity chromatography），將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相，利用與固定相不同程度的親和性，使成分與雜質分離的色譜法。
一、基本理論（一）原理：在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立
在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立起來的色譜法稱親色譜法。親和色譜
一、基本理論（一）原理：在生物體內，許多大分子AKSJDHFKLSDFHKLSDJ具有與某些相對應的專一分子可逆結合的特性。例如抗原和抗體、酶和底物及輔酶、激素和受體、RNA和其互補的DNA等，都具有這種特性。生物分子之間這種特異的結合能力稱為親和力，根據生物分子間親和吸附和解離的原理，建立起來的色
用于親和色譜法的理想載體應非特異性吸附要盡可能小,對其他大分子物質的作用很微弱;必須具有多孔的網狀結構,能使大分子自由通過而增加配基的有效濃度;必須具有相當量的化學基團可供活化,并在溫和條件下能與大量的配基連接;具有良好的機械性能;在較寬的pH值、離子強度和變性劑濃度范圍內具有化學和機械穩定性;高度
親和色譜法是利用生物分子間所具有的專一親和力而設計的層析技術。首先將載體在堿性條件下用溴化氰(CNBr)活化,再用化學方法將能與生物分子進行可逆性結合的物質(稱為配基結合到某種活化固相載體上此過程稱為偶聯反應。將偶聯反應得到的親和吸附劑裝入層析柱中而形成親和柱,溶液樣品通過親和柱時,生物大分子和親和
配基要結合到載體上,首先要活化載體上的功能基團,再將配基連接到活化基團上。此偶聯反應必須在溫和條件下進行,不致使配基和載體遭到破壞;且偶聯后要反復洗滌載體,以除去殘存的未偶聯的配基,還要測定偶聯的配基的量。最常用的載體是瓊脂糖4B(Sepharose4B)。把瓊脂糖與溴化氰在pH值為11條件下進行處
二、易出現的問題（一）渦流擴散（Eddy diffusion）流動相碰到較大的固體顆粒，就像流水碰到石頭一樣產生渦流。如果柱裝填得不均勻，有的部分松散或有細溝，則流動相的速度就快；有的部位結塊或裝直緊密則流就慢，多條流路有快有慢，就使區帶變寬。因此，固相載體的顆粒要小而均勻，裝柱要松緊均一，這樣渦流
親和色譜法一般采用柱層析法,要達到好的分離效果,必需選擇好操作條件。①吸附 親和柱所用的平衡緩沖液的組成、pH值和離子強度都應選擇最有利于配基與生物大分子形成復合物。吸附時,一般在中性條件下,上柱樣品液應和親和柱平衡緩沖液一樣,上柱前樣品應對平衡緩沖液進行充分透析,這有利于絡合物的形成。
色譜分析技術（高壓液相色譜、親和色譜法和吸附色譜法）高壓液相色譜Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色譜的設想，然而直到六十年代后期，由于各種技術的發展，高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜（HighSpeed Liquid Chromatography）