1)復蘇細胞:將含有 1mL2B4細胞。懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。......閱讀全文
1)復蘇細胞:將含有 1mL2B4細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8
1. 收到2B4細胞。后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。 2. 仔細閱讀2B4細胞。說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致。若由于培養條件不一致而導致細胞出現問 題,責任由客戶自行承擔
1.?準備工作,開水浴鍋,預熱試劑,超凈工作臺紫外照射 30min,找到對應細胞在液氮罐中的位置 2.?紫外照射后風機吹 10min?后,酒精擦拭臺面,放入試劑和離心管,取 15ml?離心管,加入 9ml?培養液 3.?在液氮罐中取出細胞,先擰松放液氮,再擰緊,將凍存管放入 PE?手套中,然后
1.?上述操作方案的數據可作為參考,實際操作已實驗室配備的耗材為準, 2.?凍存時含 10%DMSO,事先加 9ml?培養液是為了稀釋 DMSO,理論上 1%DMSO對細胞性 3.?隔著 PE?手套能有效防止水浴過程中導致污染 4.?重懸的體積只是作為參考,具體的根據需要可進行調整 5.?
常規操作(主要內容如下)·?????????Aseptic Technique·?????????Culture Vessels·?????????Cell Counting·?????????Primary Culture·?????????Maintenance of Cell Line?·??
一、原代培養及其操作步驟原代分離細胞培養是指從供體內取出組織后,經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環境,在無菌、適當溫度和一定的營養條件下,生存、生長和繁殖。原代培養細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞
PA-1細胞培養操作 1)復蘇細胞:將含有 1mLPA-1細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 2
1)復蘇細胞:將含有 1mL2A1細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約 8
1)復蘇細胞:將含有 1mL大鼠纖維環細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約
1)復蘇細胞:將含有 1mLWML2細胞。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 250px 皿中,加入約