逆轉錄聚合酶鏈反應(RTPCR,rtpcr)
實驗方法原理 逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得目的基因或檢測基因表達。實驗材料 組織細胞試劑、試劑盒 RNA提取試劑dNTP 混合物Taq DNA聚合酶第一鏈cDNA合成試劑盒儀器、耗材 離心管離心機水浴鍋PCR管電泳儀凝膠圖像分析系統移液管移液槍離心管盒實驗步驟 一、總RNA的提取見“總RNA的提取”相關內容。 二、cDNA第一鏈的合成目前試劑公司有多種cDNA第一鏈試劑盒出售,其原理基本相同,但操作步驟不一。現以GIBICOL公司提供的SuperScriptTM Preamplification System for First......閱讀全文
逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR,rtpcr)
逆轉錄-聚合酶鏈反應?(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的轉錄產物;(2)獲取目的基因;(3)合成cDNA探針;(4)構建RNA高效轉錄系統。實驗方法原理逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Tran
逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR,rtpcr)
實驗方法原理 逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板
逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR,rtpcr)
實驗方法原理逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR
逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR,rtpcr)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA,再以cDNA為模板進行PCR擴增,從而獲得目的基因或檢測基因表達。
逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR,rtpcr)注意事項
注意事項1.在實驗過程中要防止RNA的降解,保持RNA的完整性。在總RNA的提取過程中,注意避免mRNA的斷裂;?2. 為了防止非特異性擴增,必須設陰性對照;?3.內參的設定:主要為了用于靶RNA的定量。常用的內參有G3PD(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)、β-Actin(β-肌動蛋白)等。其目的在于避免
逆轉錄-聚合酶鏈反應
逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得
逆轉錄-聚合酶鏈反應
逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得
逆轉錄-聚合酶鏈反應的原理
組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA.再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得目的基因或檢測基因表達.RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能.該技術主要用于:分析基因的轉錄產物,
逆轉錄聚合酶鏈反應所需試劑
1.RMA提取試劑2.第一鏈cDNA合成試劑盒3.dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM4.Taq DNA聚合酶
逆轉錄-聚合酶鏈反應實驗方法
逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得