RtPCR實驗準備及與操作步驟
一、實驗器具與材料：1、移液槍：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸頭：1ml、200μl、20μl3、勻漿管：5ml4、吸頭臺：放置1ml吸頭的一個，放置20μl吸頭的一個5、EP 管：1.5ml、0.2ml、100μl6、試劑瓶：2個60ml的棕色試劑瓶（廣口，帶蓋）1個125ml的白色試劑瓶（放無水乙醇）7、量筒：50ml、250ml、500ml8、容量瓶：250ml、500ml、1000ml9、試管架：5ml、 1.5ml、20μl10、鹽水瓶：250ml、500ml各2個備用，一個裝無水乙醇，另一個裝DEPC水11、鋁制飯盒：4個12、塑料小飯盒：1個13、大瓷缸：2個14、錫泊紙：一卷15、卷紙：2卷16、三角燒瓶：帶蓋，稍大易生物儀器庫：http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html易生物試劑庫：http://www.ebioe.com/yp/product......閱讀全文
RtPCR實驗準備及與操作步驟
一、實驗器具與材料：1、移液槍：1ml、200μl、20μl、10μl、2μl2、吸頭：1ml、200μl、20μl3、勻漿管：5ml4、吸頭臺：放置1ml吸頭的一個，放置20μl吸頭的一個5、EP 管：1.5ml、0.2ml、100μl6、試劑瓶：2個60ml的棕色試劑瓶（廣口，帶蓋）1個125m
SemiQuantitative－RTPCR
The RT-PCR method can be used not only to detect specific mRNAs but also to semi-quantitate their levels. Thus, one can compare levels of transcripts
RTPCR的目的是什么
RT-PCR，就是先把RNA反轉錄為cDNA，再PCR擴增。如果只想檢測某個基因mRNA的量，可以做northern blot, 或者定量RT-PCR(熒光實時PCR）
PCRSSCP、－RTPCRSSCP－區別
僅僅是擴增的方法不同而已,一個是普通的PCR,一個是RTPCR.如果需要鑒定染色體的DNA序列有無差別或基因突變,可以用PCR-SSCP,我曾做過這方面的實驗,檢測病人有無基因的點突變,同時擴增病人和正常人的基因片段,然后做sscp,只要有一個核苷酸的區別,變性SDS-PAGE后,條帶就會有很大的區
PCRSSCP、－RTPCRSSCP－區別
僅僅是擴增的方法不同而已,一個是普通的PCR,一個是RTPCR.如果需要鑒定染色體的DNA序列有無差別或基因突變,可以用PCR-SSCP,我曾做過這方面的實驗,檢測病人有無基因的點突變,同時擴增病人和正常人的基因片段,然后做sscp,只要有一個核苷酸的區別,變性SDS-PAGE后,條帶就會有很大的區
rtpcr和實時熒光定量pcr區別
rtpcr和實時熒光定量pcr區別如下：1、所說的PCR應該就是最常規的PCR，以DNA為模板，通過上下游引物，實現DNA的擴增。2、RT-PCR一般情況下是指反轉錄PCR（reverse transcription），盡管有些資料上說實時熒光定量PCR也（realtime fluores-cenc
rtpcr和實時熒光定量pcr區別
rtpcr和實時熒光定量pcr區別如下：1、所說的PCR應該就是最常規的PCR，以DNA為模板，通過上下游引物，實現DNA的擴增。2、RT-PCR一般情況下是指反轉錄PCR（reverse transcription），盡管有些資料上說實時熒光定量PCR也（realtime fluores-cenc
如何在RTPCR過程中避免DNA污染
首先,從引物設計上避免基因組DNA的擴展,設計引物的時候擴展的區域在兩個不同的外顯子上,這樣的話中間有一個內含子,如果PCR擴增的時候將基因組DNA也擴增出來的話,電泳條帶長度會比目地帶長另外,提取好RNA之后,可以加入DNA酶進行消化,這樣可以消除RNA模板中的基因組DNA污染做到以上兩點基本可以
逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR，rtpcr）
實驗方法原理逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo（dT）或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板進行PCR
逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR，rtpcr）
實驗方法原理 逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo（dT）或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA。再以cDNA為模板
逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR，rtpcr）
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 提取組織或細胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo（dT）或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA，再以cDNA為模板進行PCR擴增，從而獲得目的基因或檢測基因表達。
逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR，rtpcr）
逆轉錄-聚合酶鏈反應?（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）可以：(1）分析基因的轉錄產物；（2）獲取目的基因；（3）合成cDNA探針；（4）構建RNA高效轉錄系統。實驗方法原理逆轉錄-聚合酶鏈反應 (Reverse Tran
逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR，rtpcr）注意事項
注意事項1．在實驗過程中要防止RNA的降解，保持RNA的完整性。在總RNA的提取過程中，注意避免mRNA的斷裂；?2． 為了防止非特異性擴增，必須設陰性對照；?3．內參的設定：主要為了用于靶RNA的定量。常用的內參有G3PD（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）、β-Actin（β-肌動蛋白）等。其目的在于避免
突破！李慶閣團隊將PCR檢測能力提升一個數量級以上
實時熒光PCR (rtPCR) 是目前應用最廣的核酸檢測技術，檢測模式采用閉管檢測，相對于開管檢測而言，rtPCR極大降低了擴增產物的污染機會，節省了時間和人力，便于實現自動化，更可以利用閾循環數（Cq值）支持定量檢測。然而，rtPCR的一個很大局限在于單個反應所能檢測的靶基因數目有限。根據目前主流
HCV－cDNA/聚合酶鏈反應的相關介紹
(HCV cDNA/Polymerase Chain Reaction,RTPCR)測定肝和血清中HCV RNA。 本法是將HCV RNA逆轉錄為HCV DNA，選用高度保守的5′非編碼區引物擴增放大后作電泳觀察結果。本法較靈敏。由于肝和血清中HCV RNA出現較抗-HCV為早，一些HCV感染
HIV檢驗技術的研究進展
【關鍵詞】 ?人類免疫缺陷病毒；聚合酶鏈反應；抗原 ［摘要］ 艾滋病是由人類免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一種嚴重威脅人類身體健康的疾病。為有效遏止HIV的蔓延，除尋求更加有效的疫苗和治療藥物外，HIV早期診斷十分重要，其早期診斷主要靠實驗診斷，包括病原學、免疫學、分子生物學等。 ［關鍵詞］
反轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR）診斷禽流感
近年來發展的RTPCR分子診斷技術具有高度的敏感性和特異性，可大大縮短對AIV病毒的檢出時間，克服了傳統的禽流感診斷技術的缺點，為禽流感早期快速診斷提供子敏感、快速、實用的方法。1986年，Perdue用聚合酶鏈反應（PCR）診斷禽流感，從接種雞胚到出結果僅用時36h。趙建梅等在傳統一步法RT-PC
概述多順反子的基因結構
來自德國科隆大學遺傳學系的Joë；lSavard、DiethardTautz等人發現擬谷盜（Tribolium，一種昆蟲）中的一個分節基因（Segmentationgene，負責昆蟲身體分節的基因）能夠產生一種可編碼多種保守肽的多順反子mRNA。 昆蟲的分節基因是早期胚胎產生體節必須的
丙肝病毒的微生物學診斷
RIA或者ELISA 即：放射免疫診斷（RIA）或酶聯免疫試驗（ELISA）檢測血清中抗HCV 1989年，Kuo等建立了抗-C-100放射免疫試驗方法（RIA），隨后 Ortho公司又研制成功酶聯免疫試驗方法（ELISA）檢測抗-C-100。這兩種方法均用重組酵母表達的病毒抗原（C-100
實驗室實驗器材使用實驗
1、了解化學試劑的等級和保管原則2、掌握玻璃器械的規范使用3、明確各玻璃器械的功用試劑、試劑盒純水儀器、耗材量筒容量瓶吸管移液管吸球天平溫度什移液瓶實驗步驟一、實驗材料：不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管（移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管）吸球二、實驗步驟：1. 根據試劑瓶上的
實驗室實驗器材使用實驗
試劑、試劑盒 純水儀器、耗材 量筒 容量瓶 吸管移液管 吸球天平溫度什 移液瓶實驗步驟 一、實驗材料：不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管（移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管）吸球二、實驗步驟：1. 根據試劑瓶上的標志說明該試劑的等級及保管方法2，玻璃量器的使用：按照玻璃量器上的標
實驗動物實驗標本的采集實驗
(1) 大鼠、小鼠的采血方法：①剪尾采血：適用于少量采血，如制作血涂片、白細胞計數等。動物麻醉后，將尾尖剪去約 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈，讓血液自行流出。小鼠可每次采血約 0. 1 ml, 大鼠約 0.4 ml。②眼眶后靜脈叢采血：一手拇指及食指抓住鼠兩耳之
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物尿液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒水儀器、耗材收集器實驗步驟尿液的采集 常用的采集方法較多，一般在實驗前需給動物灌服一定量的水。(1) 代謝籠法：此法較常用，適用于大、小鼠。將動物放在特制的籠內。一般需收集 5 小時以上的尿液，最后取平均值。(2) 導尿法：常用于雄性兔、狗。動物輕度麻醉后，固定于手術臺上
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腦脊液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟(1) 狗、兔腦脊液的采集：通常采取脊髓穿刺法，穿刺部位在兩髂連線中點稍下方第七腰椎間隙。動物麻醉后側臥位固定，頭尾部盡量彎向腰部，去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮膚，腰穿針垂直刺入，當有落空感及動物的后肢跳動時，針已達椎管內，抽去針芯，即
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腹水的采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟抽取大鼠、小鼠的腹水時，抓取固定動物，使動物腹部朝上，消毒皮膚，針頭在腹股溝和腹中線之間刺人腹腔，腹壓高時腹水自然流出，腹水少時可用注射器抽取。
鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒使用說明書
產品名稱：11鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒英文名稱：Duck Hepatitis Virus 1(DHV1)1RTPCR編號：YS30941-R需要自備的器材：1．11鴨肝炎病毒1型PCR檢測試劑盒儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 μL、20
雜交實驗的實驗目的
了解用聚乙二醇PEG方法誘異同種植物原生質體融合的技術，并能根據新本原生質體的形態樗來鑒別雜種細胞。
實驗動物標記實驗
實驗材料兔子 小鼠試劑、試劑盒3%～5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟1.?染色法 適用于小動物，如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上，以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有：3%～5%苦味酸溶液（黃色）、0.5%中性品紅（紅色）、2%硝酸銀（咖啡色）。標記的原則是
雜交實驗的實驗原理
不同種植物的原生質體可在人工誘導條件下融合，所產生的雜種細胞，即異核體經過培養可再生新壁，分裂形成愈傷組織，進而分化產生雜種植株。由于進行融合的原生質體來自體細胞，故該項技術也叫體細胞雜交。原生質體融合能使有性雜交不親合的植物種間進行廣泛的遺傳重組，因而在農業育種上具有巨大的潛力。在植物遺傳操作研究
細胞劃痕實驗實驗步驟
一.準備：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內）二.流程：1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2.在空中加入約5X105個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過一夜能鋪