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    競爭性RTPCR:拷貝數的評估

    試劑、試劑盒 雙蒸水RT-PCR 緩沖液MMLV 逆轉錄酶SUPERaseIN Taq DNA 聚合酶總 RNA 隨機引物dNTP 混合物 基因特異的正向引物基因特異的反向引物儀器、耗材 PCR 儀 PCR 管實驗步驟 第一部分:單鏈 cDNA 的合成一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去除 RNA 酶的雙蒸水10XRT-PCR 緩沖液(100 mmol/LTris-HCl、pH8.3,500 mmol/LKC1,15 mmol/LMgCl2)2. 酶和酶緩沖液MMLV 逆轉錄酶(100~200U/ul)SUPERaseIN(20U/ul,Ambion)3. 核酸和寡核苷酸dNTP 混合物(10 mmol/L, 包含所有四種 dNTP)隨機引物(50umol/L)總 RNA(1~5ug)4. 放射性復合物競爭性 RNA 轉錄本,109 拷貝(見方案 4)5. 實驗器材薄壁的 PCR 管二、方法1. 在冰上向薄壁的 PCR 管中加 2......閱讀全文

    競爭性 RT-PCR: 拷貝數的評估

    試劑、試劑盒 雙蒸水RT-PCR 緩沖液MMLV 逆轉錄酶SUPERaseIN Taq DNA 聚合酶總 RNA 隨機引物dNTP 混合物 基因特異的正向引物基因特異的反向引物儀器、耗材 PCR 儀 PCR 管實驗步驟 第一部分:單鏈 cDNA 的合成一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑去除 RNA 酶

    競爭性 RT-PCR: 拷貝數的評估

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 雙蒸水 RT-PCR 緩沖液 MMLV 逆轉錄酶 SUPERaseIN Taq DNA 聚合酶 總 RNA

    競爭性 RT-PCR: 拷貝數的評估

    在預實驗中,對樣品和競爭子應分別做反轉錄,然后,不變的這種樣品反轉錄產物的量與競爭子反轉錄產物 2 的對數倍稀釋的量相結合,用于 PCR,這種方法可以確定樣品的最適拷貝數。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒雙蒸水RT-PCR 緩沖液MMLV 逆轉錄酶SUPER

    競爭性 RT-PCR: 競爭子 RNA 的構建實驗

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 雙蒸水 DNA 模板 [a-32P]ATP 儀器、耗材 RT

    競爭性 RT-PCR: 競爭子 RNA 的構建實驗

    第一部分:競爭子的設計;第二部分:競爭子RNA的合成、純化和定量。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇雙蒸水DNA 模板[a-32P]ATP儀器、耗材RT-PCR 競爭子構建試劑盒實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇去除 RNA 酶的雙蒸水2. 核酸

    競爭性 RT-PCR: 競爭子 RNA 的構建實驗

    試劑、試劑盒 乙醇雙蒸水DNA 模板[a-32P]ATP儀器、耗材 RT-PCR 競爭子構建試劑盒實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑乙醇去除 RNA 酶的雙蒸水2. 核酸和寡核苷酸DNA 模板(0.5~1.0ug 線性化的質粒模板或 0.1~0.5ugPCR 模板)3. 放射性復合物[a-3

    質粒拷貝數的定義

    拷貝數就是指某基因(可以是質粒)在某一生物的基因組中的個數。單拷貝就是該基因在該生物基因組中只有一個,多則指有多個。

    競爭性檢測原理

    競爭性檢測原理:使用一種具有吸附所有β-內酰胺藥物的特殊受體細菌,該細菌同14c標記的特定量青霉素G一起加入牛奶樣品。牛奶樣品中的任何一直β-內酰胺類均能和這種特殊標記的青霉素G競爭性地與細菌cell上的特異性受體結合。

    競爭性檢測原理

    競爭性檢測原理:使用一種具有吸附所有β-內酰胺藥物的特殊受體細菌,該細菌同14c標記的特定量青霉素G一起加入牛奶樣品。牛奶樣品中的任何一直β-內酰胺類均能和這種特殊標記的青霉素G競爭性地與細菌cell上的特異性受體結合。

    競爭性pcr原理

      競爭性PCR 是靶基因與參考標準在同一反應管中共同擴增,用參   考標準作對照估計出一種特異性靶DNA或RNA分子的相對含量。  ? 競爭PCR 有效地控制了不同反應管間擴增效率的差異。  競爭 PCR ?-理論基礎   在PCR擴增過程中,PCR產物的量用公式Y= A (1+R)n表示,其Y表

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