離子交換色譜法
一. 原理 離子交換色譜的固定相是交換劑,根據交換劑性質可分為: 陽離子交換劑和陰離子交換劑。 交換劑由固定的離子基團和可交換的平衡離子組成。當流動相帶著組分離子通過離子交換柱時,組分離子與交換劑上可交換的平衡離子進行可逆交換,最后達到交換平衡,陰陽離子的交換平衡可表示為: 陽離子交換: R+Y -+ X -= R+X-+ Y- 陰離子交換: R-Y+ + X+ = R-X++ Y+ R+ 、R-—為交換劑上的固定離子基團,如RSO3-或RNH3+; Y+、Y-—為可交換的平衡離子,可以是H+、Na+或OH-、Cl-等 X+ 、X-—為組分離子。 組分離子對固定離子基團的親和力強,分配系數大,其保留時間長;反之,分配系數小,其保留時間短;因此: 離子交換色譜:是根據不同組分離子對固定離子基團的親和力的差別而達到分離的目的。 二. 固定相 離子交換色譜固定相:早期離子交換色譜法采用離子......閱讀全文
離子交換色譜
洗脫方式的選擇,離子交換色譜洗脫方式有三種:一是改變緩沖液pH,使蛋白質從吸附狀態變為解吸附狀態。如在陰離子交換色譜中,通過降低流動相pH使吸附在柱子上的帶負電荷的蛋白質帶正電,從而達到解吸附,在陽離子交換色譜中則是通過升高流動相pH的方法達到解吸附;二是增加緩沖液的離子強度,將吸附強的分子從離子交
離子交換色譜
離子交換色譜 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 離子交換色譜是將離子交換基因(CM、SP、Q、DEAE等)鍵合于一定的惰性載體(纖維素、交聯葡聚糖,交聯瓊脂糖等)之上,并以此作
離子交換色譜
實驗方法原理離子交換色譜是將離子交換基因(CM、SP、Q、DEAE等)鍵合于一定的惰性載體(纖維素、交聯葡聚糖,交聯瓊脂糖等)之上,并以此作為固定相,依據樣品所帶電荷的不同,從而與固定相上的離子交換基團相互作用的程度不同而進行分離的一種色譜方法。離子交換色譜技術已廣泛用于蛋白質、多肽、寡核苷酸、病毒
高效離子交換色譜
應用離子交換的原理,采用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子,這在離子色譜中應用最廣泛,其主要填料類型為有機離子交換樹脂,以苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架,在苯環上引入磺酸基,形成強酸型陽離子交換樹脂,引入叔胺基而成季胺型強堿性陰離子交換樹脂,此交換樹脂具有大孔或薄殼型或多孔表面層型的物理結構,以便于
離子交換色譜概述
離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化方法,其原理是指被分離物質所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結合,這種帶電分子與固定相之間的結合作用是可逆的,在改變pH 或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時,離子交換劑上結合的物質可與洗脫液中的離子發生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質的電荷不同,
離子交換色譜(二)
其他 一、離子交換劑的選擇?1. ?劑型的選擇?在決定選擇離子交換劑的類別之前,先要了解所研究的生物大分子保持生物活性和可溶解性的pH范圍,然后根據其等電點以及其在上述pH范圍內的電泳行為觀察大分子的帶電情況,再據此選擇合適的離子交換劑。具體方法是;在流動相pH條件下進行電泳,向陽極泳動的蛋白質,可
離子交換色譜(一)
實驗方法原理 離子交換色譜是將離子交換基因(CM、SP、Q、DEAE等)鍵合于一定的惰性載體(纖維素、交聯葡聚糖,交聯瓊脂糖等)之上,并以此作為固定相,依據樣品所帶電荷的不同,從而與固定相上的離子交換基團相互作用的程度不同而進行分離的一種色譜方法。離子交換色譜技術已廣泛用于蛋白質、多肽、寡核苷酸、病
離子交換色譜儀離子交換介質
離子交換色譜儀離子交換介質由基質、活性基團和可交換離子組成,按基質的組成和性質可分為疏水性離子交換劑(樹脂)和親水性離子交換劑。一、疏水性離子交換劑(樹脂):疏水性離子交換劑是一種與水親和力較小的合成樹脂。最常見的是由苯乙烯與交聯劑二乙烯苯反應生成聚合物,在此結構中再以共價鍵引入不同的電荷基團制成的
離子交換色譜儀離子交換樹脂簡介
離子交換色譜儀離子交換樹脂是由苯乙稀和二乙烯基苯聚合而成的網狀結構,不溶于水和有機溶劑,性質穩定。一、離子交換樹脂的類型:1、陽離子交換樹脂:可交換的離子為陽離子。應注意PH值范圍,否則交換容量急劇下降。2、陰離子交換樹脂:可交換的離子為陰離子。三、離子交換樹脂的特性:1、交聯度:表示交聯劑在樹脂中
高效離子交換色譜儀離子交換劑
高效離子交換色譜儀離子交換劑由基質、活性基團和可交換離子(反離子)組成,按基質的組成和性質可分為疏水性離子交換劑和親水性離子交換劑。第一節 疏水性離子交換劑疏水性離子交換劑是一種與水親和力較小的合成樹脂。最常見的是由苯乙烯與交聯劑二乙烯苯反應生成聚合物,在此結構中再以共價鍵引入不同的電荷基團制成的。
離子交換色譜儀陰離子交換樹脂
離子交換色譜儀陰離子交換樹脂是在基質骨架上引入季胺基[-N(CH3)3]、叔胺基[-N(CH3)2]、仲胺基[-NHCH3]和伯胺基[-NH2]制成的。陰離子交換樹脂按胺基堿性強弱可分為強堿性、弱堿性和中等堿性陰離子交換樹脂。一、強堿性陰離子交換樹脂:強堿性陰離子交換樹脂是以季胺基為交換基團的離子交
離子交換色譜儀酸性離子交換樹脂
離子交換色譜儀酸性離子交換樹脂有強酸性離子交換樹脂、弱酸性離子交換樹脂和中等酸性離子交換樹脂。一、強酸性離子交換樹脂:強酸性離子交換樹脂一般是以磺酸基(-SO3H)為活性基團的陽離子交換樹脂。含磺酸基的強酸性離子交換樹脂是以苯乙烯為母體,以二乙烯苯為交聯劑共聚后再經磺化引入磺酸基制成的。常用R-S
離子交換色譜儀離子交換樹脂類型
在離子交換色譜儀離子交換樹脂中,常用的是由苯乙烯聚合而成為長的鏈狀分子,二乙烯苯把各鏈狀分子交聯成立體型網狀體,在此結構中再以共價鍵引入不同性質的電荷基團而制成。一、陽離子交換樹脂:??????? 陽離子交換樹脂的電荷基團帶負電,反離子帶正電,可與溶液中的陽離子或帶正電荷化合物進行交換反應。????
離子交換色譜儀離子交換樹脂分類
離子交換色譜儀離子交換樹脂由基質、活性基團和可交換離子組成,是一種與水親和力較小的人工合成樹脂,zui常見的是由苯乙烯與交聯劑二乙烯苯反應生成的聚合物,在此結構中再以共價鍵引入不同的電荷基團。離子交換樹脂含有大量的活性基團,交換容量大,流速快,機械強度大,主要用于無機離子、有機酸、核苷酸和氨基酸等小
離子交換色譜儀離子交換樹脂類型
在離子交換色譜儀離子交換樹脂中,常用的是由苯乙烯聚合而成為長的鏈狀分子,二乙烯苯把各鏈狀分子交聯成立體型網狀體,在此結構中再以共價鍵引入不同性質的電荷基團而制成。一、陽離子交換樹脂:陽離子交換樹脂的電荷基團帶負電,反離子帶正電,可與溶液中的陽離子或帶正電荷化合物進行交換反應。按電荷基團酸性強弱可分為
離子交換色譜儀離子交換劑(三)
第二節 親水性離子交換劑?親水性離子交換劑(多糖基離子交換劑)與水親和力較大,有纖維素離子交換劑、葡聚糖離子交換劑和瓊脂糖離子交換劑等。一、纖維素離子交換劑:又稱離子交換纖維素,是以微晶纖維素為基質,引入電荷基團而制成。微晶纖維素(纖維素膠或結晶纖維素)是將纖維性植物材料與無機酸搗成漿狀,經處理使之
離子交換色譜儀離子交換劑類型
離子交換色譜儀離子交換劑有離子交換樹脂、多糖基離子交換劑和離子交換鍵合相等類型。一、離子交換樹脂:1、凝膠型離子交換樹脂:溶脹空隙。(1)強酸性陽離子交換樹脂:1)活性基團:-SO3H。2)典型交換反應:RSO3H + NaCl = SO3Na + HCl3)特點:使用時不受pH值限制。(2)弱酸性
離子交換色譜儀離子交換劑(一)
第一節 疏水性離子交換劑?疏水性離子交換劑是一種與水親和力較小的合成樹脂。最常見的是由苯乙烯與交聯劑二乙烯苯反應生成聚合物,在此結構中再以共價鍵引入不同的電荷基團制成的。一、按引入電荷基團的性質分類:1、陽離子交換樹脂:陽離子交換樹脂的電荷基團帶負電,反離子帶正電,可與溶液中的陽離子或帶正電荷化合物
離子交換色譜儀離子交換劑(二)
4、兩性樹脂:兩性樹脂是同時含有酸、堿兩種基團的離子交換樹脂,相反電荷的活性基團可以在同一條分子鏈上,也可以在兩條相接近的大分子鏈上。有強堿-弱酸型和弱酸-弱堿型。兩性樹脂再生是當溫度自25℃升至高85℃時,水的解離度增加,使H+和OHˉ的濃度增大30倍。可作為再生劑。二、按基質結構分類:合成疏水性
離子交換色譜的應用
離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應用于無機離子的分離,而且廣泛地應用于有機和生物物質,如氨基酸、核酸、蛋白質等的分離,在生物化學領域得到了廣泛的應用。
離子交換色譜的原理
離子交換是利用一種不溶性高分子化合物,它的分子中具有解離性基團(交換基),在水溶液中能與溶液中的其他陽離子或陰離子起交換作用。此種交換反應都是可逆的,一般也都是遵循化學平衡的規律。雖然交換反應都是平衡反應,但在色譜柱上進行時,由于連續添加新的交換溶液,平衡不斷按正反應方向進行,直至完全,因此可以
離子交換色譜的應用
離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應用于無機離子的分離,而且廣泛地應用于有機和生物物質,如氨基酸、核酸、蛋白質等的分離。
離子交換色譜法
離子交換色譜法:利用離子交換原理和液相色譜技術的結合來測定溶液中陽離子和陰離子的一種分離分析方法,利用被分離組分與固定相之間發生離子交換的能力差異來實現分離。離子交換色譜主要是用來分離離子或可離解的化合物。它不僅廣泛地應用于無機離子的分離,而且廣泛地應用于有機和生物物質,如氨基酸、核酸、蛋白質等的分
高效離子交換色譜簡介
高效離子交換色譜,應用離子交換的原理,采用低交換容量的離子交換樹脂來分離離子,這在離子色譜中應用最廣泛,其主要填料類型為有機離子交換樹脂,以苯乙烯二乙烯苯共聚體為骨架,在苯環上引入磺酸基,形成強酸型陽離子交換樹脂,引入叔胺基而成季胺型強堿性陰離子交換樹脂,此交換樹脂具有大孔或薄殼型或多孔表面層型
離子交換色譜法
以離子交換樹脂或化學鍵合離子交換劑為固定相,利用被分離組分離子交換能力的差別或選擇性系數的差別而實現分離的色譜方法稱為離子交換色譜法。按照可交換離子所帶電荷符號的不同又可分為陽離子交換色譜法和陰離子交換色譜法。
離子交換色譜的種類
1 前言 離子交換色譜是蛋白純化技術中常用的一種純化方法,其原理是指被分離物質所帶的電荷可與離子交換劑所帶的相反電荷結合,這種帶電分子與固定相之間的結合作用是可逆的,在改變pH 或者用逐漸增加離子強度的緩沖液洗脫時,離子交換劑上結合的物質可與洗脫液中的離子發生交換而被洗脫到溶液中。由于不同物質
離子交換色譜的分類
離子交換劑分為兩大類,即陽離子交換劑和陰離子交換劑。各類交換劑根據其解離性大小,還可分為強、弱兩種,即 強酸劑 陽離子交換劑 弱酸劑 強堿型 陰離子交換劑 弱堿型 。陽離子交換劑陽離子交換劑中的可解離基因是磺酸(-SO3H)、磷酸(-PO3H2)、 羧酸(COOH)和酚羥基(-OH)等酸性基。某些
離子交換色譜法
一. 原理 離子交換色譜的固定相是交換劑,根據交換劑性質可分為: 陽離子交換劑和陰離子交換劑。 交換劑由固定的離子基團和可交換的平衡離子組成。當流動相帶著組分離子通過離子交換柱時,組分離子與交換劑上可交換的平衡離子進行可逆交換,最后達到交換平衡,陰陽離子的交換平衡可表示為: 陽離子
離子交換色譜法
一. 原理 離子交換色譜的固定相是交換劑,根據交換劑性質可分為: 陽離子交換劑和陰離子交換劑。 交換劑由固定的離子基團和可交換的平衡離子組成。當流動相帶著組分離子通過離子交換柱時,組分離子與交換劑上可交換的平衡離子進行可逆交換,最后達到交換平衡,陰陽離子的交換平衡可表示為:
離子交換色譜的原理
離子交換色譜的原理離子交換是利用一種不溶性高分子化合物,它的分子中具有解離性基團(交換基),在水溶液中能與溶液中的其他陽離子或陰離子起交換作用。此種交換反應都是可逆的,一般也都是遵循化學平衡的規律。雖然交換反應都是平衡反應,但在色譜柱上進行時,由于連續添加新的交換溶液,平衡不斷按正反應方向進行,直至