DNA芯片的類型和制作

　　DNA芯片的類型和制作

　　迄今為止，絕大多數的生物芯片都是DNA芯片，所以制作芯片的方法也多是為DNA芯片設計的。目前的DNA芯片有兩類。

　　①片上就位合成寡核苷酸點陣芯片(ONA)。

　　②用微量點樣技術制作cDNA點陣芯片(CDA)。

　　雖然ONA可以按常規方法先合成寡核苷酸，再點加于陣列的方法來制作，但應用就位合成法已證明是更成功的途徑。這一技術中采用了多項先進的工藝，例如：

　　1、利用組合化學的原理安排各寡核苷酸的位點，使制成的芯片在反應后較容易地尋址。

　　2、用表面化學的方法處理及衍生化基片(玻璃片、硅片或尼龍片)表面，使核苷酸能固定在其上，并耐受合成循環中某些試劑的侵蝕。

　　3、用光導向平版印刷技術，使芯片表面可用屏蔽物選擇性地使不同位點受光照脫保護，從而可定點合成寡核苷酸中的各個堿基。

　　最后還應用了自動核酸合成的方法，經過脫保護、活化、偶聯、戴帽和氧化等步驟逐個地聯結上各個核苷酸。與玻片連接的是核苷酸的3’端。

　　用就位合成法已可以從最初的100個位點合成八核苷酸到目前的在1.6平方厘米上的40萬個點合成20個核苷酸陣列。看來要將人類基因組3×10[sup]9[/sup]個堿基全部集成于一塊芯片上的理想是可以實現的。

　　在另一方面機械微點樣技術制作CDA芯片則主要歸功于物理學的成就。精密機械手將帶有多個滴加頭的點樣裝置，從96孔

　　或384孔板上將cDNA克隆迅速面定量地接觸滴加至已衍生處理的基片上，每點1nl，用此法接上的核酸長度可為500一5000個核

　　苷酸。所以雜交錯配的可能性，也就是選樣性，有較大改善，可以逐句破譯序列密碼而不是逐字閱讀序列。另外點加法的優點是可以制作各種生物芯片，不局限于制作DNA芯片。目前已有制作免疫芯片的報道。當然也可適用于受體——藥物，凝集素一多糖等更廣泛的領域。

　　機械滴加法的另一種方式是噴墨點加法。在此法中進行滴加的樣品吸入微型噴嘴，噴嘴由壓電晶體驅動，壓縮噴嘴定量地將樣品噴點于玻片上。

　　機械點樣法可以制成每平方米含10000個點的陣列芯片，每天可制成100片左右。