七、ELISA 實驗中關節滑液的采集、處理和保存
1、口腔關節：患者取坐位，常規消毒后，作皮下及關節后區局部浸潤麻醉。然后囑患者大張口，采用裝有2ml生理鹽水的注射器（5號針頭）作關節上腔穿刺，髁后進針，針尖方向斜向前、內、上，抵達關節結節后斜面后稍后退，回抽如發現有淡黃色液體，即表明已進入關節上腔，注入2ml生理鹽水，反復注入、回抽五次；
2、膝骨關節滑液：無菌穿刺取得關節液3ml；
3、將采集的關節滑液用離心機4℃，1500rpm離心15min；
4、取上清。分裝凍存備用：
2-8℃下，可放置保存24-48小時；
-20℃下，可放置保存1個月；
-70℃下，可放置保存6個月；
5、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA 測定。
八、ELISA 實驗中細胞的采集、處理和保存
1、細胞板貼壁細胞直接裂解：細胞棄培養上清，PBS清洗三遍，加適量裂解液重懸（過量會降低濃度，很重要），超聲破碎或用槍吹打100下；
2、細胞團塊裂解：細胞團塊加1ml PBS重懸（注意不要過于劇烈造成細胞破裂），1000rpm離心5分鐘，棄上清，重復3次，加適量裂解液重懸（過量會降低濃度，很重要），超聲破碎或用槍吹打100下；
3、懸浮細胞裂解：轉移至EP管，1000rpm離心5分鐘，棄上清，PBS洗三遍，加適量裂解液重懸（過量會降低濃度，很重要），超聲破碎或用槍吹打100下；
4、冰上裂解30mins，用離心機4℃，12000rpm離心10mins；
5、取上清。分裝凍存備用：
2-8℃下，可放置保存24-48小時；
-20℃下，可放置保存1個月；
-70℃下，可放置保存6個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA 測定。
根據要檢測的指標，必要時需要加入蛋白酶抑制劑。如果處理后馬上檢測，也可以不加這些抑制劑直接裂解，裂解液的量根據不同細胞系會有不同，原則為裂解后總蛋白濃度不低于0.5mg/ml。
九、ELISA 實驗中易碎軟組織（腦、肝、腎）的采集、處理和保存
1、稱取組織塊（50mg-100mg），按質量體積比1：9加入裂解液（例：50mg組織濕重加入450ul裂解液）；
2、冰水浴中用眼科剪剪碎組織塊；
3、冰水浴中電動勻漿機或超聲破碎；
4、用離心機4℃，12000rpm離心15mins；
5、取上清。分裝凍存備用：
2-8℃下，可放置保存24-48小時；
-20℃下，可放置保存1個月；
-70℃下，可放置保存6個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA 測定。
根據要檢測的指標，必要時需要加入蛋白酶抑制劑。如果處理后馬上檢測，也可以不加這些抑制劑直接裂解。
十、ELISA 實驗中心肌、肌肉組織的采集、處理和保存
1、稱取組織塊（50mg-100mg），按質量體積比1：9加入裂解液（例：50mg組織濕重加入450ul裂解液）；
2、冰水浴中用眼科剪剪碎組織塊；
3、冰水浴中研磨棒研磨或超聲破碎；
4、用離心機4℃，12000rpm離心15mins；
5、取上清。分裝凍存備用：
2-8℃下，可放置保存24-48小時；
-20℃下，可放置保存1個月；
-70℃下，可放置保存6個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA 測定。
心肌、肌肉組織無法用勻漿機勻漿，組織塊會絞入鉆頭形成團塊，無法被勻漿機刀頭切碎，需用研磨或超聲才能充分破碎。根據要檢測的指標，必要時需要加入蛋白酶抑制劑。如果處理后馬上檢測，也可以不加這些抑制劑直接裂解。
十一、ELISA 實驗中上皮組織（皮膚、膀胱、腸）及人或大鼠眼角膜的采集、處理和保存
1、稱取組織塊（50mg-100mg），按質量體積比1：9加入裂解液（例：50mg組織濕重加入450ul裂解液）；
2、冰水浴中用眼科剪剪碎組織塊；
3、冰水浴中研磨棒研磨或超聲破碎；
4、用離心機4℃，12000rpm離心15mins；
5、取上清。分裝凍存備用：
2-8℃下，可放置保存24-48小時；
-20℃下，可放置保存1個月；
-70℃下，可放置保存6個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA 測定。
上皮組織韌性較強，較難剪碎，需要增加組織破碎時間才能充分破碎。根據要檢測的指標，必要時需要加入蛋白酶抑制劑。如果處理后馬上檢測，也可以不加這些抑制劑直接裂解。
十二、ELISA 實驗中小顆粒組織（神經節、小鼠眼角膜、鞏膜）的采集、處理和保存
1、加入200ul裂解液；
2、冰水浴中用顯微剪剪碎組織塊；
3、冰水浴中研磨棒研磨或超聲破碎；
4、用離心機4℃，12000rpm離心15mins；
5、取上清。分裝凍存備用：
2-8℃下，可放置保存24-48小時；
-20℃下，可放置保存1個月；
-70℃下，可放置保存6個月；
6、根據你的實驗需要，取適量上清夜進行各種ELISA 測定。
小顆粒組織量比較小，會有靶標蛋白量低于檢測限度的風險，注意組織勻漿離心后上清總蛋白濃度需大于0.5mg/ml。根據要檢測的指標，必要時需要加入蛋白酶抑制劑。如果處理后馬上檢測，也可以不加這些抑制劑直接裂解。
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