藥品研發中HPLC液相色譜柱的選擇和流動相的優化
分析方法的開發主要包括色譜柱的選擇、流動相的選擇、檢測波長的選擇和梯度的優化幾個方面。目前高效液相色譜法（HPLC)多使用反相色譜法，本文主要以反相為例講解。1.液相色譜柱的選擇 原料藥生產對產品的純度和雜質含量的要求非常苛刻，要求檢測使用的色譜柱有較高的理論塔板數，能提供更好的分離度，從而對可能存在的雜質有更大的分離的可能性，所以5um填料的色譜柱長要250mm，3.5um填料的柱長要150mm，基本上都是各個粒徑柱長最長的。喜歡近兩年新出的亞二微米填料的色譜柱，50mm柱長就能提供很高的理論塔板數，而且柱長和粒徑小了，流速增加很多，能節省很多的分析時間，極大的提高工作效率。一般選用直徑為4.6mm或3.0mm的柱子，太細了可能會增大柱外效應。填料的孔徑對于小分子合成藥物不需要考慮，普通的分析柱都在100A左右......閱讀全文
C18液相色譜柱色譜柱液相色譜柱
分析型到制備型一套完整的填料體系，目前可提供的填料鍵合相有C18、C4、C8、SI、NH2、CN、Phenyl、Diol以及手性填料TBB和 DMB。孔徑有60A、100A和300A三種，滿足不同條件的分析。填料粒徑可以提供3.5um、5um、7um、10um、13um和16um六種。可謂品
液相色譜柱與高效液相色譜柱的區別
普通液相柱與高效液相柱的原理都是一致的，只不過后者是高效的可以縮短檢測的時間，節省流動相，大大節省時間。普通的液相色譜柱的徑口一般是是5um，高效液相色譜柱的徑口一般在3.5um有的在3um甚至在1.7um，相比之下高效液相柱比普通液相柱徑口更小，管長更短、柱壓大，而普通液相柱承受不住高壓，所以沒有
液相色譜柱的色譜柱再生
液相色譜柱的色譜柱再生? ?液相柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降，需要定期進行徹底清洗和再生。 1、反相柱 分別用甲醇：水＝90：10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次
液相色譜柱的色譜柱再生
?液相柱是消耗品，會隨使用時間或進樣的次數增加，出現色譜峰高降低，峰寬加大或出現肩峰，柱效下降，需要定期進行徹底清洗和再生。 1、反相柱 分別用甲醇：水＝90：10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。 2、正相柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱通論
選擇液相色譜柱簡單思路1. 確定分離目的 ? ? ?確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命，低的操作成本等等。2. 評估分析物的化學性質 ? ? ?評估分析物的化學性質. . 諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。3. 選擇合適的色譜柱 ? ? ?了解色譜填料的物理和化學性
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱?現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。?（1）硅膠基質填料：?1、正相色譜?正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團（NH2，APS）和氰基團（
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明： （1）色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容
液相色譜柱通論
選擇液相色譜柱簡單思路1. 確定分離目的 ? ? ?確定你的應用是否要求高分離度、短分析時間、高靈敏度、長柱壽命，低的操作成本等等。2. 評估分析物的化學性質 ? ? ?評估分析物的化學性質. . 諸如化學結構、溶解性、穩定性等等。3. 選擇合適的色譜柱 ? ? ?了解色譜填料的物理和化學性質。A填
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬，要做合適的選擇，必須對此有一定的認識和了解。（1）硅膠基質填料：1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團（NH2，APS）和氰基團（CN，C
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；④半制備柱，內徑＞5mm；⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類 ①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；②窄徑柱（narrow bore），內徑1~2mm，柱長10~20cm； ③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm； ④半制備柱，內徑＞5mm； ⑤實驗室制備柱，內徑20~4
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明：（1）色譜柱使用前注意事項：色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10％左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易
液相色譜柱保護柱選擇
在高效液相分析檢測樣品的過程中，色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統的污染，從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。來自于色譜系統的污染主要指，HPLC儀器系統中部件磨損而產生的固體顆粒，以及流動相系統過濾不完全殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指，未完全溶解的樣品或者已完全溶解的樣品進入色譜系統中，由于樣
高效液相色譜的色譜柱
填料和流動相的組分應按各品種項下的規定，常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之，氰基或氨基鍵合硅膠也有使用；離子交換填料用于離子交換色譜；凝膠或玻璃微球等，用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外，柱溫為室溫，檢測器為紫外吸收檢測器。在用
液相色譜色譜柱的保養
??? 液相色譜是一類分離與分析技術，其特點是以液體作為流動相，發展到今天已經成為了包括科學研究、工業生產、環境保護、食品安全在內多個領域常用的科研分析儀器之一。與此同時，隨著液相色譜的普及，因為儀器故障或者使用不規范導致的事故新聞也時有發生，因此，了解液相色譜相關的規范與使用方法，對于使用者來說尤
液相色譜柱和液質色譜柱能混用嗎
液相色譜柱和液質色譜柱能混用1.色譜柱它包括空柱和填料。空柱是內壁拋光的不銹鋼管，內徑為4～5mm，長100～250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈，用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中，用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷(含 0.05%
液相色譜柱和液質色譜柱能混用嗎
液相色譜柱和液質色譜柱能混用1.色譜柱它包括空柱和填料。空柱是內壁拋光的不銹鋼管，內徑為4～5mm，長100～250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈，用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中，用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷(含 0.05%
液相色譜柱和液質色譜柱能混用嗎
液相色譜柱和液質色譜柱能混用1.色譜柱它包括空柱和填料。空柱是內壁拋光的不銹鋼管，內徑為4～5mm，長100～250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈，用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中，用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷(含 0.05%
液相色譜柱和液質色譜柱能混用嗎
液相色譜柱和液質色譜柱能混用1.色譜柱它包括空柱和填料。空柱是內壁拋光的不銹鋼管，內徑為4～5mm，長100～250mm。按氣相色譜法中洗滌空柱的方法洗凈，用勻漿法填充固定相。將此柱裝入儀器的管路中，用柱式機械往復泵輸入新鮮脫氣的流動相。等基線平直后可用苯、萘、菲的混合試液，用正己烷(含 0.05%
液相色譜柱注意事項和維護－液相色譜柱活化方法
液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱；反相柱填料主要以硅膠為基質，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱，GPC柱，聚合物填料柱等
如何選擇液相色譜柱保護柱？
在高效液相分析檢測樣品的過程中，色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統的污染，從而導致色譜柱耐用性差、壽命縮短。 來自于色譜系統的污染主要指，HPLC儀器系統中部件磨損而產生的固體顆粒，以及流動相系統過濾不完全殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指，未完全溶解的樣品或者已完全溶解的樣品進入色譜系統中
如何選擇液相色譜柱保護柱？
從材質上分:不銹鋼材質和PEEK(聚醚醚酮)材質? PEEK 材質優缺點--樣品對金屬離子比較敏感時，選擇PEEK材質比較合適，比如某些蛋白分析會用到PEEK材質的分析柱，主要就是考慮到這方面的因素;? 不銹鋼材質優缺點--大部分小分子化合物的分析，選擇不銹鋼材質保護柱居多，特別是當流動相體系
如何提高液相色譜柱柱效
1、提高液相色譜柱柱效的方法（1）降低移動相的流速,但會使分析時間延長。（2）減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。（3）減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。（4）選用低粘度的移動相,以利于快速傳質,但卻不利于多組份分析。（5）適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,